朱虹
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程医药卫生更多>>
- 响应面法优化谷胱甘肽发酵培养基被引量：3
- 2014年
- 在摇瓶条件下,利用Minitab16软件中的响应面法对酿酒酵母发酵生产谷胱甘肽的培养基进行了优化。首先通过Plackett-Burman设计方法对影响发酵各因素的效应进行评价。结果表明:葡萄糖、酵母粉、半胱氨酸3个因素对谷胱甘肽产量影响显著,其中葡萄糖、酵母粉呈正效应,半胱氨酸呈负效应,其它因素的影响不显著。利用最陡爬坡实验,接近重要因素的最优水平,然后应用中心组合设计结合响应面分析确定了重要因素的最优水平。优化后的发酵培养基组成为:葡萄糖34.9 g/L、酵母粉12.7 g/L、半胱氨酸0.53 g/L、(NH4)2SO47.5 g/L、KH2PO49 g/L、MgSO41.5 g/L、生物素0.1 mg/L。在此条件下进行摇瓶发酵,谷胱甘肽理论产量达到170.58 mg/L。经3批平行试验验证,谷胱甘肽的平均产量为168.72 mg/L,与预测产量接近,比优化前产量(113.43 mg/L)提高了约48.7%。证明用响应面设计方法寻求菌体积累谷胱甘肽的最佳培养基组分是可行的。
- 朱虹许激扬卞筱泓吴东儿韩林
- 关键词：谷胱甘肽PLACKETT-BURMAN设计酿酒酵母
- 重组甘氨酸脱羧酶基因工程菌生产L-5-甲基四氢叶酸被引量：1
- 2013年
- 目的:针对叶酸代谢通路中的甘氨酸脱氢酶(GDC)构建高效表达GDC的重组菌E.coli BL21(pET22b-gcvP)并检测L-5-甲基四氢叶酸(L-5-MTHF)的增加量。方法:采用PCR法获得GDC基因gcvP,分别在其两端加上HindⅢ和XhoⅠ酶切位点,经HindⅢ和XhoⅠ双酶切后,连接到经同样双酶切的表达载体pET22b中,经限制性内切酶酶切和测序验证正确后,转化至E.coli BL21中。乳糖诱导重组蛋白表达,进行SDS-PAGE电泳,HPLC检测L-5-MTHF产量。结果:经双酶切与测序鉴定证实原核重组载体pET22b-gcvP构建成功,表达产物相对分子质量约为104×103,与GDC大小相符。与原始菌相比,重组菌的L-5-MTHF的产量增加了23.1%。结论:重组甘氨酸脱羧酶基因工程菌能够提高L-5-MTHF产量。
- 韩林许激扬卞筱泓邵飞吴东儿朱虹
- 关键词：原核表达双酶切
