王亚伟
- 作品数：15 被引量：52H指数：4
- 供职机构：山东大学齐鲁医院更多>>
- 发文基金：山东省科技攻关计划山东省科技发展计划项目山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Wnt/β-catenin信号传导途径在肺癌细胞A549中的作用被引量：4
- 2010年
- 目的研究Wnt/β-catenin信号传导途径在肺腺癌细胞系A549中的激活及其作用。方法用不同浓度的GSK-3β抑制剂Licl作用A549细胞,采用免疫组化法对β-catenin的细胞内表达定位,采用MTT细胞增殖实验观察细胞增殖活性,用克隆形成实验观察克隆形成能力,用Western blot检测β-catenin和干细胞分子标志OCT-4的表达。结果10mmol/LLicl作用24h,A549细胞中的β-catenin表达增加并出现核转移,同时增殖能力与克隆形成能力增强,干细胞标记蛋白OCT-4的表达增加。结论Wnt/β-catenin信号通路在维持A549细胞增殖和克隆形成能力及增强OCT-4的表达方面有着重要作用,可为肺癌治疗提供新的靶点。
- 滕颖王秀问王亚伟孟祥娇
- 关键词：信号传导肺肿瘤干细胞
- 肠道菌群失调和TLRs信号通路活化与癌症化疗诱发消化道黏膜炎的关系被引量：4
- 2020年
- 癌症已成为世界性的重大公共卫生问题。化疗是癌症最有效的治疗手段之一。化疗药物在抑制肿瘤细胞增殖的同时,常同时诱发一系列的毒副作用,消化道黏膜炎是其中之一。化疗导致的消化道黏膜炎不仅严重影响患者生活质量、延长住院时间、增加治疗成本,甚至可导致化疗失败。近年来,学者们发现肠道微生物与消化道黏膜炎的发生和发展密切相关,其中涉及TLRs信号通路的活化。本文对肠道微生物与消化道黏膜炎关系的相关研究进行了综述,旨在为深入探讨化疗诱发消化道黏膜炎的发病机理、防治方法和新药研发提供参考。
- 魏玲李玉欣张琪赵宇王亚伟温学森
- 关键词：化疗中医药
- siRNA干扰碱性成纤维细胞生长因子表达对肺腺癌A549增殖和克隆特性的影响被引量：1
- 2014年
- 目的利用小分子RNA干扰碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达,探讨其对肺腺癌细胞A549增殖和克隆能力的影响。方法针对bFGF基因序列构建短发夹状siRNA真核表达载体,转染A549细胞,荧光显微镜下观察转染效率,采用Real Time-PCR检测观察bFGF-siRNA转染前后A549细胞bFGF mRNA表达变化,Western印迹法测OCT-4蛋白表达的变化。CCK-8比色实验及克隆形成实验分别观察A549细胞增殖和克隆能力的变化。结果特异性bFGF-siRNA能有效降低A549细胞中bFGF的mRNA水平(P<0.01),转染后A549细胞OCT-4表达下降(P<0.05),增殖和克隆能力均明显降低(各P<0.01)。结论靶向bFGF基因的短发夹状siRNA可以抑制bFGF表达;bFGF信号通路在在维持肺癌A549增殖和克隆特性、OCT-4表达上起重要作用。
- 白小燕孟又胜王秀问王亚伟
- 关键词：BFGF肿瘤干细胞增殖
- 小细胞肺癌作为第二原发肿瘤的临床特征(英文)
- 2005年
- 目的探讨小细胞肺癌作为第二原发肿瘤的临床特征。方法回顾分析美国康州Hartford医院Helen&HarryGray癌症中心10年诊治的355例小细胞肺癌,其中经正规治疗者165例。作为第二原发肿瘤发生于其他恶性肿瘤之后的小细胞肺癌48例,经正规治疗者28例。结果48例小细胞肺癌诊断之前患有其他恶性肿瘤,占13.5%,其中包括头颈部癌4例(8.3%),皮肤癌11例(22.9%,其中2例为三原发肿瘤),非小细胞肺癌2例(4.2%),乳腺癌6例(12.5%),胃肠肿瘤5例(10.4%),妇科肿瘤3例(6.3%),男性泌尿生殖道肿瘤5例(10.4%),前列腺癌13例(27.1%),血液系统肿瘤2例(4.2%)。