杨文钢
- 作品数：26 被引量：39H指数：3
- 供职机构：上海交通大学医学院附属仁济医院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目新疆维吾尔自治区自然科学基金吴阶平医学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 尿毒症合并DEBAKYⅢ型主动脉夹层动脉瘤的治疗体会及文献复习被引量：1
- 2016年
- 目的探讨尿毒症患者并发DEBAKYⅢ型主动脉夹层的原因及处理方法。方法结合仁济医院近3年收治的4例及近年国内外各类期刊发表12例，对共16例尿毒症合并DEBAKYⅢ型主动脉夹层进行分析总结。结果经内科药物强化治疗、控制血压及心率、行覆膜支架腔内修复术（TEVAR）、加强血液透析等治疗，好转14例（复发1例，经治疗好转），自动出院1例，死亡1例。结论尿毒症合并DEBAKYⅢ型主动脉夹层可能为多种因素共同作用的结果，经内科药物强化治疗，同时行TEVAR及加强血液透析，可得到有效控制。
- 杨文钢薛松刘冀东谢波
- 关键词：尿毒症血液透析
- miRNA-21提高骨髓间充质干细胞心肌样分化和旁分泌的作用被引量：1
- 2023年
- 目的 探讨miRNA-21提高BMSC向心肌样细胞分化和促进旁分泌的作用。方法 分离培养骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSC),行BMSC性质鉴定;通过构建缺血心肌动物模型;健康SD大鼠20只,随机分为miR-21-OE组、miR-21-KD组和对照组,每组各5只;将成功构建的miR-21-OE和miR-21-KD慢病毒载体侵染BMSC,使用western-blot检测cTnI、Ajuba、isl1的表达情况。分组将BMSC移植到急性缺血心肌SD大鼠动物模型中,western-blot鉴定各组中BMSC体内分化为心肌样细胞VEGF、bFGF等的表达情况。结果 成功分离培养BMSC,成功构建miR-21-OE和miR-21-KD慢病毒感染BMSC;WB检测到cTnI在miR-21-OE组高表达,当miR-21表达增高时,抑制Ajuba的表达,加强Isl1表达。生物细胞学技术检测miR-21-OE组心肌梗死区域缩小,VEGF及bFGF表达增高。结论 miRNA-21能够提高BMSC向心肌样细胞分化能力和促进BMSC的旁分泌作用,从而提高缺血心肌功能。
- 吕会斌田爱丽麦麦提艾力·麦麦提阿布都外里·热合曼帕哈尔·麦麦提沙吾提江杨文钢
- 关键词：MIRNA-21分化旁分泌骨髓间充质干细胞
- 非体外循环CABG中右冠状动脉突发缺血事件的判断和处理经验
- 薛松杨文钢黄日太连锋徐根兴
- 生长终止特异性同源盒基因稳定转染兔血管平滑肌细胞的研究
- 2012年
- 生长终止特异性同源盒基因（Gax）是一种转录因子，属同源盒基因超家族一员，在细胞生长、分化、迁移等方面具有重要作用。我们将Gax稳定转染到兔血管平滑肌细胞（VSMCs）中，观察其对VSMCs增殖和迁移的作用。
- 郑辉薛松杨文钢单江桂董亮周力璜
- 关键词：血管平滑肌细胞同源盒基因细胞生长转染VSMCS
- MSC体外诱导分化为心肌样细胞的鉴定及Nesprin蛋白表达研究被引量：2
- 2010年
- 目的体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)向心肌细胞分化并进行相关鉴定,观察分化过程中细胞Nesprin蛋白表达的变化。方法大鼠MSC经Ficoll密度梯度离心法分离获得后贴壁传代培养,流式细胞术鉴定第2代MSC表面抗原表达。以10μmol/L 5-氮杂胞苷(5-Aza)诱导第2代MSC向心肌细胞分化,观察细胞形态学改变;RT-PCR、免疫组织化学法和免疫荧光细胞化学染色鉴定心肌细胞相关蛋白Desmin、α-sarcomeric actin、cardiac TroponinⅠ(cTnⅠ)mRNA和蛋白表达;Westernblotting检测MSC分化前后Nesprin蛋白表达。