张新
- 作品数：7 被引量：19H指数：3
- 供职机构：北京大学第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技攻关计划北京市自然科学基金更多>>
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- 组合免疫球蛋白基因片段诱发抗淋巴瘤的体液免疫反应被引量：7
- 2002年
- 目的 用含表达不同抗原决定簇的免疫球蛋白重链可变区第 1家族 (IgHV1)质粒诱发小鼠抗Namalwa淋巴瘤细胞的免疫反应 ,探索制备通用型核酸疫苗的可能。方法 用RT PCR分别扩增Namalwa细胞、正常足月新生儿脐带血和成人外周血标本中的IgHV1基因片段 ,定向克隆到真核表达质粒pcDNA3 0中 ;将Namalwa细胞的IgHV1质粒 (Na IgHV1)、混合含有Namalwa细胞IgHV1的 1～ 4个抗原决定簇的正常人IgHV1的 6种质粒 (IgHV1 mix)和空pcDNA3 0质粒分别免疫动物 ;采用Western印迹和间接免疫荧光法检测 3组小鼠抗体产生的情况。结果 IgHV1 mix组和Na IgHV1组均能诱导出抗Namalwa淋巴瘤细胞特异的免疫反应 ,诱导产生的抗体能识别存在于Namalwa细胞表面的天然构象的抗原决定簇 ,两组诱导的抗体均从第 4周开始检出 ,第 6周达到高峰 ,第 8周开始下降 ,抗体滴度无明显差异。
- 林宁晶朱平张新董玉君任雅丽王奕嘉李宛晴
- 关键词：抗淋巴瘤体液免疫反应核酸疫苗免疫球蛋白肿瘤免疫方法
- 白血病多发家系的遗传因素分析
- ＜正＞ 目的分析了一例家族多发性白血病,利用微卫星（Microsatellite）分析家系中患者与正常人肿瘤相关基因遗传关系,探讨遗传因素在这一白血病多发家系发病中的作用。方法分析1例4代20人中有3人患有急性粒细胞白血...
- 郝麟朱平胡兰张新王奕嘉王逸群
- 文献传递
- 多发性骨髓瘤中人类疱疹病毒8型的定量分析及其相关基因的表达被引量：3
- 2001年
- 目的 确定多发性骨髓瘤 (MM)骨髓活检标本中是否存在人类疱疹病毒 8型 (HHV8)感染 ,病毒负荷量的差异与临床表现之间的关系。方法 实时荧光定量PCR确定骨髓活检标本中的HHV8病毒的负荷量 ,采用筑巢式PCR扩增患者外周血、骨髓穿刺和骨髓活检标本中HHV8KS330 2 3 3Bam片段 ,用逆转录 PCR方法了解HHV8病毒的致病基因病毒源白细胞介素 6 (vIL 6 )和病毒源干扰素调节因子 1(vIRF 1)的表达情况。结果 多数MM患者的骨髓活检标本可检出HHV8,荧光定量PCR发现阳性率为 6 9 6 % (16 / 2 3) ;筑巢式PCR时的阳性率为 82 6 % (19/ 2 3) ,骨髓穿刺和外周血标本的阳性率分别为 4% (1/ 2 5 )和 0。临床分析表明病毒的检出可能与化疗有关。vIRF 1在骨髓活检标本中表达率很高 ,为 83 3% (10 / 12 ) ,vIL 6的表达率为 0。结论 多发性骨髓瘤和HHV8感染有关 ,高表达的vIRF
- 董玉君朱平马明信朱强张新林宁晶王奕嘉卜定方虞积仁
- 关键词：多发性骨髓瘤基因表达
- 白血病多发家系的遗传因素分析
- 2003年
- 目的 通过一家族多发性白血病家系的基因连锁分析结合国内外文献探讨白血病发病的遗传因素。方法 收集 4代 2 0人中有 3人患有急性粒细胞白血病M1亚型的家系。应用DNAIQ试剂盒从骨髓涂片上提取DNA ,酚氯仿抽提法从外周血提取DNA。逆转录 -多重巢式PCR方法筛查白血病常见融合基因。利用Powerplex试剂盒进行微卫星多重荧光PCR扩增。结果 筛查家系中 5位成员未发现融合基因。确认 3例白血病患者代表位于 11条不同染色体上 11个基因的微卫星没有共同连锁关系。其他 2个微卫星由于在这个家族中的多态性不高 ,无法确认或者排除基因的连锁关系。结论 仅仅根据不充分的家系特征和某些细胞遗传学异常就认定白血病多发家系是遗传性白血病显然还缺乏证据。
