王宏
- 作品数:10 被引量:13H指数:2
- 供职机构:北京医科大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划卫生部科学研究基金国家自然科学基金更多>>
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- 35ku的PF18-3分子在小鼠胸腺细胞凋亡亚群上的特异表达
- 1999年
- PF1 8 3抗体是一株大鼠抗小鼠胸腺基质细胞单克隆抗体 .在以往的共培养研究中发现该抗体可抑制小鼠胸腺树突状细胞系 (MTSC4)诱导的胸腺细胞凋亡作用 .目的是观察PF1 8 3抗体识别分子 (PF1 8 3分子 )的特点及其在MTSC4诱导的胸腺细胞凋亡中的作用 .利用流式细胞仪对PF1 8 3分子的表达进行了特性分析 ,发现PF1 8 3分子除表达于MTSC4表面外 ,还表达于ConA活化的胸腺细胞上 ,但新鲜胸腺细胞表面无表达 .胸腺细胞与MTSC4共育 48h后 ,PF1 8 3分子表达上调 .流式细胞仪分析PI染色检测凋亡相关亚二倍体及PF1 8 3抗体染色的结果表明 ,PF1 8 3分子特异表达于高亚二倍体含量的凋亡胸腺细胞 .经免疫共沉淀和Westernblotting鉴定 ,凋亡胸腺细胞表达的PF1 8 3分子的分子量为 35ku .该分子可能参与胸腺细胞凋亡过程 .
- 王宏李燕庞学文陈慰峰
- 关键词:胸腺细胞细胞凋亡单克隆抗体
- 离子交换柱层析法纯化重组人IL-4被引量:1
- 1995年
- 用离子交换层析法一步纯化重组人白细胞介素4,该方法简单易行,对样品不产生稀释作用;所得产品具有高纯度(≥95%),高生物学活性(≥10MU/mg)和低毒性(内毒素含量≤0.5ZU/L)的特点,可满足实验室工作的需要.当与凝胶过滤法结合使用时,所得产品纯度可达98%,生物学活性进一步提高.
- 王宏王锦娟李燕刘洁陈慰峰
- 关键词:提纯离子交换
- 重组人IL-4 cDNA及纯化蛋白的鉴定被引量:1
- 1995年
- 构建了重组人白细胞介素4(rhIL—4)表达质粒pBV220/rhIL—4a,并在E.coli中高效表达。经核苷酸序列分析,测出rhIL—4cDNA全序列与国外发表的hIL—4cDNA序列完全相同。其纯化蛋白产品经分子量测定,Western印迹分析,等电点分析,N—端氨基酸序列测定,比活性等测定证明,均符合rhIL—4。
- 张凤蕴余青李晨戴燕王宏姚智庞学文刘洁陈慰峰
- 小鼠胸腺基质细胞单抗PF18-3的凋亡抑制作用及其识别分子的特征分析被引量:2
- 1997年
- 目的:观察单抗PF18-3对小鼠胸腺树突状细胞系(MTSC4)增强胸腺细胞凋亡作用的影响并对PF18-3识别分子进行特征分析。方法:用DNA梯度断裂片段电泳检测PF18-3对凋亡过程的抑制作用;用膜蛋白斑点杂交和免疫共沉淀对其识别分子进行特征分析。结果:PF18-3抑制MTSC4对胸腺细胞凋亡的增强作用。其识别分子为分子量31000的膜蛋白,在不同胸腺基质细胞系分布不同,与其凋亡介导增强作用一致。结论:PF18-3识别分子参与凋亡介导增强过程,为非凋之介导分子CD95/配体(Fas/FasL)分子,值得进一步研究。
- 王宏董海东王芳陈慰峰
- 关键词:胸腺间质细胞单克隆抗体
- 疏水层析纯化人重组白细胞介素-4被引量:1
- 1996年
- 应用疏水层析对大肠杆菌表达的人重组白细胞介素-4(rhIL-4)进行了纯化,含有rhIL-4的包涵体,经洗涤、变性、复性后,以Butyl-Sepharose层析,得到了高纯度的rhIL-4.纯度达97%;回收率为32%;比活性为2×10~7U/mg,讨论了rhIL-4疏水层析的条件,并对不同的方法纯化白细胞介素-4进行了比较.