三原发肿瘤5例(10.4%)。有吸烟史者93%(40/43例)。发生在前列腺癌后的患者与发生在皮肤癌后的患者相比,年龄较大,正规治疗者较少,生存期较短(分别为3.5月和15月)。在28例正规治疗患者中,11例完全缓解(39.3%),12例部分缓解(42.9%),其生存期为5.1-77.7月(中位11.3月);20例未治疗患者的生存期为0.5-34.0月(中位2.0月)。165例经正规治疗过的第一原发SCLC的中位生存期(13.5月)、缓解率(77.6%)与28例第二原发SCLC(11.3月,82.1%)均无显著差异。(P>0.05)。结论小细胞肺癌作为第二原发肿瘤的发生率为13.5%,其中三原发肿瘤为10.4%。其治疗有效率和生存期与一般小细胞肺癌均无差异。发生在前列腺癌后的患者可能比发生在皮肤癌后的患者预后差。
- 王秀问刘联王亚伟
- 关键词：小细胞肺癌前列腺癌皮肤癌疾病预后
- 紫杉醇奥曲肽偶合物对A549裸鼠移植瘤的靶向治疗研究被引量：1
- 2008年
- 目的研究生长抑素类似物奥曲肽（OCT）与紫杉醇（PTX）的偶合物对人肺腺癌细胞株．4549裸鼠移植瘤的靶向治疗作用。方法构建1分子紫杉醇-1分子奥曲肽偶合物（PTX-OCT）和2分子紫杉醇-1分子奥曲肽偶合物（2PTX-OCT），建立裸鼠腋部皮下移植瘤模型，将荷瘤裸鼠随机分为8组。在1、7、21d尾静脉分别注射150nmol/kg PTX—OCT；2PTX-OCT；OCT、PTX混合物（OP）；OCT；PTX；300nmol/kg PTX（2PTX）和2PTX—OCT[2（2PTX-OCT）]。测各组小鼠体重及肿瘤体积；计算肿瘤倍增时间；眼内眦静脉取血测每组小鼠白细胞数量；组织切片HE染色及核仁区银染（AgNOR）观察肿瘤细胞生长情况；DNA梯度法检测细胞凋亡；RT-PCR法测肿瘤细胞生长抑素受体（SSTR）1至5亚型（SSTR1-SSTR5）mRNA表达情况；免疫组化SP法检测肿瘤微血管密度（MVD）以及生长抑素受体2和5亚型表达情况。结果2PTX-OCT与2（2PTX-OCT）处理组在3次给药后与对照组相比：肿瘤生长显著抑制（均P〈0．01）；肿瘤倍增时间延长（均P〈0．01）。PTX与2PTX-OCT处理组相比，在每次给药后5d裸鼠体重减轻差异有统计学意义（P〈0．05）；PTX与2PTX组的白细胞总数在26d降到最低，与对照组、2PTX-OCT组及2（2PTX-OCT）组相比差异均有统计学意义（均P〈0．05）。2PTX-OCT组及2（2PTX—OCT）组MVD均明显少于对照组（均P〈0．01）。DNA梯度法显示2PTX-OCT处理组有明显的DNA片段化的梯状条带。生长抑素受体1、2、4、5亚型的mRNA在荷瘤小鼠体内表达；免疫组化显示SSTR2主要表达于肿瘤细胞的细胞膜上，SSTR5表达于肿瘤细胞的细胞膜和胞质中。结论2PTX-OCT可显著抑制肿瘤增殖，减少肿瘤微血管形成，显示出良好的治疗作用，有望成为晚期非小细胞肺癌治疗的有效手段之一。
- 申洪昌王秀问刘延国王亚伟魏军民马道新王朴李蕾孙美丽
- 关键词：生长抑素奥曲肽紫杉醇
- 小细胞肺癌细胞系H446中肿瘤干细胞的分选与鉴定被引量：4
- 2009年
- 目的明确能否以表面黏附分子CD133为干细胞标志物,使用免疫磁珠分选(magnetic cell separation,MACS)法分离小细胞肺癌细胞系H446细胞中的肿瘤干细胞。方法以CD133为特异性分子标志物,使用MACS方法分选H446细胞,比较CD133阳性(CD133+)细胞与CD133阴性(CD133-)细胞在集落形成、自我更新、增殖分化、侵袭性、耐药性和成瘤性方面的不同。结果CD133+细胞和CD133-细胞在集落形成能力、自我更新能力、增殖能力、分化能力、侵袭能力和耐药性方面基本相同。集落形成和成瘤性实验结果显示:CD133+或CD133-细胞中40%以上的细胞都能够形成含有100个细胞以上的大集落,增殖成为与未分选细胞相同的细胞群,并能在裸鼠身上成瘤。结论表面黏附分子CD133不能作为分选小细胞肺癌H446细胞系中肿瘤干细胞的分子标志物,分选后的CD133+与CD133-细胞中含有相同的肿瘤干细胞。
