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晏菊芳: 作品数：17 被引量：70H指数：5; 供职机构：中国科学院成都生物研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金四川省学术和技术带头人培养资金国家教育部博士点基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>

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一种三萜皂甙衍生物及其制备方法和用途: 本发明属于有机化学技术领域，具体涉及一种三萜皂甙衍生物及其制备方法和用途。本发明三萜皂甙衍生物具有如下结构式：<Image file="D2009100601229A00011.GIF" he="239" imgCont...; 晏菊芳王明奎李甫张蔚瑜陈欣; 文献传递

DNA疫苗的分子佐剂研究进展被引量：7: 2000年; DNA疫苗是一种能诱生机体产生高水平免疫应答的新型疫苗 ,近年来有关它的研究不断扩展和深入。由于它受到DNA疫苗以表达抗原蛋白的重组质粒DNA为免疫原的启发 ,为进一步优化DNA疫苗 ,人们开始研究一类新型的DNA疫苗分子佐剂 ,即可在体内表达各种免疫相关分子的重组质粒DNA和具免疫刺激效应的细菌源性CpGDNA。本文介绍了各种分子佐剂对DNA疫苗的调制效应及其在疫苗优化、免疫治疗和DNA疫苗作用机制探索中的意义 ,就影响分子佐剂对DNA疫苗调制的因素问题作了一些讨论。; 晏菊芳鲍朗; 关键词：DNA疫苗分子佐剂

一种三萜皂甙衍生物及其制备方法和用途: 本发明属于有机化学技术领域，具体涉及一种三萜皂甙衍生物及其制备方法和用途。本发明三萜皂甙衍生物具有如下结构式：<Image file="200910060122.9_AB_0.GIF" he="183" imgConte...; 晏菊芳王明奎李甫张蔚瑜陈欣

中国钩端螺旋体强毒株017膜蛋白基因的质粒载体构建及表达被引量：5: 1999年; 目的构建表达我国钩体强毒赖型０１７株外膜蛋白的重组质粒。方法用ＰＣＲ方法扩增并回收０１７株钩体外膜蛋白基因片段ＯｍｐＬ１，将其与质粒ｐＢＫ－ＣＭＶ重组，通过菌落颜色和酶谱分析筛选出重组质粒。然后从该重组质粒切下ＯｍｐＬ１基因片段，重新克隆至质粒ｐＢＶ２２０中，酶谱分析和ＤＮＡ杂交鉴定出正向重组质粒。将含有正向重组质粒的宿主菌诱导表达生长后，提取全菌总蛋白进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析。结果筛选出４个与ｐＢＶ２２０正向重组的质粒，其中一株带重组质粒ｐＢＬＭ１的菌株表达了一相对分子质量为３３．５×１０３的新蛋白。结论重组质粒ｐＢＬＭ１的构建和表达成功说明扩增得的ＯｍｐＬ１基因具有完整的阅读框架，并使简便获得大量天然的０１７株钩体ＯｍｐＬ１蛋白成为可能。; 晏菊芳鲍朗伍卫华万波李胜富; 关键词：钩端螺旋体属重组质粒

人外周血单个核细胞CD14基因的扩增及序列测定: 2000年; 目的　介绍一种获取人 CD14基因的简易方法。方法　利用 CD14基因组成的特点 ,采用聚合酶链反应技术以人外周血单个核细胞基因组 DNA为模板扩增获取人 CD14基因。结果　从人外周血单个核细胞基因组 DNA中成功扩增出大小约 1.1kb的人 CD14基因 ,并且经基因序列测定表明 ,克隆的人CD14基因序列与文献报道完全相同。结论　以人外周血单个核细胞基因组 DNA为模板 ,扩增人 CD14基因的方法是一种获取 CD14基因简捷、有效的方法。; 张万江鲍朗邱洪宇晏菊芳胡昌华张会东; 关键词：单个核细胞 CD14基因

钩端螺旋体外膜抗原基因ompL1在卡介苗中的克隆和初步表达: 1998年; 目的将钩端螺旋体外膜基因ｏｍｐＬ１克隆到大肠杆菌－卡介苗（Ｅ．ｃｏｌｉ－ＢＣＧ）穿梭质粒载体ｐＹ６００２中，将重组质粒导入ＢＣＧ并对重组ＢＣＧ的表达进行初步表达研究。方法采用ＰＣＲ技术直接从致病性钩端螺旋体（钩体）赖型０１７株基因组中扩增钩体外膜蛋白基因ｏｍｐＬ１，并克隆到Ｅ．ｃｏｌｉ－ＢＣＧ穿梭质粒载体ｐＹ６００２中，重组质粒经电转化导入ＢＣＧ。斑点杂交筛选重组ＢＣＧ，再通过免疫印迹对其表达进行初步研究。结果在所得６个重组ＢＣＧ中，有３个表达了ｏｍｐＬ１基因产物，其中一个表达较强。结论本研究为发展新一代高效广谱的钩体基因工程疫苗打下了基础。; 万波鲍朗徐恒徐恒晏菊芳; 关键词：钩端螺旋体卡介苗聚合酶链反应