结果经5-Aza诱导分化后的MSC细胞及细胞核增大,形态渐趋一致,大部分呈长梭形;细胞Desmin、α-sarcomeric actin、cTnⅠmRNA和蛋白呈阳性表达。免疫荧光细胞化学染色显示Nesprin蛋白定位于核膜,Western blotting分析发现诱导分化后细胞Nesprin蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论成功诱导大鼠MSC向心肌细胞分化;Nesprin蛋白在分化后细胞中的表达明显增加,提示Nesprin可能参与MSC向心肌细胞样变化的过程。
- 杨文钢薛松汪铮连锋徐根兴刘沙李金辉王园园黄日太朱洪生
- 关键词：NESPRIN骨髓间充质干细胞心肌细胞分化
- 骨髓间充质干细胞在梗死心肌移植再生后nesprin蛋白表达的实验研究被引量：1
- 2010年
- 目的:研究骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植到急性心肌梗死区心肌样细胞再生后ne-sprin蛋白的表达情况。方法:大鼠16只,随机分为实验组和对照组,每组8只。利用密度梯度分离法和贴壁培养MSCs,流式细胞仪检测MSCs表面相关抗原、DAPI标记MSCs备用;SD大鼠开胸手术结扎心脏冠脉左前降支建立心肌梗死模型,并在实验组梗死区注射MSCs,对照组注射DMEM;术后3周取梗死区心肌,利用免疫细胞学化学方法鉴定肌节肌动蛋白和肌钙蛋白的表达,免疫荧光技术和蛋白质印迹鉴定nesprin蛋白在MSCs移植后的表达。结果:MSCs移植到梗死缺血区3周后可以用DAPI示踪、并有心肌细胞特异蛋白呈阳性表达;免疫荧光和蛋白质印迹鉴定在MSCs移植前后有nesprin蛋白的表达,移植后出现nesprin蛋白表达量的增加。结论:MSCs在梗死心肌内移植具有分化再生的能力,nesprin蛋白在MSCs移植后出现表达量的增加,可能在MSCs分化为心肌细胞样过程中起到一定的作用。
- 杨文钢薛松汪铮连锋徐根兴刘沙黄日太朱洪生张谷兰
- 关键词：间充质干细胞细胞移植心肌细胞再生
- Nesprin蛋白对骨髓间充质干细胞的影响
- 2012年
- 目的构建nesprin蛋白siRNA慢病毒载体(LV-siNesprin),感染骨髓间充质干细胞(MSCs),观察nesprin蛋白对MSCs的影响。方法针对nesprin靶基因序列设计并合成4对miRNA oligo,并将4对oligo退火成双链DNA,测序鉴定。将4种miRNA干扰质粒(SR-1、SR-2、SR-3、SR-4)转入大鼠血管平滑肌细胞,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹法(Western blotting)检测干扰效应,筛选最佳干扰序列;将最佳干扰序列和pDONR221载体进行重组反应,获得含干扰序列的入门载体,再将入门载体和慢病毒表达的目的载体pLenti6/V5-DEST进行重组反应获得含干扰序列的LV-siNesprin+绿色荧光蛋白(GFP),包装慢病毒,测定病毒滴度。LV-siNesprin+GFP转染MSCs,Western blotting鉴定比较nesprin蛋白表达情况(分为LV-siNesprin+GFP组、GFP对照组和正常细胞组),用4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察细胞核形态改变和四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测MSCs感染LV-siNesprin后24 h、48 h、72 h和96 h的增殖情况(分为LV-siNesprin+GFP组、GFP对照组和正常细胞组)。结果测序证实合成的4对miRNA oligo正确,RT-PCR和Western blotting筛选出最佳干扰miRNA质粒SR-3,成功构建LV-siNesprin,包装慢病毒,病毒悬液的活性滴度为1×106ifu/ml。LV-siNesprin转染MSCs后,nesprin蛋白表达明显下降,出现细胞核融合、核碎裂等形态学改变;MTT法检测显示,LV-siNesprin+GFP组MSCs增殖速度较GFP对照组和正常细胞组减慢。结论 Nesprin蛋白对MSCs核膜稳定维持核膜空间结构起作用,并利于细胞增殖更新。