- 孟祥姣李明王秀问王亚伟马道新
- 关键词：小细胞肺癌CD133肿瘤干细胞
- 肺腺癌细胞系A549肿瘤始发细胞的测定被引量：1
- 2009年
- 目的通过克隆形成及致瘤能力研究肺腺癌细胞系A549肿瘤始发细胞的比例。方法采用有限稀释法,检测细胞单克隆形成的数量及大小;收集来自于1个细胞形成的克隆细胞,种于BALB/C裸鼠皮下,观察其致瘤能力;采用CD133磁珠分选A549细胞,测定CD133+、CD133-细胞的克隆形成能力,测定Hoechst33342染色对非SP细胞的增殖能力和单克隆形成能力的影响。结果45%以上的A549细胞能够形成大于100个细胞的大克隆,其传代后又能形成新的克隆,来源于1个大克隆的细胞种植到BALB/C裸鼠身上,10d左右能形成肉眼可见的肿瘤;CD133+、CD133-细胞克隆形成能力相同;Hoechst33342染色能够明显干预细胞的克隆形成及增殖能力。结论45%以上的A549细胞是肿瘤始发细胞。
- 孟祥姣王亚伟王秀问
- 关键词：肺肿瘤克隆细胞
- 小干扰RNA干扰β连环素表达对肺腺癌A549细胞Wnt信号通路的作用被引量：7
- 2010年
- 目的研究小干扰RNA（siRNA）干扰β连环素（β-catenin）表达对肺腺癌A549细胞Wnt／β-catenin信号通路的影响。方法将ASd9细胞分为转染β-catenin干扰质粒PGCsil—CTNNB1-siRNA组（干扰质粒组）、转染阴性对照质粒PGCsil-NC—siRNA组（阴性对照组）和未转染质粒组（空白对照组），对各组细胞用实时PCR法检测β-catenin及Wnt／β-catenin信号通路靶基因细胞周期蛋白（cyclin）D1mRNA的表达，以噻唑蓝法检测细胞增殖能力，流式细胞术进行细胞周期分析，克隆形成试验检测克隆形成率，Millicell小室试验检测细胞迁徙能力。结果干扰质粒组细胞β-cateninmRNA和cyclinD1mRNA表达均明显低于阴性对照组（0．002±0．001比0．023±0．002，P〈0．01；0．005±0．002比0．040±0．020，P〈0．05）和空白对照组（B-cateninmRNA：0．021±0．003，P〈0．01；cyclinD1mRNA：0．042±0．004，P〈0．05）；第5～7天细胞增殖能力明显弱于阴性对照组和空白对照组（P〈0．05，P〈0．01），细胞倍增时间（58．1h）明显长于阴性对照组（37．9h，P〈0．05）和空白对照组（34．2h，P〈0.05）；G0—G1期细胞（86．4％±2．6％）明显多于阴性对照组（73．8％±0．9％，P〈0．01）和空白对照组（75．8％±1．5％，P〈0．01）；细胞克隆形成率（31．6％±7．7％）明显低于阴性对照组（46．9％±7．3％，P〈0．05）和空白对照组（44．2％±2．5％，P〈0．05），穿过Millicell小室底膜的细胞数（16．0±3．8）明显低于阴性对照组（32．7±3．1，P〈0．01）和空白对照组（33．0±2．7，P〈0．01）。结论用siRNA干扰β—catenin的表达可抑制肺腺癌细胞Wnt／β-catenin信号通路，降低细胞的增殖能力、克隆形成能力和迁徙能力。Wnt／β-catenin信号通路可能成为肺癌分子靶向治疗的新靶点。
- 滕颖王秀问王亚伟王健
- 关键词：腺癌Β连环素信号传导
- LncRNA HOTAIR通过靶向miR-204-5p调控BCL2促进肺癌进展被引量：2
