邵飞
- 作品数:8 被引量:4H指数:1
- 供职机构:中国药科大学更多>>
- 发文基金:中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域:医药卫生轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 一种减弱反馈抑制菌株生产谷胱甘肽的方法
- 本发明提供了一种谷胱甘肽合成酶系重组质粒及其构建方法和应用、一种谷胱甘肽合成酶系的重组质粒及其构建方法和应用、一种累积谷胱甘肽方法。本发明提供的谷胱甘肽合成酶系重组质粒包括GSH1和GSH2序列和两段合适的载体片段;这种...
- 许激扬卞筱泓赵玉成邵飞刘荣
- 文献传递
- 重组亚甲基四氢叶酸还原酶代谢工程菌发酵工艺的优化被引量:1
- 2013年
- 目的优化重组亚甲基四氢叶酸还原酶代谢工程细菌株的发酵工艺,以提高此菌株中L-5-甲基四氢叶酸的累积量。方法通过单因素实验和正交实验研究此菌株的最优发酵工艺。结果此菌株的最优发酵工艺为:蔗糖为3%,酵母浸粉为1.0%,无机盐为NaCl-K2HPO4-MgSO4(1.26%∶0.42%∶0.02%),磷酸二氢铵为1.0%,接种量为5%,初始pH为7.5,诱导时机为2.5 h,诱导剂浓度为1.4 mmol·L-1,诱导温度为37℃,诱导时间为6 h,诱导剂添加次数为2次。优化后与优化前相比,此菌株的细菌生长量提高了36.4%,亚甲基四氢叶酸还原酶比活力提高了46.8%,L-5-甲基四氢叶酸的累积量提高了66.1%。结论本实验为此菌株的发酵罐中试放大提供了实验依据。
- 邵飞卞筱泓阙哲夫许激扬尤晓清赵玉成刘为营
- 关键词:亚甲基四氢叶酸还原酶代谢工程发酵工艺
- 一种提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法
- 本发明提供了一种提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法和一种L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒及其构建方法和应用。本发明提供的L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒包括二氢叶酸还原酶(DHFR)基因fo...
- 卞筱泓许激扬邵飞刘娅梅
- 辛醇/水两相体系中生物合成L-苯基乙酰基甲醇的研究
- 2012年
- 利用酿酒酵母作为生物催化剂合成L-苯基乙酰基甲醇(L-Phenylacetylcarbiol,L-PAC)的过程中,通过加入有机溶剂(辛醇)形成两相体系,可改善底物和产物的溶解度,以减少对细胞内丙酮酸脱羧酶(PDC)的强烈抑制和钝化作用,从而促进L-PAC产量的提高。实验结果表明,两相体系合成L-PAC的最佳条件为活化60 min,苯甲醛的起始浓度940 mmol/L,丙酮酸钠的起始浓度460 mmol/L,葡萄糖的含量8%,水醇两相体积比为3∶1,且加入一定量的甘油时,L-PAC产量可达在醇相中24.1 g/L和水相中3.7 g/L,比单一水相体系高出1.8倍。
- 向禧尤晓清赵玉成赵刚刚邵飞卞筱泓许激扬
- 关键词:生物转化苯甲醛丙酮酸脱羧酶全细胞
- 一种减弱反馈抑制菌株生产谷胱甘肽的方法
- 本发明提供了一种谷胱甘肽合成酶系重组质粒及其构建方法和应用、一种谷胱甘肽合成酶系的重组质粒及其构建方法和应用、一种累积谷胱甘肽方法。本发明提供的谷胱甘肽合成酶系重组质粒包括GSH1和GSH2序列和两段合适的载体片段;这种...
- 许激扬卞筱泓赵玉成邵飞
- 重组甘氨酸脱羧酶基因工程菌生产L-5-甲基四氢叶酸被引量:1
- 2013年
- 目的:针对叶酸代谢通路中的甘氨酸脱氢酶(GDC)构建高效表达GDC的重组菌E.coli BL21(pET22b-gcvP)并检测L-5-甲基四氢叶酸(L-5-MTHF)的增加量。方法:采用PCR法获得GDC基因gcvP,分别在其两端加上HindⅢ和XhoⅠ酶切位点,经HindⅢ和XhoⅠ双酶切后,连接到经同样双酶切的表达载体pET22b中,经限制性内切酶酶切和测序验证正确后,转化至E.coli BL21中。乳糖诱导重组蛋白表达,进行SDS-PAGE电泳,HPLC检测L-5-MTHF产量。结果:经双酶切与测序鉴定证实原核重组载体pET22b-gcvP构建成功,表达产物相对分子质量约为104×103,与GDC大小相符。与原始菌相比,重组菌的L-5-MTHF的产量增加了23.1%。结论:重组甘氨酸脱羧酶基因工程菌能够提高L-5-MTHF产量。
- 韩林许激扬卞筱泓邵飞吴东儿朱虹
- 关键词:原核表达双酶切
- 一种提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法
- 本发明提供了一种提高L-5-甲基四氢叶酸累积量的生物合成方法和一种L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒及其构建方法和应用。本发明提供的L-5-甲基四氢叶酸合成酶系共表达重组质粒包括二氢叶酸还原酶(DHFR)基因fo...
- 卞筱泓许激扬邵飞刘娅梅
- 文献传递
- 酵母菌乳杆菌共培养产谷胱甘肽条件的研究被引量:2
- 2012年
- 通过酿酒酵母和干酪乳杆菌共培养,在单因素实验的基础上,考察Plackett-Burman实验、正交实验,优化酵母菌和乳杆菌共培养的条件,以提高酵母菌产谷胱甘肽的产量。首先进行酵母菌和乳杆菌共培养的单因素实验,挑选出乳糖浓度、发酵培养基初始pH值、共培养温度、转速、乳杆菌接种量、接种时间、发酵时间,这7个对谷胱甘肽产量有影响的因素。利用分析软件Minitab16,对这7个因素进行Plackett-Burman实验,筛选出3个影响较为显著的因素。利用分析软件SPSS 19,再对这3个因素进行正交实验,得出最佳发酵条件。在最佳发酵条件下,谷胱甘肽产量比优化前提高了35.14%;相同条件下,比单菌培养提高了33.35%。得到最佳发酵条件为:乳糖浓度40 g/L,发酵培养基初始pH值为6.4,共培养温度为36℃,转速为200 r/min,乳杆菌接种量为8%,乳杆菌接种时间为8 h,发酵时间为24 h。酵母菌乳杆菌共培养产谷胱甘肽的方法具有可行性,并且利用Plackett-Burman设计和正交设计可有效优化发酵条件。
- 尤晓清许激扬卞筱泓赵玉成向禧赵刚刚邵飞
- 关键词:酵母菌乳杆菌共培养谷胱甘肽