朱静潆
- 作品数：7 被引量：6H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 过表达Sprouty2分子促进HEK293T细胞增殖与存活被引量：1
- 2014年
- 目的构建表达人Sprouty 2(SPRY2)基因的重组表达载体pDC315/hSPRY2,转染人胚肾(HEK)293T细胞表达目的蛋白,初步探讨其对HEK293T细胞增殖与存活的影响。方法构建hSPRY2重组腺病毒表达载体,体外转染HEK293T细胞,以Western blot法检测目的蛋白的表达,以CCK-8法检测SPRY2对HEK293T细胞增殖或去血清条件下细胞存活的影响。结果成功构建重组表达载体pDC315/hSPRY2,在转染的HEK293T细胞中检测到目的蛋白hSPRY2的表达,转染pDC315/hSPRY2组HEK293T细胞的增殖率及存活率均明显高于对照组即转染pDC315/EGFP组(P<0.05)。结论成功构建了hSPRY2重组表达载体,过表达hSPRY2可促进HEK293T细胞的增殖与存活。
- 朱静潆杜芝燕王芳于继云田仁礼殷小涛张巍
- 关键词：过表达增殖存活
- 人肿瘤坏死因子受体-Fc融合蛋白的表达及生物活性分析
- 2014年
- 目的构建携带人肿瘤坏死因子受体(TNFR)胞外区融合人IgG Fc片段的重组腺相关病毒载体(pAAV/hTNFR-Fc),并对融合蛋白hTNFR-Fc的表达和生物学活性进行鉴定。方法构建hTNFR-Fc融合基因重组腺相关病毒(AAV)载体,体外转染人胚肾HEK293T细胞,收集转染上清,以Western blot法检测目的蛋白的表达,应用L929细胞测定重组表达产物对人和大鼠TNF-α细胞毒中和活性,采用ELISA比较重组表达产物对人和大鼠TNF-α的结合活性。结果成功构建重组表达载体pAAV/hTNFR-Fc,在转染细胞上清中检测到目的蛋白hTNFR-Fc的表达,重组表达产物可有效结合人TNF-α并中和其L929细胞毒活性,并对大鼠TNF-α具有一定程度的结合和中和活性。结论成功构建了hTNFR-Fc融合基因,验证了其在AAV载体上的分泌性表达,并对其生物活性进行了鉴定,为进一步病毒包装和大鼠关节炎动物实验研究奠定了基础。
- 杜芝燕王芳朱静潆于继云王宇朱晓明张巍
- 关键词：重组腺相关病毒载体活性
- SPRY2正向调节TNF-α诱导的成纤维细胞瘤L929细胞毒作用被引量：1
- 2014年
- 目的探索SPRY2分子在肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的L929细胞毒作用中的调节作用。方法应用RT-PCR方法观察SPRY2基因在不同质量浓度TNF-α刺激作用下表达水平的变化;应用重组腺病毒介导SPRY2基因过表达方法观察其对TNF-α细胞毒活性的调解效应。结果 L929细胞中存在SPRY2基因的天然表达,并且其表达水平随TNF-α刺激质量浓度的升高而升高,过表达SPRY2基因促进TNF-α诱导的L929细胞死亡。结论 SPRY2分子在TNF-α介导的肿瘤细胞杀伤效应中发挥正向调节作用。
- 朱静潆杜芝燕王芳殷小涛田仁礼王启宇武帅张巍
- 关键词：TNF-ΑL929细胞细胞毒性
- SPRY2对类风湿性关节炎的生物抑制作用
- 研究背景：类风湿性关节炎（Rheumatoid arthritis，RA）是一种发病机制比较复杂的慢性自身免疫病，其主要病理特征是成纤维样滑膜细胞（fibroblast-likesynoviocytes，FLS）过度增殖...
- 朱静潆
- 关键词：类风湿性关节炎重组腺病毒成纤维样滑膜细胞
- 文献传递
- 共表达2个独立的抗关节炎分子TNFR-Fc和CTLA4-FasL重组表达系统的建立与鉴定被引量：1
- 2014年
- 目的构建能同时独立表达双抗关节炎分子TNFR-Fc和CTLA4-FasL的重组腺相关病毒(AAV)载体,并对蛋白表达进行鉴定。方法应用furin-2A新型剪切策略,构建TNFR-Fc和CTLA4-FasL双融合基因重组AAV载体,体外转染293T细胞,收集转染上清,以ELISA和Western blot等方法检测目的蛋白的表达。结果成功构建双抗炎分子重组表达载体TFCF,在转染细胞上清中检测到目的蛋白TNFR-Fc和CTLA4-FasL的独立共表达。结论获得了可同时拮抗TNF和T细胞的新型双抗关节炎分子共表达系统,为今后动物体内研究奠定了基础。
- 王芳杜芝燕于继云朱静潆张巍
- 小鼠CD40分子胞外段基因的克隆、原核表达及活性鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的构建含小鼠CD40(mCD40)分子胞外段序列的原核表达载体,在大肠杆菌中表达,并对mCD40/GST融合蛋白进行纯化和抗原活性鉴定。方法从小鼠DC2.4细胞系中扩增目的基因mCD40并克隆至原核表达载体pGEX-6P-1,构建重组表达载体pGEX-6P-1-mCD40,并将该载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达mCD40/GST融合蛋白,并采用GST琼脂糖凝胶纯化重组蛋白。纯化后的重组蛋白经Western blot法、间接ELISA鉴定其抗原活性。结果 PCR扩增产物经测序分析与GenBank公布的小鼠CD40胞外段序列一致;重组表达载体经酶切鉴定正确;IPTG诱导后经SDS-PAGE分析证实得到了相对分子质量(M r)为45 000的重组蛋白;Western blot法和ELISA检测证实纯化的mCD40/GST蛋白能够与特异性抗体发生反应。结论成功构建了原核表达载体pGEX-6P-1-mCD40,利用原核表达系统实现了mCD40/GST融合蛋白的可溶性表达并证明其具有较高的抗原活性。
- 田仁礼朱静潆殷小涛王伟林晓亮徐元基阎瑾琦张巍高江平于继云
- 关键词：CD40原核表达活性检测
- SPRY2在制备预防和治疗类风湿性关节炎药物中的应用
- 本发明公开了SPRY2的新功能，实验证明过SPRY2对FLS细胞的异常增殖可以起到抑制作用，而且SPRY2能够有效抑制大鼠RA病情的发展。因此，可以过表达SPRY2的重组腺病毒载体或过表达SPRY2的重组腺病毒为活性成分...
- 于继云阎瑾琦张巍朱静潆王芳朱晓明徐元基杜芝燕王宇
- 文献传递