- 2021年
- 目的与背景HOX转录反义RNA(HOX transcript antisense RNA,HOTAIR)是一种长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA),广泛参与多种恶性肿瘤的进展。HOTAIR可能参与了肺癌的进展,本研究旨在阐明HOTAIR对肺癌进展的作用及其潜在的分子机制。方法采用实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,RT-qPCR)检测HOTAIR和miR-204-5p在肺癌组织和肺癌细胞中的表达水平。采用MTT和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡情况。采用双荧光素酶报告基因检测系统和RT-qPCR分析HOTAIR和miR-204-5p之间,以及miR-204-5p和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcell lymphoma/leukemia2,BCL2)之间的作用。采用蛋白质免疫印迹检测BCL2的表达水平。结果在肺癌组织和细胞株中,HOTAIR表达水平升高,而miR-204-5p的表达水平降低,并且HOTAIR与miR-204-5p的表达呈负相关。HOTAIR可促进肺癌细胞增殖,抑制肺癌细胞凋亡。HOTAIR可作为miR-204-5p的海绵,发挥竞争性内源RNA(competing endogenousRNA,ceRNA)作用。miR-204-5p表达上调后,HOTAIR对肺癌细胞增殖和凋亡的作用发生逆转。此外,miR-204-5p可靶向BCL2,HOTAIR通过调控miR-204-5p影响BCL2表达。结论 HOTAIR可通过miR-204-5p调控BCL2表达,进而促进肺癌细胞的生长,抑制细胞凋亡,HOTAIR/miR-204-5p/BCL2轴可能是肺癌中新的调控机制和潜在治疗靶点。
- 刘秋文陈龙王亚伟
- 关键词：BCL2肺癌增殖凋亡
- 奥曲肽对紫杉醇抑制非小细胞肺癌细胞的增效作用被引量：6
- 2008年
- 目的:探讨生长抑素类似物奥曲肽(octreotide)对紫杉醇抑制非小细胞肺癌细胞的增效作用及其可能的机制。方法:RT-PCR检测非小细胞肺癌细胞株A549和H157生长抑素受体(somatostatin receptor,SSTR)1～5 mRNA的表达;检测不同时间和浓度梯度的奥曲肽对两株细胞的抑制率,光镜下观测奥曲肽作用后细胞形态学的变化;MTT法检测奥曲肽与紫杉醇对两细胞株增殖的抑制是否具有协同作用;采用流式细胞仪检测奥曲肽、紫杉醇以及两者联合作用时A549细胞的凋亡率;荧光实时定量PCR检测奥曲肽作用后细胞多药耐药相关基因的改变。结果:A549细胞检测到SSTR1～SSTR5 mRNA的表达,而H157细胞只有SSTR1和SSTR4 mRNA的表达。奥曲肽对A549细胞增殖具有抑制作用并具有时间(24、48、72 h)和浓度(1～1000 nmol/L)依赖性,在光镜下可观测到细胞细胞受损伤的形态学改变;而对H157细胞无抑制作用。对于A549细胞,125、250、500 nmol/L奥曲肽作用48 h可明显增加其对紫杉醇化疗的敏感性(P<0.01),并能诱导细胞凋亡,但未增加与紫杉醇联合作用后细胞的凋亡率;而对H157细胞,奥曲肽未发现化疗增敏作用。奥曲肽可下调A549细胞多药耐药相关基因MDR-1、MRP-1的表达(P<0.05,P<0.01),而对H157细胞多药耐药相关基因的表达无影响。结论:奥曲肽可提高SSTR受体阳性的非小细胞肺癌细胞对紫杉醇的敏感性,下调多药耐药相关基因的表达是其可能的机制之一。
- 刘延国王秀问魏军民王亚伟申洪昌马道新
- 关键词：肺癌非小细胞奥曲肽紫杉醇多药耐药
