付云 作品数:53 被引量:190 H指数:8 供职机构: 中山大学附属口腔医院 更多>> 发文基金: 广东省科技计划工业攻关项目 广东省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 轻工技术与工程 文化科学 更多>>
不良修复体再处理 不良修复体是普遍存在于口腔临床工作中的影响美观及牙周组织健康的修复体。其再处理通常程序复杂,周期长,疗效差;作者通过多年的临床实践对不良修复体的产生原因进行了深入分析:包括修复前忽视牙周组织健康、牙周治疗及手术方法不当、... 付云文献传递 脐带间充质干细胞——组织工程的新视角 2009年 目的从脐带中分离培养脐带间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)并进行鉴定,阐明其多向分化的潜在作用。方法收集健康胎儿脐带,分离培养脐带中的间充质干细胞,以流式细胞仪对培养的间充质干细胞进行细胞表面标志检测,多种成分联合诱导其向脂肪、成骨方向分化,细胞化学染色检测诱导后的细胞变化。结果脐带中分离培养的间充质干细胞不表达造血细胞系的标志CD34、CD45、HLA-DR,强表达CD105、CD44、CD90,在适当的诱导条件下可向脂肪及成骨方向分化。结论脐带中存在具有多向分化潜能的间充质干细胞。 付云 刘佳 洪迅关键词:脐带 间充质干细胞 西吡氯铵含片对牙菌斑抑制效果的临床试验研究 被引量:25 2014年 目的:探讨西吡氯铵含片(CCBT)对控制牙面菌斑堆积和牙龈炎症的效果。方法:采用随机单盲对照试验,纳入60名患有慢性龈炎、轻、中度慢性牙周炎患者。对全部患者卫生宣教后随机分为3组,对照组不用药,试验组使用CCBT,阳性对照组使用复方氯己定(CHX)含漱液。治疗前、治疗后第2周记录Quigley-Hein菌斑指数(PI)及出血指数(BI);酶联免疫吸附试验法检测龈沟液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)表达水平的改变。结果:治疗前3组间比较PI、BI、龈沟液TNF-α和IL-1β含量均无显著差异(P>0.05)。治疗后CCBT组和CHX组PI和BI均明显下降(P<0.01),2组的下降值均无显著差异(P>0.05);龈沟液中TNF-α含量均下降(P<0.05)。对照组治疗后PI下降(P<0.05),其他指标无变化(P>0.05)。结论:西吡氯铵含片有抑制牙菌斑堆积作用,可改善牙龈炎症,降低龈沟液中TNF-α表达。 谭媛元 张剑英 张冠荣 付云关键词:菌斑指数 出血指数 肿瘤坏死因子Α 白细胞介素1Β 牙龈卟啉单胞菌PG2206基因突变株的构建 2013年 目的探讨牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)PG2206基因缺失突变株的构建方法,为进一步研究该基因的功能提供实验基础。方法将具有四环素抗性的重组基因载体转导入P.gingivalis W83的感受态细胞中替换PG2206,在四环素抗性的培养基上筛选阳性克隆株,命名为PG2206基因突变株。结果对阳性克隆株进行验证,成功构建出P.gingivalis W83的PG2206基因缺失的突变株。结论采用同源重组的方法可成功构建PG2206基因突变株。 高雳 马媛媛 付云 王羽关键词:牙龈卟啉单胞菌 ABC转运蛋白 基因敲除 三羟异黄酮上调p53信号通路诱导肝癌细胞凋亡的实验研究 被引量:2 2008年 目的探讨三羟异黄酮(genistein)诱导肝癌细胞凋亡过程中p53信号通路的调控机制。方法MTT法检测Genistein对肝癌HepG2细胞的杀伤作用,流式细胞仪检测Genistein诱导的细胞周期变化和凋亡率,应用荧光底物法检测Caspase-3活性,Western blotting分析细胞p53蛋白、p21和Bax蛋白表达。