月季花中黄酮成分的ESI-MSn分析: 薛莹张沛青琳森晏菊芳廖循丁立生; 文献传递

钩端螺旋体赖型017株外膜脂蛋白LipL41基因的克隆及原核表达被引量：2: 2001年; 目的　构建钩端螺旋体外膜脂蛋白 L ip L41基因的重组原核表达质粒 ,为进一步制备以 L ip L41为目的基因的亚单位疫苗提供实验依据。方法　根据钩端螺旋体 L.kirscneri RM5 2株外膜脂蛋白 L ip L41基因序列设计引物 ,以赖型钩端螺旋体 0 17株基因组 DNA为模板 ,进行 PCR扩增并 DNA测序 ,以质粒 p GEX1λT为载体 ,插入 L ip L41基因片段构建重组原核表达质粒 ,并检测 L ip L41的表达。结果　测序结果示所得片段为 L ip L41的编码序列 ,酶切及 PCR分析证实重组质粒构建成功 ,SDS- PAGE和 Western blotting分析重组质粒可高效表达蛋白质 L ip L41。结论　 L ip L41基因的重组原核表达质粒构建成功。; 李学敏鲍朗胡昌华谢勇恩晏菊芳张会东; 关键词：基因克隆基因表达膜脂蛋白

赖型钩端螺旋体外膜蛋白基因结构比较性研究被引量：5: 2000年; 用 PCR方法扩增不同毒力赖型钩体 Omp L1基因片段 ,进行序列测定 ,用相关软件比较分析核苷酸序列、蛋白质二级结构以及限制性内切酶谱 .不同毒力赖型钩体均能扩增出960 bp的片段 ,非致病 Patoc株未能扩出相应片段 ,中国赖型参考株 Omp L1序列 ( Gene BankNo.AF2 50 31 8)与流感伤寒型相应序列比较有 98个核苷酸差异 ,同源性为 89.8% ,二级结构预测和氨基酸疏水图显示变异主要发生在跨膜蛋白的膜外区 ,其膜上成分并未明显变化 ;赖型强弱毒力株之间 Omp L1序列仅 8个核苷酸差异 ,6个氨基酸变异 ,且集中在 C末端 2 92 -30 5位氨基酸之间 ;限制性内切酶谱分析显示赖型 Omp L1基因位点发生特异变化 .结果提示 ,外膜蛋白 Omp L1基因是钩体保守性较强的致病标记 ;赖型钩体减毒致弱可能与 Omp; 胡昌华鲍朗晏菊芳李学敏张万江张会东; 关键词：赖型钩端螺旋体外膜蛋白蛋白质二级结构

利用抑制消减杂交技术研究钩端螺旋体致病相关基因被引量：16: 2001年; 目的　利用抑制消减杂交技术 (SSH) ,比较致病与非致病钩端螺旋体 (简称钩体 )之间基因组差异 ,筛选致病钩体特有的基因片段。方法　以赖型 0 1 7株为tester,非致病性patocⅠ株为driv er,选择合适的四碱基内切酶将基因组酶切 ,连接特殊设计的adaptor进行消减杂交和PCR ,得到消减混合物 ,与T/A克隆载体连接 ,转化JM1 0 9建立差异消减文库 ,经PCR和Southernblot筛选鉴定阳性克隆 ,进而对部分片段进行测序和同源分析。结果　AluⅠ适于将钩体酶切成用于SSH技术的小片段 ;经SSH筛选鉴定得到 3 0个片段大小为 2 0 0～ 1 3 0 0bp的阳性克隆 ,部分已测序的片段中 1个与硫胺素合成蛋白高度同源 ,4个与GenBank无明显同源性 ,可能为赖型致病钩体所特有而非致病钩体缺失的基因片段 ,已被GenBank收录 ,收录号分别为AF3 0 0 873～ 3 0 0 877。结论　SSH是一种有效、灵敏、高特异的比较分析基因组差异的方法 ,对钩端螺旋体致病基因的筛选、基因组分化、分子遗传研究等具有重要意义。; 鲍朗胡昌华李学敏晏菊芳张万江张会东; 关键词：钩端螺旋体抑制消减杂交

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