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医学免疫学精品课程建设的思考被引量：2: 2016年; 精品课程是学生知识、能力、素质培养的重要载体。免疫学精品课程建设旨在通过教学方法的改革和现代化教育技术手段的运用,鼓励使用优秀教材,提高实践教学质量,最大限度地调动学生学习的主动性和积极性,培养学生的科学探索精神和创新能力,拓宽学生的知识面,为学生的个性化学习提供高质量的支持服务。本文主要就创新型教学团队和高质量教学资源建设、精品课程建设的关键措施等进行了探讨。; 高美华任书荣马宇张蓓李华侨; 关键词：免疫学课程教学方法

Th17/Treg值在慢性乙型肝炎肝纤维化进展中的意义被引量：2: 2020年; 目的测定慢性乙型肝炎(CHB)患者肝纤维化进展过程中外周血中Th17细胞和Treg细胞的频率及相关细胞因子的变化,以及肝组织中Th17细胞和Treg细胞数目的变化,探讨Th17/Treg平衡在纤维化进展中的作用。方法方便选取2017年6-12月青岛大学附属医院慢性乙型肝炎住院患者51例,其中F1期CHB患者(F1)5例,F2期CHB患者(F2)10例,F3期CHB患者(F3)15例,F4期CHB患者(F4)21例,同时选取10位健康体检者作为对照(HC),流式细胞术检测外周血中Th17和Treg的频数,双抗体夹心ELISA检测血清中IL-17和IL-10的表达水平,免疫组化检测CHB患者肝组织中Th17和Treg数量。结果在外周血中,Th17/Treg细胞频率比值在F2组(0.76±0.37)和F4组(2.23±0.67)中与HC组(1.33±0.67)相比,差异有统计学意义[P(HCvsF2)=0.022,P(HCvsF4)<0.001],IL-17/IL-10比值在F2组(0.11±0.19)、F3组(0.12±0.32)和F4组(0.12±0.32)中与HC组(0.72±0.22)相比,差异有统计学意义[P(HCvsF2)=0.008,P(HCvsF3)=0.001,P(HCvsF4)<0.001],肝组织中,Th17/Treg比值在F3组(1.07±0.86)和F4组(0.79±0.28)中与F1组(2.08±1.06)相比,差异有统计学意义[P(F1vsF3)=0.008, P(F1vsF4)=0.001],F2组(1.51±0.77)和F4组(0.79±0.28)相比,Th17/Treg值变化差异有统计学意义[P(F2vsF4)=0.011]。结论 Th17/Treg的失衡是造成慢性乙型肝炎肝纤维化进程演变的重要因素,检测Th17/Treg变化对预测肝纤维化发展有一定价值。; 付海洋时维平付广明张蓓史海磊李雪健; 关键词：慢性乙型肝炎 TH17细胞调节性T细胞 IL-17 IL-10 肝纤维化

鲫鱼汤对阿霉素肾病大鼠Th17细胞相关炎性因子表达的影响被引量：4: 2013年; 目的研究鲫鱼汤对阿霉素肾病大鼠IL-17、IL-23、IL-1β和CXCR2等表达的影响,探讨其治疗作用和机制。方法成年Wistar雄性大鼠40只,随机分为鲫鱼汤组、厄贝沙坦组、肾病组、空白对照组,除空白对照组,其他三组给予尾静脉注射6.2 mg/kg体重阿霉素建立肾病模型,空白组注射等容量生理盐水。模型成功后,给予鲫鱼汤灌胃干预9周,每周检测12 h尿蛋白定量,检测终末血生化指标变化,光镜下观察大鼠肾脏病理改变,免疫组化检测IL-17、IL-23、IL-1β和CXCR2在肾脏的表达,ELISA法检测IL-17、IL-23和IL-1β在血液中的含量。结果鲫鱼汤组大鼠血白蛋白水平高于肾病组(P=0.03)低于空白组(P=0.01);鲫鱼汤组大鼠肾组织IL-17、IL-23、CX-CR2较肾病组表达减少(P=0.01,P=0.01,P=0.02),较空白组表达增多(P=0.04,P=0.007,P=0.05)。结论 Th17细胞相关炎性因子增多是阿霉素肾病大鼠的发病机制之一,鲫鱼汤可通过升高血白蛋白,降低IL-17、IL-23、CXCR2表达而发挥肾脏保护作用。; 张勇邢广群张蓓宁华英王金香郭云良沈卫; 关键词：鲫鱼汤 IL-23 CXCR2 肾病

