梁敏
- 作品数：27 被引量：50H指数：4
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学政治法律更多>>
- 经典Wnt信号通路对细胞成骨分化的调控作用被引量：1
- 2014年
- Wnt信号通路是参与体内多种器官发育和组织新陈代谢的保守性通路,可分为经典和非经典Wnt信号通路.其中,经典Wnt信号通路通过调节下游的成骨相关转录因子调控细胞成骨分化、骨基质形成和矿化,且在细胞分化的不同阶段发挥不同的调控作用.此外,经典Wnt信号通路还调控牙周组织干细胞成骨分化,该作用受外界微环境的影响.加深对经典Wnt信号通路的认识有助于治疗相关的骨疾病.
- 邱绮虹梁敏
- 关键词：成骨分化牙周组织
- 低氧导致人成纤维细胞凋亡的调节机制
- 梁敏Hannah R CornellAndrew J CarrPhilippa A Hulley
- 缺氧诱导人成纤维细胞VEGF-A基因和蛋白的表达
- 目的：我们的前期研究结果表明,缺氧可诱导人成纤维细胞凋亡,并快速上调缺氧诱导因子HIF-1α的表达.本课题的目的是研究人成纤维细胞在缺氧条件下,HIF-1α的下游因子血管内皮生长因子VEGF的基因和蛋白表达.方法：缺氧环...
- 梁敏Richard BensonPilippa Hulley
- 关键词：缺氧人成纤维细胞
- 低氧对间充质干细胞生物学特性的影响被引量：1
- 2013年
- 机体内间充质干细胞（MSC）处于相对低氧环境（体积分数为1％～7％）与常氧环境（体积分数为20％）时表现出不同的生物学特性。低氧诱导因子1α（HIF-1α）作为低氧环境下的主要转录调控因子，广泛参与细胞的增殖、分化、凋亡、糖酵解及血管生成等方面的调控。近年来发现，HIF-1α在对MSC存活、分化及迁移的调控中起重要作用。MSC处于低氧环境时，通过对HIF-1α及其下游基因的调控，可提高MSC的存活率，促进其成软骨分化，抑制成脂分化，增强迁移能力，但对成骨分化能力的影响仍存在争议。不同组织来源、氧体积分数及诱导培养条件等均会对MSC的生物学特性造成影响。因此不同实验结果的比较应在统一的实验条件基础上进行。拟从低氧对MSC的增殖、凋亡、分化及迁移的影响作一综述。
- 朱文俊梁敏
- 关键词：间充质干细胞低氧细胞增殖细胞分化迁移
- 牙龈卟啉单胞菌W83牙龈蛋白酶的提取、鉴定及对人成骨细胞增殖、凋亡的影响被引量：3
- 2013年
- 目的研究提纯并鉴定牙龈卟啉单胞菌(P.g)W83牙龈蛋白酶的方法,探讨牙龈蛋白酶对人成骨细胞系hFOB增殖及凋亡的影响。方法丙酮沉淀P.gW83上清,经重悬、透析、超滤提取牙龈蛋白酶;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE)分离牙龈蛋白酶条带;基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱/源后衰变法(MALDI-TOF-MS/MS+MS)鉴定牙龈蛋白酶提取物;底物发色法测定牙龈蛋白酶活性;牙龈蛋白酶与人成骨细胞系hFOB1.19共培养,4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)或CCK-8检测细胞凋亡或增殖。结果 P.gW83牙龈蛋白酶提取物经SDS-PAGE分离出50kDa蛋白条带,MALDI-TOF-MS/MS+MS鉴定其为精氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Rgps)。