王晔
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
- 供职机构：浙江大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 活体红色荧光成像评估Ag85A／B DNA疫苗联合抑瘤效应的实验研究被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨可视、直观评估Ag85A/B DNA疫苗联合抑瘤效应的科学方法。方法:采用红色荧光蛋白基因DsRed-Express标记小鼠膀胱癌细胞BTT739,经G418抗性筛选获得稳定表达RFP的细胞克隆BTT739-RFP,将BTT739-RFP细胞接种到615小鼠皮下,建立可视化膀胱癌移植瘤模型。将建模成功的32只小鼠随机分为pVAX1-Ag85A/B联合组:BCG组;空白质粒(pVAX1);生理盐水(NS)。建模后第7、14、21天注射相应的药物。分别于给药前即第7和第28天进行活体荧光成像,进行统计学处理。并于第28天检测血清特异性抗体水平和脾淋巴细胞的增殖活性。结果:构建了稳定表达RFP的BTT739细胞;成功建立可视化膀胱癌模型,成瘤率100%;经治疗后,pVAX1-Ag85A/B组的荧光强度明显低于pVAX1组和NS组,与BCG组无统计学差异。pVAX1-Ag85A/B组的抗体滴度为1:1 000,BCG免疫组的抗体滴度为1:800。pVAX1-Ag85A/B组和BCG组均可提高淋巴细胞增殖活性,二者差异无统计学意义。结论:应用Ag85A/B DNA疫苗可提高膀胱癌小鼠的免疫功能,其效果与BCG差异无统计学意义;活体红色荧光体外成像的评估体系与细胞水平的分析一致。
- 汪海龙杨晓峰付奎杨彬王炜王晔
- 关键词：膀胱癌DNA疫苗
- 小鼠膀胱癌红色荧光移植瘤模型建立及荧光影像学特点分析被引量：2
- 2010年
- 目的 研究红色荧光蛋白（DsRed）标记小鼠膀胱癌生长转移的分子荧光影像学特征.方法 采用脂质体2000介导基因转染法将chickenβ-actin-DsRed-Neo载体转染到小鼠膀胱癌BTT739细胞株;G418筛选后获得稳定表达DsRed的单克隆细胞（BTT739-DsRed）;615小鼠24只随机分3组,后肢皮下注射细胞悬液,第1、2组注射BTT739-DsRed细胞,第3组注射BTT739细胞,建立移植瘤模型.MAESTRO活体成像仪设定激发光波长560～580 nm,发射光波长590～610 nm,曝光时间5000 ms,连续观察4周,第2组每周处死小鼠并剖开成像,记录肿瘤生长转移的荧光影像,测定肿瘤大小及荧光信号值.统计分析肿瘤大小与荧光信号值,全身成像与剖开成像之间的关系.结果 第1周观测到发红色荧光的肿瘤,第2周观测到肿瘤中央局部荧光缺失,病理证实为肿瘤坏死组织及少量结缔组织,第4周观测到局部淋巴结转移,未见远处转移.第1组连续4周肿瘤荧光信号值依次为（89±18）、（122±55）、（133±69）、（715±343）counts;肿瘤大小依次为（13±4）、（45±22）、（83±29）、（253±67）mm2;第2组全身成像4周肿瘤大小依次为（12±3）、（50±23）、（90±29）、（290±74）mm2,剖开成像依次为（12±5）、（72±30）、（141±43）、（524±237）mm2;肿瘤大小与荧光信号强度呈线性正相关（r=0.74,t=3.97,P〈0.05）,全身成像与剖开成像肿瘤大小呈线性正相关（r=0.97,t=10.00,P〈0.05）,全身成像测得的肿瘤大小为剖开后成像的（70.85±17.13）%. 结论小鼠膀胱癌红色荧光移植瘤模型可以直观、连续、敏感地观察肿瘤的生长和转移,随着肿瘤增大,荧光范围也增大,肿瘤发生坏死后荧光消失,肿瘤发生转移后红色荧光表达亦随之转移.
- 杨彬杨晓峰付奎汪海龙王炜王晔
- 关键词：红色荧光蛋白膀胱肿瘤全身成像
- 活体荧光成像评估Ag85A和Ag85B DNA疫苗对小鼠膀胱癌移植瘤的疗效被引量：2
- 2009年
- 目的:运用活体红色荧光成像技术及影像学特征评估Ag85A DNA疫苗和Ag85B DNA疫苗对膀胱癌的免疫治疗效果。方法:构建稳定转染香菇珊瑚红色荧光蛋白(discosomasp red fluorescent protein,DsRed)基因的小鼠膀胱癌BTT细胞(BTT-DsRed),建立BTT-DsRed细胞移植瘤小鼠模型,将建模成功的24只小鼠随机分为pVAX1-Ag85A DNA疫苗组、pVAX1-Ag85B DNA疫苗组和生理盐水治疗组,各组分别于肿瘤细胞接种后的第6天肌内注射pVAX1-Ag85A、pVAX1-Ag85B及生理盐水,然后用活体荧光成像系统检测移植瘤的生长和转移情况。结果:成功制备了稳定转染DsRed基因的BTT-DsRed细胞,BTT-DsRed接种小鼠建立可视化红色荧光膀胱癌移植瘤模型。重组质粒pVAX1-Ag85A和pVAX1-Ag85B治疗后的第2周,活体荧光成像显示pVAX1-Ag85B治疗组小鼠肿瘤荧光强度明显低于生理盐水组(P<0.05);治疗后第3周,pVAX1-Ag85A和pVAX1-Ag85B组小鼠肿瘤荧光强度都明显低于生理盐水组(P<0.01),但pVAX1-Ag85B与pVAX1-Ag85A组无明显差别(P>0.05);pVAX1-Ag85B组小鼠淋巴结转移率(25.0%)明显低于生理盐水组(87.5%,P<0.01)和pVAX1-Ag85A组(62.5%,P<0.05)。结论:应用活体红色荧光成像技术能够动态、灵敏、可视化地评估DNA疫苗对小鼠膀胱癌移植瘤的疗效;Ag85A和Ag85B DNA疫苗均具有抗肿瘤免疫疗效。
- 付奎杨晓峰汪海龙杨彬王炜王晔刘晶
- 关键词：AG85AAG85BDNA疫苗
