李小青
- 作品数：18 被引量：66H指数：5
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人细小病毒B19-XA/_2株VP1蛋白Bac-to-Bac系统表达及免疫学特性分析
- 人细小病毒B19/(Human parvovirus B19,又称人微小病毒B19,简称B19病毒/)是迄今发现的能感染人类的最小的单链线状DNA病毒之一。自1990年我们在国内首次证实我国存在B19病毒感染以来,越来越...
- 李小青
- 关键词：人细小病毒B19VP1蛋白穿梭载体真核表达反应原性
- 文献传递
- 具有中和活性抗人类腺病毒单克隆抗体的制备、鉴定及应用被引量：2
- 2009年
- 目的:制备具有中和活性抗人类腺病毒(HAdv)单克隆抗体(mAb),并进行鉴定与应用。方法:以活的人类腺病毒3型(HAdv-3)滴鼻免疫BALB/c鼠,用细胞融合技术制备抗HAdv的mAb细胞株,采用中期分裂相秋水仙素阻抑法对mAb细胞株染色体进行分析;使用鼠mAb亚型鉴定试剂盒进行抗体亚型鉴定,通过ELISA、Western blot和间接免疫荧光技术进行特异性鉴定。建立HAdv-3感染动物模型,用获得的HAdv-3 mAb进行保护性研究。结果:细胞融合率为86%,抗HAdv抗体阳性孔率为51.4%。鉴定1株杂交瘤细胞(1A4),染色体数为98条,抗体亚类属IgG2a/κ,抗体腹水ELISA效价达10-5。ELISA、Western blot和间接免疫荧光证实该mAb特异性好。该mAb对HAdv-3感染动物有保护性作用。结论:成功地制备具有中和活性的抗HAdv mAb。该mAb识别的是HAdv六邻体蛋白,对HAdv-3感染动物有保护作用。
- 李思袖张国成许东亮聂晓晶李小青汪志华张学红
- 关键词：腺病毒单克隆抗体中和活性
- ELISA法检测人微小B19抗体及其临床应用评价
- 2008年
- 目的建立检测人微小病毒B19的间接酶联免疫吸附(ELISA)法,评价其临床应用价值。方法采用原保存的XA-B19 VP1独特区蛋白包被ELISA板,优化该方法检测B19抗体的最佳实验条件。与聚合酶链反应(PCR)、parvovirus B19 ELISA方法进行比较,评价其一致性。结果最佳包被量为25 ng/孔,标本血清最佳稀释倍数为1∶200。建立的间接ELISA检测体系与腺病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒、疱疹病毒抗体阳性血清无交叉反应。其检测B19 IgM敏感性为88.37%,特异性为96.15%,与PCR方法一致性好(kappa值>0.75,P>0.05);与parvovirus B19 IgM ELISA方法符合性好,符合率为96.8%。与parvovirus B19IgG ELISA方法比较kappa值>0.75,P>0.05,两种检测方法一致性好。结论建立的间接ELISA检测B19抗体的方法具有灵敏度高、特异性强、经济、快速、方便等优点,适合于流行病学调查和临床标本检测。
- 聂晓晶李小青张国成许东亮孙新李志宏张学红
- 关键词：人微小病毒B19酶联免疫吸附法
- 西安地区手足口病与肠道病毒71型的关系被引量：14
- 2009年
- 目的获得2008年西安地区肠道病毒71型（EV71）流行株，探寻快速高效的检测技术，分析所获两安地Ⅸ流行株与安徽阜阳流行株的区别。方法采集手足口病患儿的疱液、咽部分泌物进行病毒分离和RT—PCR检测；利用免疫荧光技术进行病毒鉴定。结果56份咽部分泌物接种RD细胞和HEp-2细胞，病毒分离阳性率分别为5．4％（3／56）、1．8％（1／56）；56份疱液标本接种RD细胞和HEp-2细胞，病毒分离阳性率分别为12．5％（7／56）、5．4％（3／56）；RD细胞和HEp-2细胞分别于7d和10d出现细胞病变。检测了56例患儿的咽部分泌物和疱液标本，咽部分泌物RT—PCR结果阳性率为21．4％（12／56），疱液标本RT—PCR结果阳性率为33．9％（19／56）。14份出现细胞病变的细胞株通过免疫荧光鉴定9份为EV71感染。获得了2008年西安地区EV71流行株，将核苷酸序列提交NCBIGenbank，获得核苷酸登录号EU812461。结论本流行株可能嗜上皮细胞性弱、与2008年提交的安徽阜阳病毒株EU703812、EU703813、EU703814同源性达97％～98％；RT—PCR技术有快速、高效的优势，足EV71快速诊断的重要手段。
- 聂晓晶张学红张国成许东亮马超峰李亚绒孙新李小青
- 关键词：肠道病毒71型手足口病肠道病毒感染逆转录聚合酶链反应
- ELISA法检测B19病毒抗体及其临床应用
- 目的:建立检测人微小病毒B19的间接酶联免疫吸附（ELISA）法,评价其临床应用价值。方法:采用我科保存的XA-B19 VP1独特区蛋白包被ELISA板,优化该方法检测B19抗体的最佳实验条件。与聚合酶链反应（PCR）、...