底物发色法测定Rgps、赖氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Kgp)活性分别为75.62、10.51U/L,5mmol/L半胱氨酸蛋白酶抑制剂TLCK对Rgps、Kgp活性抑制分别为99.51%、99.00%(P<0.01)。牙龈蛋白酶(Rgps活性15.12U/L、Kgp活性2.10U/L)与hFOB共培养8h可诱导细胞发生凋亡,出现典型的细胞核染色质凝聚,且随时间增加hFOB凋亡率逐渐上升,16～24h达到高峰。CCK-8法检测显示,牙龈蛋白酶呈时间依赖性抑制hFOB增殖。结论丙酮沉淀P.gW83上清,经重悬、透析、超滤提纯的牙龈蛋白酶主要成分是Rgps;底物发色法测定Rgps/Kgp活性,方法稳定、可靠;牙龈蛋白酶抑制hFOB增殖且促进凋亡。
- 宋祥晨张福萍李希庭梁敏
- 关键词：牙龈卟啉单胞菌成骨细胞
- 促凋亡蛋白Bim、Bax和Bak在牙龈蛋白酶诱导成骨细胞凋亡中的表达被引量：10
- 2013年
- 目的建立牙龈蛋白酶诱导成骨细胞凋亡模型，检测成骨细胞凋亡过程中与Bc｜-2蛋白相互作用的细胞死亡调解子（Bcl-2 interacting mediator，Bim）、Bcl-2蛋白相关X蛋白（Bcl-2associated X protein，Bax）和Bcl-2蛋白拮抗剂（Bcl-2 antagonist／killer，Bak）的表达，探寻保护成骨细胞的方法，为牙周炎的发病机制研究提供依据。方法提取牙龈蛋白酶并测定其活性；将0．453、0．906、1．812U／L牙龈蛋白酶分别与成骨细胞共培养0、16、24和48h，4’，6-二脒基-2-苯基吲哚（4’，6-diamidino-2-phenylindole，DAPI）染色及膜联蛋白V-碘化丙啶双染色检测牙龈蛋白酶诱导成骨细胞（小鼠颅顶前骨细胞亚克隆14）凋亡，建立牙龈蛋白酶诱导成骨细胞凋亡模型；1．812U／L牙龈蛋白酶与成骨细胞共培养0、4、8、16、24和48h，蛋白质印迹法确定成骨细胞凋亡过程中Bim、Bax、Bak的蛋白表达；胰蛋白酶抑制剂抑制1．812U／L牙龈蛋白酶活性后与成骨细胞共培养24h，蛋白质印迹法检测Bim蛋白表达与成骨细胞凋亡率的改变。结果精氨酸-牙龈蛋白酶活性为（18．11±2．11）U／L，赖氨酸-牙龈蛋白酶活性为（1．02±0．25）U／L；DAPI染色显示1．812U／L牙龈蛋白酶可诱导成骨细胞凋亡，16h凋亡率为（6．31±0．37）％，24h达（11．20±0．35）％，48h为（10．80±0．46）％；膜联蛋白V-碘化丙啶染色结果与DAPI染色结果基本-致。成骨细胞凋亡过程伴随促凋亡蛋白Bim的表达升高，4h时Bim相对蛋白表达量为（0．31±0．03），约为对照组（0．17±0．03）的2倍，24h时Bim相对蛋白达峰值（0．57±0．05），为对照组的3～4倍；胰蛋白酶抑制剂可有效抑制牙龈蛋白酶活性，使Bim蛋白表达量由（0．58±0．04）降至（0．14±0．03）；同时DAPI染色显示胰蛋白酶抑制剂可逆转牙龈蛋白酶诱导的细胞凋亡，24h成骨细胞凋亡率由（11．20±0．35）�
- 陈玉婷宋祥晨张福萍梁敏
- 关键词：细胞凋亡胰蛋白酶抑制剂
- 牙龈蛋白酶在诱导成骨细胞凋亡过程中上调Bid的表达及机制
- ＜正＞目的:研究表明牙龈蛋白酶可诱导牙龈上皮细胞、牙龈成纤维细胞等牙周细胞凋亡。本课题组的前期研究发现牙龈蛋白酶呈时间和剂量依赖性诱导成骨细胞凋亡,并与Bcl2家族参与的内在凋亡通路相关。本研究旨在探讨在牙龈蛋白酶诱导成...
