王宏
- 作品数：26 被引量：56H指数：5
- 供职机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省博士科研启动基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 促红细胞生成素对Aβ_(25-35)诱导神经细胞损伤的抗凋亡作用及其机制被引量：2
- 2010年
- 目的探讨促红细胞生成素对Aβ25-35诱导AD细胞模型毒性的保护作用及其作用机制。方法对数生长期的PC12细胞分为3组:空白对照组、模型组、EPO预处理组。细胞培养24h后,EPO预处理组加入终浓度为25U/ml的EPO预处理8h,再与模型组同时加入终浓度为10μmol/L Aβ的25-35,继续培养48h,收集细胞进行检测。采用MTT比色法分析细胞存活率,PI(碘化丙啶)流式细胞仪检测凋亡,HE染色观察细胞凋亡的形态学改变,免疫印记检测细胞色素C表达。结果MTT显示EPO处理组细胞存活率明显高于模型组(P<0.05),并且中剂量存活率最高;凋亡率较模型组明显下降(P<0.05);HE染色显示EPO组细胞数量多,结构完整。Western blot显示:模型组胞浆Cyt-C表达最强,而EPO处理组有较弱的Cyt-C表达(P<0.05)。结论EPO可以提高细胞存活率,降低凋亡率,对Aβ25-35诱导神经细胞毒性起防护作用;其机制可能是抑制了细胞色素C从胞浆释放,进一步阻止PC12细胞凋亡。
- 朱瑞霞张朝东王宏
- 关键词：促红细胞生成素AΒ25-35PC12细胞细胞色素C
- 周期性麻痹性副肌强直一家系临床及分子生物学特点被引量：3
- 2009年
- 目的报道1个伴永久性肌病的周期性麻痹性副肌强直汉族家系的临床特点，并对其热点基因进行突变分析。方法收集1个伴永久性肌病的周期性麻痹性副肌强直汉族家系的病史、临床特点，并于发作间期对部分患者进行常规肌电图检查、运动和冷水试验；对该家系中部分成员成人骨骼肌钠通道的仪亚单位（SCN4A）基因进行突变分析。结果该家系4代中有15例成员患病，同时表现出正常血钾性周期性麻痹和副肌强直的特点，临床表现严重，中年后进展为进展性肌病。肌电图可见强直放电，运动试验复合肌肉动作电位（CMAP）波幅下降〉40％，冷水试验CMAP下降大于运动实验。基因分析发现SCN4A基因存在Met1592Val突变。结论该家系为常染色体显性遗传，外显率完全，表现型与基因型的关系与国外报道大致一致，但表现型更为严重；肌电图运动试验和冷水试验是一种简单、可靠、易行的辅助诊断方法。周期性麻痹和副肌强直可由同一个突变所引起，对于伴有永久性肌病的周期性麻痹性副肌强直患者SCN4A Met1592Val可作为筛查对象。
- 冯昱王宏柳忠兰张朝东
- 关键词：钠通道系谱
- 脑内EPO/EPO-R与中枢神经系统疾病
- 2013年
- 促红细胞生成素（Erythropoietin,EPO）是主要由肾脏分泌生成的糖蛋白,首要功能是调节红细胞生成。大量实验研究表明,EPO在脑、脊髓等中枢神经系统中都有广泛的表达,并且参与调控神经系统的生长发育过程,在神经营养、神经保护等方面也发挥了重要作用。近年来,人们发现脑源性EPO与EPO受体（EPO-R）的表达变化与部分中枢神经系统疾病的发生发展有着紧密联系，而外源性EPO作为一种神经保护剂也被用于治疗或预防多种神经系统疾病。因此，本文对近年来脑内EPO／EPO—R在中枢神经系统疾病中的研究进展做一综述。
- 徐晓雪王宏张朝东
- 关键词：中枢神经系统疾病脑内促红细胞生成素EPO受体神经保护剂神经营养
- 骨髓基质干细胞对MPP^+制备的PC12细胞凋亡的影响被引量：1
- 2007年