- 聂晓晶李小青张国成许东亮孙新李志宏张学红
- 文献传递
- 黄芪和大青叶治疗小鼠病毒性心肌炎的对比研究被引量：19
- 2003年
- 目的通过中药单剂黄芪、大青叶治疗小鼠病毒性心肌炎(VMC)的疗效观察,探讨VMC的有效治疗措施。方法Balb/C小鼠给予柯萨奇病毒B3(CVB3)稀释液腹腔注射后,随机分为感染对照组、黄芪治疗组和大青叶治疗组,于CVB3感染后第3,5,7,10,14,21天分批处死,作HF染色,比较各组小鼠心肌病变积分,并行心肌组织病毒分离。于感染后第7天各组小鼠电镜观察心肌细胞超微结构改变。结果 黄芪治疗组自CVB3感染后第5～21天、大青叶治疗组在CVB3感染后第5灭和7天时,其心肌病变积分较感染对照组明娃减轻(P<0.05)。而大青叶治疗组CVB3感染后第10～21天心肌病变积分与感染对照组比较差异无显著性(P>0.05)。电镜观察发现感染对照组小鼠心肌细胞线粒体肿胀、嵴断裂、肌浆网扩张、肌丝溶解,治疗组上述病变轻,且大青叶治疗组可见大量溶酶体。病毒分离结果娃示3组小鼠CVB3感染后第3天即可分离出病毒,阳性率均为66.7％,第5～10天3组均为100％,第14天感染组病毒分离阳性率为33 3％,治疗组均未分离到病毒,第21天时3组均未分离出病毒。不同时问点的3组间病毒分离阳性率差异无显著性(P>0.05)。结论 黄芪具有保护心肌的作用。大青叶在CVB3感染早期对VMC的病理改变具有显著影响.
- 李小青张国成许东亮卫文峰李如英
- 关键词：病毒性心肌炎大青叶中药
- 西安地区EV71感染手足口病的临床特征被引量：11
- 2010年
- 目的了解西安地区EV71感染手足口病患儿的临床特征。方法采集手足口病患儿的疱液和(或)咽拭分泌物进行RT-PCR检测;分析EV71感染手足口病患儿的临床特征。结果 96例手足口病患儿中28例为EV71感染;男女比为1.8∶1;0～5岁27例(96.4%);19例为城区患儿(67.9%),其中幼托机构和小学患儿19例(67.9%)。临床表现中发热16例(57.1%),发热多发生在出疹之前;出疹部位为手足24例(85.7%)、臀部11例(39.3%)、肛周5例(17.9%)、膝部16例(57.1%)、肘部5例(17.9%),臀部皮疹以1岁以下患儿为主(81.8%,9/11);所有患儿均痊愈,病程5～11 d,无后遗症。获得了2008年西安地区EV71流行株,将核苷酸序列提交NCBI Genbank,获得核苷酸登录号EU812461。结论本次流行发生于春末夏初;5岁以下儿童是主要感染人群;幼托机构和小学患儿占比例高,可能与EV71经接触传播有关;给予对症治疗后均痊愈。
- 聂晓晶张国成李思袖李亚绒许东亮孙新张学红李小青
- 关键词：肠道病毒71型手足口病儿童
- 人细小病毒B19 XA株VP1蛋白原核表达及初步鉴定被引量：1
- 2008年
- 目的:通过DNA重组技术,构建B19病毒XA株VP1全长基因表达载体,诱导重组VP1融合蛋白表达。方法:自B19病毒感染患者血清中提取病毒DNA为模板,用PCR法扩增编码VP1蛋白的全长基因片段,以pET28(a)为表达载体,构建重组表达质粒pET28(a)-VP1,转化E.coli.BL21(DE3),获得重组工程菌株。经IPTG诱导培养获得高效表达的VP1融合蛋白,SDS-PAGE、免疫印迹鉴定表达产物;并以该重组融合蛋白为抗原,免疫家兔,ELISA法检测所获抗体效价。结果:①获得了含重组表达质粒pET28(a)-VP1的正相阳性工程菌株,经IPTG诱导能高效表达VP1融合蛋白。②经ELISA法检测抗VP1多克隆抗体效价为1∶12 800。结论:重组工程菌可表达VP1融合蛋白,且该蛋白具有良好的免疫原性,对诊断试剂制备及疫苗研制具有重要意义。
- 李小青张国成许东亮李志宏
- 关键词：人细小病毒B19VP1蛋白免疫原性
- 肠道病毒71型感染患儿Toll受体3、4、7及NK细胞变化初步研究
- 目的：探讨肠道病毒71型(EV71)感染儿童Toll样受体的表达及细胞免疫与病情程度变化.方法：收集2012年6月至2012年10月在西安市西京医院及西安市儿童医院门急诊及重症监护病房(PICU)治疗并确诊为EV71感染...
- 刘雪李小青张国成安源邓军霞林海波刘瑞清
- 关键词：肠道病毒71型感染TOLL样受体
- 肠道病毒71型感染患儿Toll受体3、4、7及NK细胞变化初步研究
- 刘雪李小青张国成安源邓军霞林海波刘瑞清聂晓晶