结果MTT法检测表明,随着药物剂量的增加和作用时间延长,Genistein对HepG2的杀伤效果亦增加;细胞周期研究表明,Genistein能够阻滞细胞周期于G2/M期,随着药物处理浓度的增加,HepG2细胞处于G2/M期细胞的比例由对照组的(22.9±1.6)%增加到80μmol/L处理组的(63.8±2.4)%,各处理组G2/M期比例和对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);凋亡研究和Caspase-3活性分析表明,Genistein能够显著诱导HepG2细胞凋亡,且具有作用时间依赖效应,随着药物作用时间延长,HepG2凋亡细胞比例由对照组的(1.6±0.5)%增加到72h处理组的(30.7±5.6)%,各处理时点凋亡细胞比例和对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Caspase-3活性检测结果表明,Caspase-3相对活性随药物处理浓度增加而出现显著上调,由对照组的(100±2.5)%增加到80μmol/L处理组的(225.1±21.2)%,各处理组Caspase-3相对活性和对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);Western Blotting检测表明,随着Genistein作用时间的延长,磷酸化p53水平上升,且p21和Bax水平上调。结论Genistein能通过抑制磷酸肌醇信号通路,上调磷酸化p53蛋白水平,激活其下游信号通路分子如p21和Bax的表达,从而阻滞细胞周期于G2/M期,并通过活化Caspase-3诱导肝癌细胞凋亡。 洪迅 刘培庆 梁杰贤 付云关键词:肝癌 三羟异黄酮 P53 细胞周期 细胞凋亡 牙龈蛋白酶在诱导成骨细胞凋亡过程中对整合素α5、β1表达的影响 被引量:3 2013年 目的探讨牙龈蛋白酶在诱导成骨细胞凋亡过程中对整合素α5、β1的调节机制,为牙周炎发病机制的研究提供理论依据。方法标准厌氧环境下培养牙龈卟啉单胞菌W83,分离提纯牙龈蛋白酶。用8.348U/L牙龈蛋白酶处理小鼠成骨细胞MC3T3-E148h,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法4’,6-二脒基.2一苯基吲哚[transferase—mediateddeoxyuridinetriphosphate—biotinnickendlabeling-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidinedihydrochloride,TUNEL—DAPI]双染色法检测细胞凋亡;蛋白质印迹法检测整合素α5、β1蛋白的表达水平。结果精氨酸.蛋白酶活性为(41.74±2.11)U/L,赖氨酸一蛋白酶活性为(1.02±0.25)U/L。TUNEL—DAPI染色显示牙龈蛋白酶作用于MC3T3一E1细胞48h后诱导细胞发生凋亡。在短时间内(≤72h)牙龈蛋白酶呈时间依赖性下调整合素α5、β1的表达水平,48h时整合素α5、β1相对表达量分别为(0.485±0.039)、(0.504±0.002),72h时分别为(0.398±0.058)、(0.179±0.001),与对照组(蛋白相对表达量分别为1.000±0.000、1.000±0.000)相比差异均有统计学意义(P〈0.05);72h后,整合素α5表达水平与对照组相比差异无统计学意义,但整合素B1仍持续下调(96、120h时相对表达量分别为0.604±0.003、0.357±0.002),均显著低于对照组(1.000±0.000)(P〈0.05)。牙龈蛋白酶特异性抑制剂甲苯磺酰.L.赖氨酰.氯甲基酮(tosyl.CL—clysine-chloromethyl—ketone,TLCK)可有效抑制蛋白酶活性,使整合素α5、β1蛋白表达量分别从(0.398士0.058)、(0.179±0.001)显著上升至(0.7814-0.012)、(0.857±0.060)(P〈0.05),但TLCK本身不改变整合素α5、β1的表达水平(P〉0.05)。同时牙龈蛋白酶还呈剂量依赖性下调整合索α5、β1的表达水平,20.8700U/L牙龈� 张剑英 付云 宋祥晨 梁敏关键词:细胞凋亡 整合素Α5 整合素Β1 下颌第二磨牙C形根管的临床研究 被引量:7 2003年 【目的】观察国人下颌第二磨牙 C 形根管形态及其变异,并研究其发生率。【方法】通过对142例根管治疗牙的根管形态及治疗前后 X 光片的观察。研究 C 形根管的发生率并考察其形态和发生部位;根据形态与部位的不同进行分类。【结果】下颌第二磨牙 C 形根管的发生率为33.10%,C 形根管形态可分为5类:Ⅰ类:完全融合,呈"C"型,占17.02%;Ⅱ类:近中颊舌根管融合。