乙肝肝移植受者低病毒血症的单中心初步研究: 2023年; 目的探讨乙型病毒性肝炎(乙肝)肝移植受者术后低病毒血症(low-level viremia,LLV)的发生情况及其危险因素。方法回顾性分析90例乙肝肝移植受者的临床资料,最终共纳入49例符合入选标准的受者(肝移植手术时间为2006年12月至2021年2月)。采用高灵敏实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)DNA水平,根据HBV DNA载量将患者分为LLV组(6例)和完全病毒学应答组(CVR组,43例)。分析乙肝肝移植受者LLV的发生情况,比较两组受者的临床资料,以分析乙肝肝移植受者发生LLV的相关影响因素。结果49例术后常规检测方法提示没有HBV再感染的乙肝肝移植受者中有6例发生LLV,发生率为12.24%。随访时,LLV组6例受者中,有2例受者预防乙肝复发方案为核苷(酸)类似物(nucleoside analogues,NAs)+乙肝免疫球蛋白(hepatitis B immune globulin,HBIG),另外4例受者单用NAs。单因素分析结果显示,术前HBV DNA载量高、术后肿瘤复发、术前肿瘤分期超加州大学旧金山分校(UCSF)标准、体质量指数(body mass index,BMI)低是乙肝肝移植受者发生LLV的危险因素(均为P<0.05)。多因素分析结果显示,术前HBV DNA载量高是乙肝肝移植受者发生LLV的独立危险因素。结论肝移植术前HBV DNA载量高、术前肿瘤分期超UCSF标准、术后肿瘤复发与乙肝肝移植受者发生LLV相关,其中术前HBV DNA载量高是乙肝肝移植受者发生LLV的独立危险因素。对于乙肝肝移植受者,尤其是肝移植术前肿瘤分期较晚及HBV DNA阳性的受者,建议采用高灵敏RT-qPCR动态监测LLV。; 张群解曼田秋菊柳国芳张蓓蔡金贞饶伟; 关键词：乙型病毒性肝炎肝移植肝细胞癌复发

CD4+CD25high调节性T细胞与感染性疾病: CD4CD25调节性T细胞(Treg),是近年来研究发现的一种特殊的细胞亚群,它是在胸腺的发育过程中产生,在一些炎症因子和淋巴因子作用下特异性表达趋化因子受体CCR4和CCR8,与树突状细胞及吞噬细胞分泌的CCL17和C...; 张蓓; 文献传递

CD59在T细胞LAT脂筏内移位及跨膜信号转导中的作用被引量：5: 2013年; 目的用前期构建好的LAT-EGFP质粒转染Jurkat细胞,探讨单克隆抗体交联CD59前后CD59与接头蛋白分子LAT在Jurkat细胞活化转导中的相关作用。方法采用电转染的方法转染Jurkat细胞,抗体交联CD59后共聚焦显微镜下观察细胞膜上LAT-EGFP分子分布的变化;利用噻唑蓝(MTT)比色法检测CD59抗体交联前后Jurkat细胞的增殖效应;用Western blot技术检测CD59抗体交联前后LAT磷酸化情况。结果共聚焦显微镜下可观察到CD59抗体交联后LAT-EGFP由散在分布为主变为点簇状分布为主;CD59抗体交联刺激组Jurkat细胞增殖能力增加;Western blot结果表明CD59抗体交联后LAT磷酸化水平增加。结论抗体交联CD59能使接头蛋白分子LAT进入脂筏,并增强T细胞信号转导效应。; 高美华秦云王冰张蓓张树超; 关键词：CD59 LAT JURKAT细胞信号转导

不同植被恢复措施下剖面根系与SOC的分布特征被引量：1: 2014年; 根系是影响水土流失和土壤有机碳（SOC）变化的重要因素。在水土流失区,研究不同植被恢复措施下,根系生物量和土壤有机碳的分布特征对了解区域土壤碳循环具有重要意义。在水土流失严重的黄土丘陵沟壑区的燕沟小流域,选择地形条件类似的梁峁坡,采集了10种不同植被治理恢复措施下的剖面（0—100cm）根系和土壤样品,研究了根系生物量和SOC在剖面的分布特征。结果显示：不同治理措施下的SOC呈现出灌木〉乔木〉灌草〉草本的趋势,而根系生物量呈现出乔木〉灌木〉灌草〉草本的趋势;SOC和细根生物量都随土层深度的增加呈对数递减趋势,但同一土层SOC和细根生物量的分布不一致,且根系比SOC的分布浅。; 张娟张蓓杨永华王爱莉高美华; 关键词：有机碳植物根系

