王春婷
- 作品数：7 被引量：6H指数：2
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Association between DNA variant sites in the apo-lipoprotein-A5 gene (APOA5) and coronary heart disease in Chinese
- The recently discovered APOA5 gene has been shown to be important in determining plasma triglyceride levels, a...
- 刘合焜张思仲李雪飞王春婷周斌郑克勤黄德嘉李贵新
- 文献传递
- 小鼠肿瘤/睾丸抗原Biot2对NIH3T3细胞增殖的影响
- 2007年
- 目的:研究新发现的小鼠肿瘤/睾丸抗原Biot2对小鼠NIH3T3细胞生物学行为的影响,探讨基因的生物学功能。方法:构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-Biot2,由脂质体包裹稳定转染NIH3T3细胞,用Realtime RT-PCR、Western blot等方法筛选和鉴定Biot2表达阳性细胞克隆,研究其与细胞增殖相关的生物学特征的变化。结果:成功构建真核表达重组质粒pcDNA3.1(+)-Biot2,并稳定转染于NIH3T3细胞。与对照组相比,转染了Biot2cDNA的NIH3T3细胞生长速率明显增快。结论:成功地建立稳定转染小鼠新基因Biot2的NIH3T3细胞克隆;Biot2基因能影响细胞增殖的调节,促进NIH3T3细胞的增殖,为进一步研究基因生物学功能奠定了基础。
- 王春婷张鹏彭枫阮绪芝杨寒朔
- 关键词：睾丸组织特异表达增殖
- 体内靶向树突状细胞的腺病毒通用肿瘤疫苗的构建被引量：3
- 2009年
- 目的采用细胞菌内同源重组法构建人端粒酶逆转录酶(hTRT)重组腺病毒,并将其以甘露聚糖进行表面修饰,以探索构建一种新型的体内靶向树突状细胞(DC)的通用型肿瘤抗原。方法将编码hTRT的cDNA序列自pBABE-PURO-hTERT质粒亚克隆至腺病毒质粒pAdTrack-CMV中,将后者与骨架质粒pAdEasy-1经电冲击共转化宿主菌BJ5183进行同源重组。经过克隆筛选获得正确的重组腺病毒质粒后,将其线性化转染293细胞包装获得重组腺病毒。将重组腺病毒扩增纯化,以甘露聚糖进行表面修饰。最后将甘露聚糖修饰后的腺病毒免疫小鼠。结果重组腺病毒能在293细胞产生细胞病变效应(CPE),腺病毒转染后的细胞通过PCR及免疫印迹能测到hTRT的表达。重组腺病毒经过甘露聚糖修饰后,经高碘酸席碱染色呈阳性。重组腺病毒能在小鼠体内靶向脾脏DC细胞。结论成功构建能体内靶向DC细胞的hTRT重组腺病毒,为通用型肿瘤疫苗的研发作出了新的探索。
- 丁振宇王椿宿静梅魏于全王春婷
- 关键词：端粒酶逆转录酶腺病毒肿瘤疫苗
- 小鼠睾丸高表达新基因Biot2-L表达谱分析及对睾丸发育影响的初步研究
- 2009年
- 目的分析小鼠可能的生精相关的新基因Biot2-L的组织表达谱,探讨其对睾丸发育的影响。方法利用生物信息学方法分析Biot2-L基因结构特征,不同物种间同源性情况。用RT-PCR、Real-time RT-PCR技术检测该基因在多种正常组织间的表达与定位,以及在睾丸发育过程中该基因表达的动态变化情况。结果获得基因全长编码序列,生物信息学分析显示编码Biot2-L蛋白中有一CCDC7结构域,在高等哺乳动物如人、大鼠、牛、猩猩等中发现同源蛋白,氨基酸序列同源性达50%以上,均含有CCDC7或相似结构域。RT-PCR证明Biot2-L基因在成年雄性C57小鼠的睾丸组织中大量表达,而在其他10种组织中不表达或低表达。Real-time RT-PCR检测显示Biot2-L基因在睾丸发育过程中呈有规律的动态变化,出生5周时Biot2-L基因开始表达,于7周时达到高峰,老年期时(50周)表达水平下调,表达规律与睾丸发育和生精过程相符。结论Biot2-L基因在成熟睾丸中高表达并随着睾丸发育过程,其表达水平呈有规律变化,提示该基因可能与睾丸发育及生精过程相关。