- 杨文钢薛松连锋汪永义胡振雷朱洪生
- 关键词：骨髓间充质干细胞细胞增殖慢病毒载体
- 心脏不停跳冠状动脉旁路移植术中右冠状动脉突发缺血事件的处理
- 2017年
- 目的总结冠心病行不停跳冠状动脉旁路移植术(OPCAB)中,右冠状动脉突发急性缺血事件的处理经验。方法 2010年5月至2015年5月我院共行OPCAB 1 568例,术中出现右冠状动脉急性缺血事件22例,其中男16例、女6例,年龄(66.5±9.7)岁。结果 11例患者于紧急右冠状动脉旁路移植术后、开放桥血管后ST段可以逐渐恢复正常,右心功能恢复,心律失常明显减少或消失。2例患者右冠状动脉旁路移植后仍有右心功能不全表现,但经积极药物处理以及主动脉内球囊反搏(IABP)应用后逐步脱离危险期。1例患者术后循环仍不稳定,最终于术后2 d死亡。总死亡率4.5%。发生围术期心肌梗死6例,全组患者IABP应用3例。结论 OPCAB术中右冠状动脉突发缺血事件更多表现为心律失常,发生率虽低,但在无杂交手术室的情况下能够及时判断并正确处理右冠状动脉突发急性缺血事件至关重要,对患者术后及预后都有较积极的影响。
- 杨文钢薛松黄日太连锋徐根兴
- 关键词：不停跳冠状动脉旁路移植术缺血事件右冠状动脉
- MicroRNA-21在心血管疾病中的研究被引量：3
- 2016年
- MicroRNAs （miRNAs）是一类高度保守的18～22个碱基长度的非编码小RNA;它们通过诱导转录抑制或转录降解对基因表达进行负调控[1].最初人们只认识到RNA聚合酶Ⅲ是驱动miRNAs转录的主要因素;然而部分前体长链miRNA （pri-miRNA）转录子长达数千个碱基对,包含4个或更多的尿嘧啶,这会导致聚合酶Ⅲ转录介导作用的终止[2].
- 杨文钢薛松
- 关键词：MICRORNA-21心血管疾病
- 丁酸钠和5-aza诱导间充质干细胞向心肌细胞分化的研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸钠(sodium butyrate)和DNA甲基化抑制剂5-aza对骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌细胞分化的影响。方法常规培养大鼠BMSCs,细胞分为4组:依次加入丁酸钠0mM,0.5mM,1.0mM,2.0mM。MTT和流式细胞仪检测不同浓度丁酸钠对细胞增殖和凋亡的影响。4周后利用western blot和免疫荧光检测4组细胞的心肌细胞特异性蛋白的表达。从上述4组中选出诱导能力最强的丁酸钠组与5-aza组成4个实验组:阴性对照组,5-aza组,丁酸钠组,5-aza+丁酸钠组。作用4周后检测心肌细胞特异性蛋白的表达。结果丁酸钠抑制细胞增殖,具有浓度依赖性,而对细胞凋亡没有明显影响。检测发现丁酸钠和5-aza均能有效诱导BMSCs分化为心肌细胞,丁酸钠诱导分化最适浓度为1.0mM。同时1.0mM丁酸钠诱导分化效率高于5-aza。除此,5-aza和丁酸钠共同作用于BMSCs,其诱导分化能力明显高于其它组。结论丁酸钠能够有效诱导BMSCs向心肌细胞分化,丁酸钠浓度为1.0mM时诱导能力最强,同时诱导分化率高于5-aza。5-aza和丁酸钠一起作用诱导BMSCs向心肌细胞分化的能力明显高于其它组,间接证明DNA去甲基化和组蛋白乙酰化具有协同作用。丁酸钠在有效作用浓度范围内,虽然抑制BMSCs增殖,但是不影响细胞凋亡,表明丁酸钠具有低毒的特性,为以后丁酸钠应用于临床打下实验基础。
- 董亮连锋杨文钢汪永义薛松
- 关键词：丁酸钠5-AZA心肌细胞