呈"(·"型,占6.38%;Ⅲ类:远中颊舌根管融合,呈"·)",占36.17%;Ⅳ类:近、远中颊舌根管分别融合,呈"()",占4.26%;Ⅴ类:近远中颊/舌侧融合。呈""或""型,占36.17%。【结论】国人下颌第二磨牙 C 形根管的发生率较高,其形态变异较大。 欧阳勇 凌均棨 陈慧芝 付云 高燕 张惠球关键词:磨牙 下颌 牙髓腔 人牙周韧带细胞膜片的体外实验研究 被引量:5 2013年 目的观察体外培养人牙周韧带细胞(hPDLCs)的成骨、成脂能力;构建hPDLCs膜片并鉴定膜片细胞外基质的主要结构蛋白。方法通过酶联组织块法分离并纯化培养hPDLCs;免疫细胞化学法鉴定hPDLCs来源及干细胞标志物STRO-1表达情况;取第2~4代细胞分别用成骨诱导培养基和成脂诱导培养基培养,茜素红及油红O染色检测hPDLCs的成骨、成脂能力;制备成熟的hPDLCs膜片,苏木素-伊红(HE)及免疫组织化学染色法鉴定膜片细胞外基质主要结构蛋白Ⅰ型胶原、层黏蛋白及纤连蛋白的表达情况。结果经原代培养的hPDLCs抗波形蛋白染色阳性,干细胞标志物STRO-1染色阳性,证实hPDLCs来源于间充质并具有干细胞潜在分化能力;hPDLCs在诱导成骨、成脂分化培养14~16d后,茜素红及油红O染色结果阳性提示hPDLCs具有良好的成骨及成脂分化能力;HE染色及免疫化学染色发现hPDLCs膜片高表达细胞外基质主要结构蛋白Ⅰ型胶原、层黏蛋白及纤连蛋白。结论本研究从细胞分离培养,来源鉴定、多向分化潜能诱导及细胞膜片技术等方面证实PDLCs中存在成体干细胞,提示hPDLCs膜片能为牙周组织再生种子细胞提供新来源,可进一步深入研究。 张剑英 付云 俞少杰关键词:人牙周韧带细胞 牙周组织再生 小鼠破骨细胞钠钙交换体亚型1的表达与功能 被引量:2 2010年 目的钠钙交换体(Sodium-Calcium Exchange,NCX)是钙离子排出细胞的重要途径。本研究探讨小鼠破骨细胞表达NCX1的不同剪切异构体及其钠钙交换功能。方法培养小鼠破骨细胞,纯化后提取总RNA样本,通过PCR克隆和DNA测序鉴定破骨细胞表达NCX1的具体剪切异构体种类。再将NCX1读码框架亚克隆至过表达质粒pIRESpuro,转染HEK293细胞后观察细胞内游离钙离子浓度的变化。结果在小鼠破骨细胞内克隆得到NCX1BD和NCX1ABD两个剪切异构体,其中NCX1ABD为新发现剪切异构体。将NCX1BD和NCX1ABD亚克隆至pIRESpuro后转染HEK293细胞,成功获得过表达细胞株。细胞加载钙离子荧光染色剂Furo-2/AM,抑制细胞膜纳钾泵并降低细胞外钠浓度后可以观察到NCX1反向模式导致的细胞内游离钙离子浓度的上升。但NCX1ABD导致的细胞内钙上升仅为NCX1BD的40%左右(t-检验,P<0.001)。结论小鼠破骨细胞表达两种NCX1剪切异构体,其中NCX1ABD为新发现剪切异构体,可能具有较弱的钠钙交换功能。 李京平 梁洁 付云17β雌二醇对人牙周韧带细胞表达碱性磷酸酶和骨保护素因子的影响 被引量:1 2008年 目的探讨17β雌二醇(17β-estradiol,17β-E2)对人牙周韧带细胞(human periodontal ligament cells,hPDLC)表达碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)的影响。方法采用组织块法培养hPDLC,培养基中加入不同浓度17β-E2,对硝基酚磷酸酯法检测ALP活性;ELISA法和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法确定OPG含量。结果各浓度组17β-E2作用于hPDLC14d和21d后均可促进ALP的表达(P〈0.05);生理浓度(1nmol/L)促进OPG蛋白分泌和mRNA表达(P〈0.05),72hOPG蛋白分泌量达(4714.89±71.48)ng/L;高浓度(100nmol/L)对OPG分泌无影响(P〉0.05),72hOPG蛋白分泌量为(1932.04±51.59)ng/L,但降低了OPGmRNA表达(P〈0.05)。结论17β-E2可能通过促进ALP和OPG的表达介导局部牙周组织的骨保护作用。 周燕 付云 李京平 齐刘英关键词:牙周膜 雌二醇 碱性磷酸酶