- 目的探讨BMSCs分泌物对MPP+诱导的PC12细胞凋亡的保护作用。方法在体外培养、纯化BMSCs并收集其培养上清,流式细胞术分析PC12细胞的凋亡率;通过免疫细胞化学法和RT-PCR法检测PC12细胞bcl-2和TH在蛋白和mRNA水平的表达。结果BMSCs可在体外分离扩增,其表面抗原CD44阳性而CD45阴性,流式细胞术检测显示BMSCs上清液组加MPP+处理组(联合组)细胞凋亡率低于MPP+损害组;免疫细胞化学法和RT-PCR法显示联合组的bcl-2和TH蛋白和mRNA水平与MPP+损害组相比明显增加。结论BMSCs能分泌多种对退变多巴胺能神经元有保护作用的神经营养因子,因此BMSCs对MPP+诱导的PC12细胞凋亡有保护作用,其保护作用的强弱与BMSCs上清液浓度有关,其作用机制可能是通过上调bcl-2来实现的。
- 徐冰田国萍王宏赵刚文锋钟志红
- 关键词：骨髓基质干细胞细胞因子凋亡帕金森病PC12细胞
- 表达p53基因的人胰腺癌细胞系JF305的建立被引量：5
- 1994年
- 利用自建的人胰腺癌裸鼠移殖瘤，成功地建立了人胰腺癌细胞系ＪＦ３０５，历时一年余，２～３天传代一次，至今传代１０３次，平均倍增时间为４９．５小时，集落形成率为３０．６％，多次冻存、复苏，细胞生长稳定。重新接种于裸鼠皮下后形成移植瘤的生物学及形态学特征与该细胞系所来源的肿瘤相似，为中分化腺癌。染色体分析为人类染色体核型，数目在６６～１３０，免疫细胞化学染色发现ＪＦ３０５有ＣＥＡ和ｐ５３抑癌基因蛋白的过度表达。因此，ＪＦ３０５是人类胰腺癌研究的一个新的体内、体外模型系统，并为ｐ５３基因突变的研究提供了良好的实验材料。
- 李昕王宏姜奕王晓华贾兰玲张宝庚
- 关键词：胰腺肿瘤基因表达细胞株
- 骆驼蓬全草提取物的抗肿瘤作用被引量：8
- 2006年
- 目的研究骆驼蓬全草的不同体积分数的乙醇的提取物Ⅰ(alcohol extractⅠ,AEⅠ)、Ⅱ(alco-hol extractⅡ,AEⅡ)和水提取物(water extract,WE)对人宫颈癌细胞Hela和人肺癌A549细胞的抑制作用。方法用体外细胞培养和MTT法检测骆驼蓬全草的不同体积分数的乙醇的提取物Ⅰ、Ⅱ和水提取物对Hela和A549细胞增殖的抑制作用。结果与结论AEⅠ、AEⅡ和WE对Hela细胞的半数抑制质量浓度分别为187.31、195.32、118.50 mg.L-1。AEⅠ、AEⅡ和WE对A549细胞的半数抑制浓度分别为243.76、225.65、123.99 mg.L-1。AEⅠ、AEⅡ和WE对Hela细胞和A549细胞均有抑制作用,其抑制作用的强度与药物质量浓度成正比,同质量浓度下WS的抑制作用最强。
- 王晓华尹元琴马萍王宏何安光范峥嵘
- 关键词：人宫颈癌HELA细胞人肺癌A549细胞肿瘤抑制率
- 骨髓间质干细胞分泌胶质源性神经生长因子及对1-甲基4-苯基吡啶离子诱导PC12细胞凋亡的干预
- 2007年
- 目的:收集体外培养、纯化的骨髓间质干细胞条件培养液,检测其对多巴胺能神经元有保护作用的胶质源性神经生长因子分泌情况,并观察对1-甲基4-苯基吡啶离子诱导的PC12细胞凋亡的保护作用。方法:实验于2005-05/2006-10在中国医科大学附属一院神经内科实验室完成。①PC12细胞由协和医科大学细胞培养中心提供。1-甲基4-苯基吡啶离子(Sigma,USA,批号3707312)。②选取清洁级SD大鼠20只,麻醉后取股骨和胫骨,去净肌肉取骨髓,按1010L-1接种于含体积分数为0.2胎牛血清的低糖型DMEM培养基中,通过弃悬浮细胞及换液后可得到较纯的骨髓间质干细胞。培养第10天胰蛋白酶消化传代,当第2代细胞扩增至铺满瓶底80%时,改用含体积分数为0.05胎牛血清的低糖型DMEM条件培养液,48h后收集培养液,经超滤浓缩系统(截留分子量为10000)浓缩10倍后过滤除菌。