王娅娜
- 作品数：60 被引量：133H指数：7
- 供职机构：宁夏医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金宁夏回族自治区教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学自动化与计算机技术生物学更多>>
- 细粒棘球蚴重组HSP70蛋白免疫保护力研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨细粒棘球蚴重组HSP70蛋白(rEgHSP70)免疫小鼠对原头蚴攻击感染的保护性效果。方法选取雌性6周龄ICR小鼠随机分为两组:实验组和对照组(每组10只),实验组接种rEgHSP70 3次,每次间隔两周,对照组注射等量的PBS。两组小鼠在末次免疫后2周用1500只活细粒棘球蚴进行腹腔攻击感染,攻击感染30周后剖杀小鼠,无菌取脾组织,并记录每只小鼠腹腔内包囊数量和直径,评价免疫保护力。用流式细胞仪检测脾组织中CD4+T细胞和CD8+T细胞,计算两者比值。结果细粒棘球蚴重组HSP70蛋白接种对原头蚴攻击感染的免疫保护力为44.20%,rEgHSP70免疫组小鼠脾CD4+T亚群(0.52±0.082)高于对照组小鼠(0.44±0.07),P<0.05,rEgHSP70免疫组小鼠脾淋巴细胞CD4+/CD8+T亚群比值(3.35±0.02)高于对照组(2.00±0.77),P<0.05。结论细粒棘球蚴重组HSP70可诱导小鼠产生44.20%免疫保护力,具有一定的疫苗潜力。
- 巨艳马斯明朱明星王娅娜王娅娜李君良
- 关键词：细粒棘球蚴保护力
- 细粒棘球蚴中国大陆株铁蛋白基因分子克隆和序列分析被引量：9
- 2005年
- 目的获得细粒棘球蚴(E.granulosus)铁蛋白(ferritin)基因序列,进行序列分析。方法从包虫病患者体内获取细粒棘球蚴原头蚴提取总RNA,根据国外细粒棘球蚴铁蛋白基因的已知序列设计一对引物,采用RT-PCR技术扩增出细粒棘球蚴中国大陆株铁蛋白基因,待PCR产物纯化后,将其克隆到pGEM-T载体,进行序列测定和分析。结果用RT-PCR成功扩增出细粒棘球蚴中国大陆株铁蛋白基因,测序表明该基因为562bp。同源性比较结果表明:该基因序列与已发表基因核苷酸序列相比,390bp同源性约为97.7%,推导编码氨基酸序列同源性为97.7%,此基因序列在435bp出现终止密码。结论测序的铁蛋白基因序列有完整的编码框,为进一步研究其结构和功能,以及对包虫病的免疫预防具有重要意义。
- 王娅娜赵嘉庆丁淑琴王健赵巍
- 关键词：细粒棘球蚴铁蛋白基因克隆
- 树突状细胞介导rEg.mMDH产生的免疫应答研究被引量：1
- 2021年
- 目的观察重组细粒棘球绦虫抗原mMDH(rEg.mMDH)诱导树突状细胞(Dendritic cells,DC)产生的免疫应答。方法用rEg.mMDH体外致敏小鼠骨髓DC细胞,分为空白对照组、HF组、rEg.mMDH组、LPS组、HF+LPS组和rEg.mMDH+LPS组。电镜观察各组DC的形态;流式细胞仪检测各组DC的吞噬功能及表面分子CD80、CD86、主要组织相容性复合体II(MHCⅡ)及CD40表达情况;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组DC培养上清液中细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、白细胞介素-12p70(IL-12p70)及TNF-α的含量。结果优化条件筛选出rEg.mMDH作用DC的最佳浓度为1μg/ml,最佳时间为20 h。