杨永倩
- 作品数：15 被引量：37H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点实验室开放基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(HuN4-F112株)诱导特异性IFN-γ^+T细胞反应的研究被引量：3
- 2012年
- 为研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)活疫苗(HuN4-F112株)诱导的特异性IFN-γ+T细胞反应与其保护作用的相关性,本研究将25头45日龄PRRSV阴性健康仔猪随机均分为5组,第1～3组分别于0 d、7 d、14 d免疫HuN4-F112疫苗(1头份/头,106.0TCID50),第4组为攻毒对照组,第1～4组于21 d用PRRSV强毒株HuN4-F5攻毒(3 mL/头,104.0TCID50),第5组为空白对照组。疫苗免疫后1周～2周产生部分保护,3周产生完全保护,第1～4组保护率分别为5/5、2/5、2/5和0/5。中和抗体检测显示免疫组免疫后7 d和14 d所有猪只均未检测到中和抗体,免疫后第21 d第1组4头猪检测到低效价(≤1∶8)的中和抗体。疫苗免疫后血清中IFN-γ含量略有升高,但变化不大,整体都处于较低的水平。采用酶联免疫斑点技术(ELISpot)检测PRRSV特异性IFN-γ+T细胞反应。免疫组免疫后7 d、14 d、21 d百万外周血单个核细胞中IFN-γ+T细胞频数分别为0±0、0±2、5±8,组间和组内统计分析显示差异不显著。结果表明在HuN4-F112株疫苗早期保护中,IFN-γ参与的特异性细胞免疫反应较弱,在早期免疫阶段难以发挥主要作用。本研究为了解PRRSV疫苗免疫保护机制提供参考,同时,也提示需要采用更多的指标和方法来评价该疫苗诱导的免疫反应。
- 吴玉全孟甄祥杨永倩陈家锃吴江冷超粮孙艳彭金美安同庆童光志田志军
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征酶联免疫斑点技术Γ干扰素
- ICAM-1在妊娠早期和流产大鼠子宫中的表达和意义被引量：1
- 2008年
- 采用免疫组织化学 SP 法检测了妊娠早期和流产大鼠子宫中 ICAM-1的分布与表达。发现 ICAM-1在各组大鼠子宫腔上皮、腺上皮、子宫基质或蜕膜、子宫肌层及部分血管内皮上均有表达。妊娠早期大鼠子宫基质、肌层和蜕膜细胞中 ICAM-1的表达比发情期增加,且植入期和植入后期增加极显著(P<0.01),植入期较植入前期在以上部位中增加极显著(P<0.01),达到最高峰;植入后期肌层中 ICAM-1的表达较植入期显著降低(P<0.01)。流产大鼠蜕膜中 ICAM-1的表达显著降低(P<0.01),但子宫含胎儿部分蜕膜上皮细胞中 ICAM-1的表达较强。结果表明 ICAM-1主要在植入期发挥作用,其在妊娠早期的异常表达可能与流产有关。
- 杨永倩范光丽张艳乔海莲安超翔
- 关键词：ICAM-1妊娠早期子宫流产
- 朱鹮FSHβ基因5′侧翼区及第2外显子的SSCP分析
- 朱鹮属于国家一级保护动物,世界濒危鸟类。1981年在陕西洋县发现的朱鹃字群数量只有7 只,目前人工饲养朱鹮种群就是由这7只发展而来的。FSH 基因作为一个影响动物繁殖发育等性状的侯选基因,其 SSCP 多态性及其与繁殖性...
- 张永德范光丽杨永倩许勃马海莎
- 关键词：朱鹮FSHΒ基因PCR-SSCP多态性
- 文献传递
- 兔抗猪CD163蛋白多克隆抗体制备及鉴定被引量：1
- 2012年
- 为制备兔抗猪CD163多克隆抗体,采用RT-PCR方法从猪PAM RNA中扩增CD163胞质外区部分基因SRCR4-5,克隆至pGEX-6p-1原核表达载体,在IPTG诱导下获得约50 000以包涵体形式表达的重组蛋白。WesternBlotting分析表明,表达产物能够被GST单抗所识别。用该重组蛋白免疫兔制备多抗血清,经间接ELISA检测,多抗血清效价可达105,流式检测发现可与Marc-145和PAM上的天然CD163分子相互作用。抗体阻断试验证明制备的多抗血清可以部分阻断PRRSV感染。本试验为进一步研究PRRSV与受体-CD163相互作用机制打下了基础。
- 郭娟娟彭金美彭金美安同庆冷超良吴江宫大庆陈家锃杨永倩田志军
- 关键词：抗体
- 白细胞介素-18在大鼠胚泡植入前后子宫的分布及表达被引量：4
- 2008年
- 目的系统研究了白细胞介素-18(IL-18)在大鼠胚泡植入前后子宫中的分布与表达,以探讨IL-18在胚泡植入过程中可能的生理作用。方法免疫组织化学SP法,图像分析法。结果IL-18在胚泡植入前后子宫均有表达,其主要分布于子宫内膜或蜕膜的腔上皮细胞、腺上皮细胞及子宫基质细胞或蜕膜细胞,子宫肌层及部分血管内皮细胞也有微弱表达。与非妊娠大鼠相比,妊娠大鼠子宫IL-18的表达明显增加(P<0.05)。随着妊娠的进行,子宫IL-18的表达逐渐递增,并且IL-18在胚泡植入后期的表达显著高于植入前期(P<0.05)。结论IL-18可能参与胚泡植入,与妊娠的建立和维持有关,在妊娠中起重要作用。