③骨髓间充质干细胞接种于24孔板内,贴壁后多聚甲醛固定,磷酸盐缓冲液漂洗,免疫荧光法鉴定骨髓间充质干细胞表面抗原的表达。骨髓间充质干细胞消化后进行细胞计数,按1×108L-1接种于75cm培养瓶,加入含体积分数为0.2胎牛血清的DMEM培养液20mL,于培养第5,10天采用ELISA法测定细胞培养上清液中的胶质源性神经生长因子含量。④PC12细胞置于RPMI1640培养液中,内含体积分数为0.1的马血清和0.05的胎牛血清,汇集至80%时进行传代接种,液氮罐中贮存备用。实验前首先置换培养液,使血清浓度降至为仅含0.01马血清和0.01胎牛血清,24h后将培养的细胞分为4组:空白对照组,在细胞培养体系中不加入任何药物;骨髓间充质干细胞上清液组,接种后24h在细胞培养体系中分别加入骨髓间充质干细胞上清液30,60,120μL;1-甲基4-苯基吡啶离子组,接种后24h分别加入1-甲基4-苯基吡啶离子,使终浓度分别为100,200,400μmol/L;联合组,接种后24h加入200μmol/L1-甲基4-苯基吡啶离子,
- 徐冰张朝东田国萍王宏赵刚文锋钟志红
- 关键词：1-甲基-4-苯基吡啶PC12细胞细胞凋亡骨髓细胞间质干细胞
- 骆驼蓬碱抗肿瘤作用的体外研究被引量：8
- 1993年
- 本文对从骆驼蓬种子里提取出来的生物碱(2A-1、2B-2)进行了体外抑癌试验。其结果表明:骆驼蓬总碱(2A-1、2B 2)对瘤细胞L-1210和K-562均有明显的抑制作用,半数抑制浓度分别为45.71μg/ml、139.63μg/ml,36.40μg/ml和70.55μg/ml。其抗肿癌作用的强度和药物浓度呈正相关。其中2A-1对两种瘤细胞的作用效果比2B-2的抗肿瘤作用效果更为明显。
- 王晓华王宏何安光
- 关键词：骆驼蓬碱抗肿瘤作用抗癌药
- 自体TIL治疗癌性腹水的疗效观察
- 1995年
- 在肿瘤生物治疗中，TIL是肿瘤(AIT)中最为有效的抗肿瘤免疫活性细胞，而且越来越引起人们的重视。1986年Rosenberg等报道，TIL在体外经rIL-2培养扩增后．具有比LAK细胞更强的抗肿瘤效果。TIL可渗入到组织中，对肿瘤细胞具有高效、特异性的杀伤作用。近年来，我室对几种肿瘤过继免疫疗法进行了较为系统的研究，
- 王晓华何安光王宏
- 关键词：TIL癌性腹水自体疗效观察RIL-2
- 促红细胞生成素对Aβ_(25～35)诱导神经细胞损伤保护作用的体外实验被引量：1
- 2010年
- 目的探讨促红细胞生成素(EPO)对β淀粉样肽(Aβ)诱导神经细胞毒性的保护作用。方法取对数生长期的PC12细胞分为3组:空白对照组、模型组、EPO预处理组。细胞培养24h后,EPO预处理组加入终浓度为25U/ml的EPO预处理8h,再与模型组同时加入终浓度为10μmol/LAβ25～35,继续培养48h收集细胞检测指标。采用MTT比色法分析细胞存活率,碘化丙啶(PI)流式细胞仪检测凋亡,免疫组化检测细胞色素C(CytC)和Bcl-2表达。结果 MTT显示EPO处理组细胞存活率明显高于模型组(P<0.05),并且中剂量存活率最高;凋亡率较模型组明显下降(P<0.05);免疫组化显示:EPO处理组Bcl-2阳性表达细胞较Aβ25～35处理组明显增加(P<0.05),而EPO处理组CytC阳性染色细胞较模型组明显减少(P<0.05)。结论 EPO可以提高细胞存活率,降低凋亡率,对Aβ诱导神经细胞毒性起保护作用,其机制主要通过上调Bcl-2的表达,从而抑制CytC释放,阻止细胞凋亡,促进PC12细胞存活。
- 朱瑞霞张朝东王宏
- 关键词：促红细胞生成素AΒ25~35PC12细胞