调控Tim-3通路在免疫性肝损伤大鼠中对Th17细胞的影响被引量：1: 2015年; 目的建立免疫性肝损伤模型,探讨Tim-3通路在阻断或激活时对Th17细胞的影响。方法大鼠尾静脉注射刀豆蛋白A(Con A)8周,建立免疫性肝损伤模型。无菌取脾脏制备脾淋巴细胞,取外周血分离血清后于-20℃保存,取肝脏组织放入4%的多聚甲醛中固定备用。在96孔板上将脾淋巴细胞平均分成5组,即阻断实验组、阻断对照组、激活实验组、激活对照组和Con A对照组。用Tim-3的单克隆抗体即Anti-Tim-3来阻断Tim-3通路;用Tim-3的重组配体galectin-9来激活Tim-3通路,37℃、5%CO2培养箱中培养72 h,收集细胞上清液于-20℃保存。生化分析法测血清中ALT、AST和ALB的表达;HE染色观察肝脏组织的病理变化;免疫组化法测肝脏组织中IL-17A和ROR-γt蛋白的表达;ELISA法测细胞上清液中IL-17A及IL-6的表达;实时定量PCR测各组脾淋巴细胞ROR-γt mRNA的表达。结果与对照组相比,模型组HE染色可见明显的炎性细胞浸润、肝脏组织损伤及较多的假小叶,免疫组化可见IL-17A和ROR-γt蛋白的表达明显升高;与阻断对照组相比,阻断实验组中IL-17A和IL-6的水平升高(P<0.05);与激活对照组相比,激活实验组中IL-17A和IL-6的水平降低(P<0.05);实时定量PCR显示与阻断对照组相比,阻断实验组中ROR-γt mRNA的表达明显增加(P<0.05)。结论免疫性肝损伤的发病与Th17细胞密切相关,免疫调控Tim-3通路可通过影响Th17细胞效应,进而参与免疫性肝损伤的发病机制。; 张文张蓓李秀梅沈若武丛蓓蓓杨丽华孙东君王建伟; 关键词：免疫性肝损伤 TH17细胞

T细胞衔接活化因子-绿色荧光蛋白真核表达质粒的构建及其在Jurkat细胞的定位被引量：3: 2013年; 目的:构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与T细胞衔接活化因子(Linker for activated of T cells,LAT)融合蛋白的真核表达载体,观测LAT-EGFP在Jurkat细胞中的定位表达。方法:利用RT-PCR技术提取并扩增LAT除去终止密码子外的全部序列,克隆到真核表达载体PEGFP-N3,酶切鉴定并测序。瞬时转染到Jurkat细胞中进行表达,荧光共聚焦显微镜观察LAT-EGFP在Jurkat细胞中的表达及细胞定位。提取转染后细胞总RNA,通过RT-PCR的方法检测LAT-EGFP在转录水平的表达。利用Western blot法进一步鉴定融合蛋白的表达。结果:重组载体经酶切鉴定,切出片段长度在750 bp左右与插入序列长度相符,并进一步进行测序鉴定证实连接完全正确。共聚焦显微镜观察表达的LAT-EGFP融合蛋白定位在细胞膜上,并呈点簇状聚集状态。RT-PCR扩增证实了LAT和EGFP的融合蛋白在Jurkat细胞中在转录水平的表达,Western blot分析进一步证明了LAT和EGFP融合蛋白构建成功,并在蛋白水平上有明显的融合表达。结论:成功构建真核表达载体LAT-EGFP,且融合蛋白LAT-EGFP与野生型LAT在Jurkat细胞中的定位一致,具有功能表达效应,这为后续准确研究具有棕榈酰化位点的跨膜接头蛋白的信号转导作用提供了一种良好的研究载体和方法。; 秦云高美华王冰姬静张蓓; 关键词：LAT 绿色荧光蛋白信号转导 T淋巴细胞

CD59与CD3在T细胞活化信号转导中的协同作用被引量：2: 2012年; 目的前期构建的真核表达载体pSUPER-CD3ζRNAi和pSUPER-CD59RNAi在Jurkat细胞中稳定表达,研究CD59与CD3分子在T细胞活化信号转导中的相互作用,进一步探讨CD59向T细胞内传递信号的相关机制。方法酶切鉴定构建的pSUPER-CD3ζRNAi和pSUPER-CD59RNAi;脂质体法将两种载体分别转染Jur-kat细胞,经G418筛选建立稳定转染细胞系;RT-PCR技术检测转染后CD59和CD3ζ在mRNA水平的表达抑制效果;采用噻唑蓝比色法检测转染前后各组Jurkat细胞的增殖效应,Western Blot技术检测各组细胞ZAP-70酪氨酸磷酸化的水平,激光共聚焦扫描显微镜检测各组细胞内Ca2+变化,ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素2(IL-2)的变化。结果重组载体转染后RT-PCR结果表明,转染pSUPER-CD3ζRNAi和pSUPER-CD59RNAi质粒的细胞组CD3ζ分子和CD59分子的表达分别受到抑制。转染干扰质粒的细胞组细胞增殖能力、ZAP-70酪氨酸磷酸化水平、Ca2+浓度及IL-2水平均明显低于未转染组和空质粒组,差异有显著性(F=96.13～328.60,q=6.27～32.664,P<0.01)。结论 CD59和CD3在T细胞活化信号转导中具有协同作用。; 王娟高美华张蓓; 关键词：抗原 CD59 抗原 CD3 JURKAT细胞信号转导

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张蓓

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