- 张福萍梁敏
- 人CD146+牙周膜干细胞的分选及其干细胞特性的鉴定被引量：3
- 2013年
- 目的:通过酶消化法及流式细胞分选技术分选CD146+牙周膜干细胞(Periodontal ligament cells,PDLCs),探讨其干细胞特性。方法:采用流式细胞技术从人牙周膜细胞中分选CD146+PDLCs,并对其进行免疫组化染色(角蛋白、波形丝蛋白及Stro-1),成骨、成脂诱导分化及克隆形成实验鉴定其干细胞特性。结果:CD146+PDLCs表达波形丝蛋白及Stro-1,具有成骨及成脂分化能力,体外培养能形成细胞克隆。结论:以CD146为分选指标的流式细胞分选技术可作为牙周膜干细胞筛选的方法。
- 朱文俊谭媛元梁敏
- 关键词：牙周膜细胞CD146成骨分化成脂分化
- 牙龈蛋白酶在诱导成骨细胞凋亡过程中上调Bid的表达及机制
- <正>目的探讨在牙龈蛋白酶诱导成骨细胞凋亡中Bcl2家族促凋亡蛋白Bid的表达及调节机制。方法 8.348U/L牙龈蛋白酶作用成骨细胞MC3T3-E1不同时间点(0、8、16、24、48h)后,AnnexinV/PI双染...
- 张福萍梁敏
- 文献传递
- 牙龈蛋白酶在诱导成骨细胞凋亡过程中对整合素α5、β1表达的影响被引量：3
- 2013年
- 目的探讨牙龈蛋白酶在诱导成骨细胞凋亡过程中对整合素α5、β1的调节机制，为牙周炎发病机制的研究提供理论依据。方法标准厌氧环境下培养牙龈卟啉单胞菌W83，分离提纯牙龈蛋白酶。用8．348U／L牙龈蛋白酶处理小鼠成骨细胞MC3T3-E148h，末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法4’，6-二脒基．2一苯基吲哚[transferase—mediateddeoxyuridinetriphosphate—biotinnickendlabeling-（4-Amidinophenyl）-6-indolecarbamidinedihydrochloride，TUNEL—DAPI]双染色法检测细胞凋亡；蛋白质印迹法检测整合素α5、β1蛋白的表达水平。结果精氨酸．蛋白酶活性为（41．74±2．11）U／L，赖氨酸一蛋白酶活性为（1．02±0．25）U／L。TUNEL—DAPI染色显示牙龈蛋白酶作用于MC3T3一E1细胞48h后诱导细胞发生凋亡。在短时间内（≤72h）牙龈蛋白酶呈时间依赖性下调整合素α5、β1的表达水平，48h时整合素α5、β1相对表达量分别为（0．485±0．039）、（0．504±0．002），72h时分别为（0．398±0．058）、（0．179±0．001），与对照组（蛋白相对表达量分别为1．000±0．000、1．000±0．000）相比差异均有统计学意义（P〈0．05）；72h后，整合素α5表达水平与对照组相比差异无统计学意义，但整合素B1仍持续下调（96、120h时相对表达量分别为0．604±0．003、0．357±0．002），均显著低于对照组（1．000±0．000）（P〈0．05）。牙龈蛋白酶特异性抑制剂甲苯磺酰．L．赖氨酰．氯甲基酮（tosyl．CL—clysine-chloromethyl—ketone，TLCK）可有效抑制蛋白酶活性，使整合素α5、β1蛋白表达量分别从（0．398士0．058）、（0．179±0．001）显著上升至（0．7814-0．012）、（0．857±0．060）（P〈0．05），但TLCK本身不改变整合素α5、β1的表达水平（P〉0．05）。同时牙龈蛋白酶还呈剂量依赖性下调整合索α5、β1的表达水平，20．8700U／L牙龈�
- 张剑英付云宋祥晨梁敏
- 关键词：细胞凋亡整合素Α5整合素Β1