电镜观察rEg.mMDH和HF组DC具有突起的细胞数目少;DC表面分子CD80、MHCII表达水平与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);且具有良好的吞噬能力。当加入LPS作用后,rEg.mMDH组DC表面的突起增多,含突起的DC数目从30%增加至52%,吞噬能力降低,MHCII、CD80、CD40表达量不同程度增高;ELISA检测rEg.mMDH组TNF-α、IL-6、IL-10含量高于空白对照组及LPS组(均P<0.01),与LPS联合作用后IL-6、IL-10显著降低(P<0.05),IL-12p70含量显著升高(P<0.01);HF组与HF+LPS组各细胞因子含量变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论rEg.mMDH促进DC的成熟能力较弱,但刺激后的DC具有良好的吞噬功能,通过释放高含量的IL-10、IL-6,可能激活Th2型免疫应答;联合LPS,诱导DC成熟的能力增强,高表达IL-12p70并降低IL-10、IL-6的含量。
- 王双王娅娜
- 关键词：树突状细胞免疫应答
- 细粒棘球蚴原头节mRNA测序及生物信息学初步分析
- 2014年
- 目的 利用RNA-seq技术对细粒棘球蚴原头节的转录组进行测序并对测序数据进行生物信息学分析,以揭示细粒棘球蚴原头节mRNA所包含的信息. 方法 用Trizol法提取原头节总RNA,分离mRNA,利用Illumina公司的HiSeq2000高通量测序仪对mRNA序列进行测序.参考英国桑格研究院（Wellcome Trust Sanger Institute）公布的细粒棘球绦虫基因组数据,对测序数据进行拼接组装,将获得的unigene与非冗余的蛋白序列数据库（non-redundant,Nr）、全球蛋白资源数据库（universal protein,UniProt）、基因本体数据库（gene ontology,GO）以及日本京都基因和基因组百科全书通路数据库（the kyotoencyclopedia of genes and genomes pathway,KEGG pathway）进行比对,获得该unigene的蛋白功能注释信息. 结果 测序后共获得132 007 609条读段（reads）,经过组装共形成91 342条unigene,平均长度为419 bp.通过GO分类注释,共有36 552个unigene获得了注释信息,分别归入到了生物学过程、分子功能、细胞组分3大类共计48个功能组.通过KEGG pathway的注释,有6 664条unigene注释到了KEGG上,参与了6大类生物过程中34个小类的代谢,共有227个代谢通路. 结论 获得了细粒棘球蚴原头节转录组相关信息,为棘球蚴病的后续研究提供了研究数据,积累了研究资料.
- 朱明星王娅娜巨艳王志昇朱佳佳赵巍
- 关键词：转录组生物信息学分析
- 新医科背景下地方医科院校医学遗传学混合式教学改革的创新与实践被引量：3
- 2022年
- 为响应新医科建设,探寻适合地方医科院校医学遗传学课程发展和应用的教学模式,采取设境、探究、分析、解决、亲验DIAPP五步教学法,提高学生参与度及课堂教学的有效性,着力培养学生的自主学习能力和创新精神。通过建立“价值引领、知识拓展、思维训练、能力建构”四位一体的课程教学范式,为培养适应社会需求的复合型医学人才奠定基础。
- 党洁王娅娜马占兵李燕霍正浩
- 关键词：医学遗传学混合式教学
- 细粒棘球蚴重组抗原基因的克隆测序及重组蛋白的免疫学特性鉴定
- 赵巍赵嘉庆王娅娜李宗吉张焱王洁王淑静
- 该研究属于基础研究，受到了国家自然科学基金面上项目（30260105）及宁夏自然科学基金（NZ05403）的资助。包虫病，又称细粒棘球蚴病，是一种呈全世界流行的人畜共患病，在我国主要流行于西北畜牧业地，宁夏是我国包虫病发...