- 张艳李文献陈树林乔海莲杨永倩范光丽
- 关键词：白细胞介素-18子宫胚泡植入免疫组织化学
- 猪肺脏PTEN基因的克隆与表达纯化
- 2013年
- 为了研究猪磷酸酶和张力复合物(PTEN)在感染高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)后的表达量变化,验证PTEN在PRRSV感染肺脏过程中引起的肺损伤和呼吸窘迫综合征的作用,试验对猪的PTEN基因进行了克隆表达,并对其蛋白进行了纯化。结果表明:成功地克隆并表达了猪PTEN基因。
- 张君慧李登云杨永倩沈文正
- 关键词：肺脏PTEN基因克隆表达纯化
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白B表位诱导中和抗体能力的研究被引量：13
- 2011年
- 为证实GP5蛋白B表位是否具有诱导抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中和抗体的能力,本实验合成了PRRSV CH-1a株和高致病性PRRSV(HP-PRRSV)HuN4株B表位的短肽,分别免疫家兔制备两份特异性多肽抗血清。此外,将12头PRRSV及其抗体均为阴性的健康仔猪以HP-PRRSV HuN4疫苗毒株(HuN4-F112)进行基础免疫,然后用强毒株(HuN4-F5)进行多次接种,制备猪高免血清。间接免疫荧光检测(IFA)结果显示,两份多肽抗血清均能与PRRSV经典株和变异株发生特异性反应,IFA抗体效价无差异,表明两份血清没有显著差异。病毒中和试验结果表明,两份多肽抗血清均不具有中和PRRSV活性。间接ELISA和病毒中和试验结果表明,猪高免血清中针对B表位肽的ELISA抗体水平与血清抗PRRSV中和抗体之间没有正相关关系,而且B表位肽不能抑制中和抗体。以上结果表明HP-PRRSV B表位不能诱导产生中和抗体。
- 冷超粮安同庆陈家锃宫大庆李登云杨永倩彭金美张祎郭娟娟吴江童光志田志军
- 关键词：GP5中和抗体
- 神经元特异性烯醇化酶在大鼠动情周期子宫中的分布被引量：1
- 2008年
- 选择健康、未产、体重220-250g成年雌性SD大鼠，采用阴道涂片方法鉴定其动情周期，并采用免疫组织化学SP法研究了神经元特异性烯醇化酶（NSE）在大鼠动情周期子宫内分布的变化规律。结果显示，子宫各层均有不同程度NSE免疫阳性产物分布，并随动情周期的变化表现出一定的规律：各期子宫内膜黏膜上皮细胞、腺上皮细胞、基质细胞、血管内皮细胞及肥大细胞等NSE免疫阳性细胞数量变化不大，但着色深浅有一定差别，动情期着色最深，动情后期、动情间期、动情前期着色依次减弱；肌层和子宫外膜中，动情期着色最深，动情后期着色最浅，动情间期表达量明显回升，动情前期比动情期着色稍浅。表明，NSE在子宫中的分布可能受性类固醇激素的调节。
- 王根辈徐永平郑小敏杨永倩张艳乔海莲吴新奎范光丽
- 关键词：神经元特异性烯醇化酶免疫组织化学SP法动情周期子宫
- Leptin长型受体在大鼠听觉核团中的免疫组化定位
- 2007年
- 采用免疫组织化学SP法,对leptin长型受体(LR-b)在大鼠听觉核团中分布进行了定位研究。结果表明,在大鼠的耳蜗神经核、上橄榄核、外侧丘系核、下丘、内侧膝状体和听皮质中均有LR阳性神经元的分布。推测,leptin作用于听觉传导通路相关核团中的神经元,可能与维持大鼠正常的听觉功能有关。
- 许勃马海莎许芳王根辈杨永倩范光丽
- 关键词：听觉核团免疫组织化学
- 突触素在动情周期大鼠子宫中的分布被引量：1
- 2009年
- 【目的】研究突触素（SYP）在大鼠动情周期子宫内的分布情况及变化规律。【方法】选择健康、未产、体质量220-250 g成年雌性SD大鼠,采用阴道涂片法鉴定其动情周期,并采用免疫组化超敏SP（Streptavidin-Perox-idase,SP）法研究突触素在大鼠动情周期子宫内分布的变化规律。【结果】大鼠子宫各层组织中均有不同程度SYP免疫阳性产物的分布,并随动情周期的变化表现出一定规律：子宫内膜着色强弱各期差别不大,黏膜上皮细胞、腺上皮细胞及血管内皮细胞基本不着色或少许胞浆淡染,但其基底面均有较深SYP免疫阳性产物分布,动情前期着色最深,动情期、动情后期、动情间期依次减弱,后2期差别不明显;肌层和子宫外膜中,动情前期着色最深,动情期着色减弱,动情后期着色最浅,动情间期表达量明显回升,后3期与动情前期相比差异均极显著（P〈0.01）。【结论】突触素在动情周期子宫中的分布表达具有一定的规律,可能受性类固醇激素的调节。
- 王根辈徐永平赵慧英张艳逄国梁蔡青青马翔杨永倩范光丽
- 关键词：突触素免疫组化SP法动情周期子宫