- 王昊张鹏王春婷
- 关键词：基因睾丸组织表达谱
- SurvivinT34A突变体对小鼠B16肺转移瘤的治疗作用
- 2011年
- 目的研究阳离子脂质体介导的Survivin基因负性突变体SurvivinT34A对小鼠B16肺转移瘤的治疗作用,并探讨其作用机理。方法尾静脉接种小鼠黑色素瘤细胞B16建立肺转移模型,接种后第3 d将18只荷瘤鼠随机分为生理盐水组(NS组)、空载体组(pORF9组)和重组质粒pORF9-mSurvivinT34A治疗组(mSurvivinT34A组),尾静脉给药,每次5μg/只(100μL/只),隔天治疗1次,共治疗5次。在接种后第28 d处死全部小鼠,剥离肺组织,称湿重,在显微镜下计数转移灶数量,测量转移灶大小。然后对肺组织进行HE染色观察各组小鼠肺组织病理变化情况,TUNEL染色检测转移灶中肿瘤细胞的凋亡情况。结果与PORF9组和NS组相比,mSurvivnT34A组小鼠肺组织结构基本保持完整,转移灶减少(P<0.05),肺湿重降低(P<0.05),大量肿瘤细胞发生凋亡(P<0.05)。结论 mSurvivnT34A质粒能够显著抑制小鼠黑色素瘤肺转移灶的形成,其作用机理可能主要为诱导肿瘤细胞发生凋亡。
- 张琳李志勇王春婷
- 关键词：黑色素瘤转移灶基因治疗
- Survivin突变基因抗前列腺癌的体内外研究被引量：2
- 2010年
- 目的探讨Survivin负性显性突变体T34A对前列腺癌细胞体内外增殖和凋亡的影响。方法体外实验采用1,2-二油-3-三甲胺基丙烷(DOTAP)+胆固醇(CHOL)阳脂质体包裹Survivin-T34A质粒转染小鼠前列腺癌细胞株TRAMP-C1,通过流式细胞术观察其对培养的TRAMP-C1细胞增殖和凋亡的影响;体内实验则建立TRAMP-C1前列腺癌皮下移植瘤动物模型,将24只雄性荷瘤C57BL/6小鼠随机分为生理盐水组(NS)、空载质粒组(PORF-9-null)和治疗组(Survivin-T34A),尾静脉给药,观察各组肿瘤体积及毒副反应。取各组皮下移植瘤石蜡包埋后进行TUNEL染色并测定肿瘤细胞凋亡率。结果流式细胞术结果显示转染了阳脂质体包裹的Survivin-T34A质粒后的前列腺癌细胞其细胞凋亡率为46%。肿瘤体积测量结果显示Survivin-T34A组的肿瘤体积小于空质粒组及NS组(P均<0.05)。TUNEL染色结果显示,Survivin-T34A组肿瘤细胞凋亡率高于其它两组(P均<0.05)。结论 Survivin-T34A突变体可抑制小鼠TRAMP-C1前列腺癌的皮下移植瘤,其作用机制与Survivin-T34A能特异并高效地促进该肿瘤细胞凋亡有关。
- 潘黎彭星辰袁庆中冷斐于丹丹单艳李志勇王春婷
- 关键词：前列腺癌凋亡基因治疗
- 小鼠肿瘤/睾丸抗原Biot2的原核表达载体的构建及表达被引量：1
- 2007年
- 目的构建小鼠睾丸特异表达基因Biot2的原核表达载体,表达pQE30-Biot2融合蛋白。方法提取小鼠睾丸组织总RNA,经RT-PCR扩增Biot2基因片段,并将其克隆入原核表达载体pQE30中,构建重组质粒pQE30-Biot2。经限制性内切酶BamHI、HindIII双酶切鉴定及序列测定后,转化E.coliXL-Blue,经IPTG诱导表达组氨酸融合蛋白,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析和Western blot检测。结果构建pQE30-Biot2重组原核表达质粒,表达的融合蛋白经SDS-PAGE分析,在相对分子质量(Mr)约17700处出现了1条蛋白条带,该表达蛋白具有与His-tag单克隆抗体(mAb)特异性的结合能力。结论成功地构建了Biot2基因的原核表达载体,并表达出pQE30-Biot2重组蛋白,为下一步制备多克隆抗体和蛋白功能的深入研究奠定了实验基础。
- 王春婷张鹏彭枫杨寒朔
- 关键词：睾丸组织特异表达