- 戴燕李燕刘洁王宏陈慰峰
- 关键词:白细胞介素-4疏水层析
- 人PBL及CTLL-2/HIL-4R细胞系对人IL-4增殖应答的特性
- 1996年
- 本文分析了30例正常人PRL经PHA活化的T细胞对IL-2及IL-4的增殖应答特点;及整合有人IL-4受体cDNA的CTLL-2/HIL-4R细胞系对人IL-4的特异增殖应答特点。结果表明,正常人经PHA活化的PBL对IL-2有良好增殖应答曲线者占93%,而对IL-4有良好增殖应答者只占20%。 CTLL-2/HIL-4R细胞系对人IL-4呈规律性增殖应答曲线,且应答敏感性高,可测出0.09u/ml,可推荐作为测定人IL-4生物活性的一种准确方法。
- 李洁徐华刘洁王宏陈慰峰
- 关键词:白细胞介素4细胞系PBL
- 胸腺细胞发育中的凋亡调控被引量:4
- 1999年
- 王宏陈慰峰
- 关键词:胸腺细胞细胞发育细胞凋亡
- 高比活性重组人IL-6的纯化与鉴定
- 1998年
- 目的制备高纯度、高比活性重组人IL-6。方法对已建立的重组表达载体pBMhIL-6进行温度诱导表达,包涵体提取洗涤和变性复性处理,复性的重组人IL-6蛋白经SP-FF强阳离子交换柱一步纯化。结果所得目的蛋白纯度>97%,经N末端氨基酸测序确证为hIL-6,其比活性高达4.5×108U/mg。结论本研究的纯化工艺简便易行,所得产品纯度高。
- 王宏陈慰峰李燕钱晓萍
- 关键词:白细胞介素6色谱柱纯化
- 凋亡相关分子PF18-3在ConA诱导活化后胸腺细胞凋亡中的表达特性分析被引量:1
- 1999年
- 对抗体PF18-3识别分子(PF18-3分子)在胸腺细胞活化后凋亡过程中的表达特性进行了观察分析,结果表明:经ConA活化后胸腺细胞经历活化后凋亡,表现为DNA梯状片段产生的时相后移,活化后期细胞TUNEL染色阳性。经FACS门技术分析确认,PF18-3分子在亚二倍体高含量的凋亡胸腺细胞亚群特异表达。与凋亡相关的Fas和膜磷脂易位表达的动态比较提示,PF18-3分子与前两类分子不同,可能为新型胸腺细胞凋亡相关分子。
- 王宏肖士云庞学文陈慰峰
- 关键词:胸腺细胞
- 小鼠胸腺基质细胞诱导早期T细胞株分化的研究被引量:3
- 1998年
- 利用 1株处于CD3-CD4-CD8-阶段的病毒转化早期T细胞株C32 0研究了体外胸腺基质细胞系对早期T细胞TCR CD3复合体表达的诱导作用 ,并对参与此作用的细胞表面信号分子进行了初步鉴定 .结果显示 :在体外胸腺基质细胞系通过与C32 0细胞 细胞间相互作用 ,诱导其表面TCR_CD3分子的表达 .进一步的研究表明 ,对TCR的诱导主要作用于其转录后阶段 ;对CD3的诱导涉及转录前后两个阶段 .单抗阻断实验显示 ,抗基质细胞单抗RS2 1_C6对C32 0的上述分化表达有明显阻断作用 ,说明其识别分子参与诱导分化过程 .免疫共沉淀和蛋白印迹杂交鉴定此分子为 42ku 。
- 余青王宏陈慰峰
- 关键词:诱导分化免疫