- 郝麟朱平胡兰张新王奕嘉王逸群刘英
- 关键词：微卫星
- 有三种免疫球蛋白分泌的多发性骨髓瘤细胞的克隆起源被引量：2
- 2001年
- 目的 用 1例有 3种免疫球蛋白分泌的多发性骨髓瘤 (MM)患者免疫球蛋白重链 (IgH)基因标志探讨MM究竟是由几个克隆组成。方法 患者血清蛋白电泳发现 3个单克隆免疫球蛋白峰 ;RT PCR采用IgHV 6个家族 (VH1～VH6)正向引物 ,通用J区反向引物 ,IgH恒区Cμ、Cδ、Cγ、Cα和Cε 5种特异性反向引物。采用不同的引物组合进行PCR。获得的免疫球蛋白重排基因经克隆后 ,进行测序分析。结果 患者用VH3家族引物和通用J区引物获得一条边缘清晰的浓染条带 ,表明患者骨髓瘤细胞是由IgVH3片段组成可变区。用IgVH3和恒区Cμ、Cγ、Cα特异性引物也可获得相应的PCR产物条带 ,但是不能用引物VH1、VH2、VH4、VH5和J以及VH3和Cδ、Cε获得 ,表明患者有IgM、IgG、IgA基因重排 ,因此外周血血清有相应免疫球蛋白产物。克隆用Cμ、Cγ、Cα引物获得的PCR产物并扩增 ,然后测序比较 ,3种产物除恒区片段不同外 ,其重链基因的VH J重排序列完全一致。表明该MM患者血清出现的 3种免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的可变区是完全一致的。结论 尽管从蛋白角度分析该MM细胞似乎是寡克隆性的 ,但是基因序列分析的结果表明其恶性克隆仍然是单克隆性起源。
- 朱平刘继华林宁晶周建中张新董玉君张野坪岑溪南马明信虞积仁
- 关键词：多发性骨髓瘤克隆起源
- 用基因组DNA制备独特型抗淋巴瘤核酸疫苗的实验研究被引量：3
- 2002年
- 本研究观察从人B细胞淋巴瘤细胞系基因组DNA及RNA分别构建的表达载体作为核酸疫苗诱导小鼠产生抗肿瘤免疫反应的情况。分别提取人B淋巴瘤细胞系Namalwa细胞的基因组DNA及RNA ,将免疫球蛋白重链可变区 (IgHV)基因片段克隆到pcDNA 3.0真核表达载体中作为独特型核酸疫苗 ,其中DNA来源的核酸疫苗用LipofectAMINE转染COS细胞 ,然后用RT PCR观察转录及剪接的情况。两种不同来源的核酸疫苗分别肌内注射免疫小鼠后 ,用间接免疫荧光法检测抗独特型抗体的生成。结果发现 ,基因组DNA来源的核酸疫苗在COS细胞中能成功地转录 ,转录产物大小为 4 77bp ,其中 86bp的内含子区域被剪接 ;两种疫苗免疫动物后均可诱导针对Namalwa细胞特异的抗独特型抗体 ,并于第 6周达高峰。结论提示 ,淋巴瘤基因组DNA和RNA来源的IgHV基因片段均可制备核酸疫苗 。
- 林宁晶朱平张野坪石永进张新卜定方董玉君
- 关键词：B细胞淋巴瘤体液免疫免疫反应
- 用TCRβ可变区基因阵列反映疾病的淋巴细胞克隆变化被引量：5
- 2001年
- 将正常脐带血TCRβ(T细胞受体 β)重排基因制备成基因阵列 ,观察能否反映肿瘤或自身免疫病患者的淋巴细胞克隆的变化。方法 采用RT -PCR扩增混合 1 0例脐带血的cDNA不同家族的TCRβ可变区基因全部序列 ,经测序胶或SS CP电泳后 ,电转移到尼龙膜上 ,制成TCRβ可变区基因阵列。用同位素α - 32 PdCTP标记正常成人、脐带血、待检患考的TCRβ基因 ,与基因阵列杂交。结果 :从测序胶排列的基基阵列发现 ,正常成人及脐带血呈正常高斯分布 ,即呈多克隆性 ;一些肿瘤患者T淋巴细胞克隆有少数几个克隆的异常增生 ,即呈寡克隆性 ;1例急性T淋巴细胞白血病患者仅在Vβ1 6见单一的条带扩增 ,呈单克隆性。结论 :该基因阵列可以反映正常人淋巴细胞的克隆分布和疾病时出现的淋巴细胞变化。
- 张新朱平张蕊林宁晶任雅丽董玉君朱强马明信
- 关键词：基因重排RT-PCR基因芯片