- 关键词：
- 关键词：免疫学特性细粒棘球蚴基因克隆
- Eg.ferritin抗血清介导的体外杀伤细粒棘绦虫原头节作用的观察被引量：1
- 2012年
- 目的体外观察细粒棘球绦虫重组铁蛋白(Eg.ferritin)抗血清对细粒棘球蚴原头节(PSC)的杀伤作用。方法用纯化的Eg.ferritin免疫新西兰家兔制备抗血清,以不同浓度的抗血清与细粒棘球绦虫原头蚴体外共培养,光镜观察培养不同时间点细粒棘球原头节的变化,透射电子显微镜观察原头节超微结构的改变。结果抗血清组的原头蚴的死亡率及破坏程度与抗血清的浓度呈正相关,与对照组相比,抗血清对原头节有杀伤作用(P<0.01)。在20%抗血清组中,原头节内部被大量空泡及髓样结构代替或无结构。结论细粒棘球蚴重组铁蛋白抗体对细粒棘球绦虫有明显的杀伤作用。
- 王娅娜张炎朱佳
- 关键词：抗血清
- 细粒棘球绦虫(中国大陆株)诊断抗原P-29基因的表达、纯化及免疫原性初步分析被引量：6
- 2009年
- 目的对细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)诊断抗原P-29(diagnostic antigen P-29)重组质粒进行原核表达、纯化,并初步分析重组蛋白的免疫原性。方法从重组质粒EgP-29/pGEM-T中获取诊断抗原P-29基因,亚克隆于表达载体pET-28a构建基因工程菌株,并表达、纯化重组蛋白,经Western-blot、ELISA分析重组蛋白的免疫原性。结果成功构建原核重组表达载体EgP-29/pET-28a/BL21(DE3)plysS,并纯化出浓度较高的重组蛋白。ELISA检测显示,用表达、纯化的重组蛋白免疫小鼠,诱导产生了特异性抗体IgG,Western-blotting鉴定该抗体能识别重组抗原及天然抗原原头蚴。结论重组蛋白具有良好的免疫原性。
- 师志云李昭宇卜阳王娅娜李宗吉马锐赵巍
- 关键词：细粒棘球绦虫蛋白表达纯化免疫原性
- 细粒棘球蚴中国大陆株亲肌肉基因分子克隆和序列分析被引量：8
- 2006年
- 目的获得细粒棘球蚴(E.granulosus)亲肌肉基因(myophilin)序列并进行序列分析。方法从包虫病患者体内获取细粒棘球蚴原头蚴提取总RNA,根据GeneBank公共数据库检索出细粒棘球蚴亲肌肉基因的已知序列设计一对引物,采用RT-PCR技术扩增出细粒棘球蚴中国大陆株亲肌肉基因,将其克隆到pGEM-T载体,进行序列测定和分析。结果成功扩增出细粒棘球蚴中国大陆株亲肌肉基因,测序表明该基因为573bp;该基因序列与检索基因核苷酸序列相比,同源性为100%,推导编码氨基酸序列同源性为100%。结论测序的亲肌肉基因序列有完整的编码框,可做为包虫病重组抗原的候选基因。
- 张静赵嘉庆王娅娜张焱王淑静王洁高岭赵巍
- 关键词：细粒棘球蚴克隆
- 宁夏人细粒棘球蚴延伸因子-1重组蛋白特性分析及抗原表位预测被引量：2
- 2008年
- 目的分析宁夏人Eg.EF-1重组蛋白的氨基酸序列,了解该蛋白的特性,预测其抗原表位,为进一步研究多肽疫苗提供理论依据。方法克隆Eg.EF-1基因片段并测序,重组入Eg.EF-1/pGEX-6P-1载体表达重组蛋白Eg.EF-1并鉴定其免疫学活性,利用生物信息学方法推测Eg.EF-1重组蛋白质的氨基酸序列、分析Eg.EF-1重组蛋白特性及二级结构、在线预测重组蛋白三维图象数据并将其结果用Anthe_5_0和spdbv37sp5软件模拟该蛋白三维结构,对Eg.EF-1重组蛋白氨基酸序列进行BLAST同源性比对分析,用DNAStar/Protean、BIOSUN软件和HLALigand/Motif网上B细胞抗原表位预测数据库对蛋白抗原表位进行预测。结果Eg.EF-1基因开放阅读框编码一个由230个氨基酸残基组成的多肽,同源性分析发现,重组蛋白氨基酸序列与数据库中收录的意大利细粒棘球蚴延伸因子EF-1的氨基酸序列有98%的同源性;蛋白特性分析显示Eg.EF-1重组蛋白是疏水性极强的酸性蛋白,含有较多的α螺旋结构;3种软件综合分析结果预测,Eg.EF-1基因重组蛋白抗原表位位置为20～26(SATEQKG)、50～56(SWNERME)、176～185(LWGTSKLVPL)、199～205(VENDKVG)、217～229(ELEDYVQSVDVAS)5个氨基酸肽段。结论Eg.EF-1重组蛋白可能是人细粒棘球蚴延伸因子-1相关蛋白,根据3种生物信息学工具预测的抗原表位是研究多肽疫苗时合成肽段的参考依据。
- 王健赵巍王娅娜丁淑琴
- 关键词：细粒棘球蚴重组蛋白表位预测
