张之勇
- 作品数：37 被引量：46H指数：4
- 供职机构：山东省医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自然科学基金山东省优秀中青年科学家科研奖励基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学哲学宗教农业科学更多>>
- 一种基于2+N策略构建多靶点gRNA表达载体的方法及其应用
- 本发明属于基因编辑技术领域，具体涉及一种基于2+N策略构建多靶点gRNA表达载体的方法及其应用。本发明通过PCR获得单gRNA表达模块，并亚克隆至克隆载体中。通过定点突变法快速置换克隆载体中的gRNA碱基序列。通过同源重...
- 张之勇付加芳李佳起鞠思雨孙文娟杨华陈元王志毅成丽娟刁玉涛王晰崔世钰刘兆锴
- 与HLA-B27相互结合的KIR,LILR家族分子的筛选
- 目的:筛选与经典和非经典型HLA-1类抗原HLA-B27相互结合的天然免疫分子KIR,LILR家族成员,探讨天然免疫分子在强直性脊柱炎过程中发挥的作用.方法:构建天然免疫分子KIR,LILR的真核表达载体,瞬转入293T...
- 张之勇李德敏任霞宋冠华史美艳俞林昌姜国胜
- 关键词：天然免疫分子HLA-B27慢病毒
- TRIM22靶向调控elF4E在NB4细胞粒系定向分化过程中的作用与机制被引量：3
- 2017年
- 目的探讨在人急性早幼粒细胞白血病NB4细胞粒系分化过程中三基序蛋白22（TRIM22）的功能及其与真核细胞起始因子4E（eIF4E）的相互作用，从而进一步阐明TRIM22靶向调控eIF4E的机制。方法体外实验建立NB4细胞诱导分化模型，应用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT—PCR）及Westernblotting技术检测TRIM22、eIF4E基因和蛋白表达的变化，并通过电穿孔转染技术敲低或过表达TRIM22后利用CCK-8和流式细胞术检测其对细胞功能的影响，及对eIF4E蛋白表达水平的影响，最后利用免疫共沉淀（CO．IP）实验验证TRIM22与eIF4E的相互作用。结果全反式维甲酸（ATRA）诱导NB4细胞后，TRIM22的mRNA相对表达量由1．01±0．15逐渐升高到30．98±2．79（F=280．700，P=0．000），蛋白相对表达水平由0．22-t-O．03逐渐升高至0．51±0．05（F：51．430，P=0．000）。反之，eIF4E的mRNA相对表达量由1．01±0．09逐渐降低至0．47±0．06（F=20．520，P=0．000），蛋白相对表达水平由0．97±0．02逐渐降低至0．64±0．09（F=14．700，P：0．001）。流式细胞术检测TRIM22过表达后ATRA干预组PE—CDllb表达水平[（78．80±2．00）％]比空载体ATRA干预组[（58．70±2．70）％]和共转染后ATRA干预组[（61．60±3．80）％]均升高（t=9．535，P=0．000；t=8．187，P=0．000）。同时，过表达TRIM22基因水平后，eIF4E蛋白水平会反向变化（t=4．985，P=0．007）。CO—IP实验验证TRIM22通过结合eIF4E而起作用。结论TRIM22在NIM细胞粒系定向分化过程中促进细胞分化，并且可通过靶向结合eIF4E抑制其表达而发挥重要作用。
- 韩杨宋冠华田静廖琼李莲莲张晓瑜刘红艳张之勇姜国胜
- 关键词：细胞分化真核细胞起始因子4E
- 一种诱导细胞快速产生囊泡的方法及其应用
- 本发明提供一种诱导细胞快速产生囊泡的方法及其应用，本发明通过使用一种新型纳米颗粒2I‑Bodipy‑5C‑UiO‑Hf，与有核细胞共同培养，通过光照的方法获得囊泡。同时在囊泡中获得了目的蛋白的高效表达，而且在各型有核细胞...
- 张之勇官群李延安刁玉涛成丽娟左志彬高妍董育斌黄淑红徐强
- 文献传递
- 一种利用PolyHEMA检测细胞变形能力的方法
- 本发明公开了一种利用PolyHEMA检测细胞变形能力的方法，是通过polyHEMA对细胞与其基质连接处进行部分隔离，对细胞变形能力进行评估检测，通过显微镜记录细胞变形，生长的过程，利用CCK8检测等方法对细胞的变形能力进...
- 姜国胜唐天华张之勇温培娥宋冠华任霞任海全真钢李燕梅袁长金
- 全反式维甲酸联合丙戊酸钠诱导HL-60细胞分化过程中BRD4表达变化及其作用的研究
- 目的:探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)联合丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)诱导HL-60细胞分化过程中BRD4(a double bromodomain-c...
- 韦若颍宋冠华张之勇任霞姜国胜
- 关键词：白血病诱导分化全反式维甲酸丙戊酸钠
- 全反式维甲酸联合丙戊酸钠诱导HL-60细胞分化过程中BRD4表达变化及其作用的研究
- 目的:探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)联合丙戊酸钠(sodium valproate,VPA)诱导HL-60细胞分化过程中BRD4(a double bromodomain-c...
- 韦若颍宋冠华张之勇任霞姜国胜
- 关键词：白血病诱导分化全反式维甲酸丙戊酸钠
- 文献传递
- 白血病细胞HL-60诱导分化后LMP/TAP的表达变化及其意义
- 目的:建立全反式维甲酸(ATRA)和乙酸肉豆蔻佛波酯(PMA)分别诱导急性早幼粒白血病细胞株HL-60细胞分化的模型,研究抗原处理相关转运体TAP及低分子量蛋白酶体LMP的构成亚单位TAP1、TAP2、LMP2、LMP7...
- 方敏宋冠华任霞俞林昌韦若颖郭强张之勇姜国胜
- 关键词：HL-60细胞PMA诱导分化LMPTAP
- 文献传递
- 基于微生物基因组二代测序数据的Venn图制作方法及系统
- 本公开提供了一种基于微生物基因组二代测序数据的Venn图制作方法及系统。其中，一种基于微生物基因组二代测序数据的Venn图制作方法，包括：聚类微生物基因组二代测序数据，相似性高于预设阈值的微生物基因组序列聚类为一个OTU...
- 刁玉涛成丽娟陈芳刘红艳李莲莲张晓瑜阴海鹏张之勇
- 文献传递
- 天然免疫分子LILRB5慢病毒稳定转染THP-1细胞系的构建
- 2014年
- 目的构建天然免疫分子LILRB5的慢病毒表达载体,获得稳定转染LILRB5的单核细胞系。方法将LILRB5构建入真核表达载体pEGFP-flag,瞬时转染293T细胞系,通过免疫荧光和流式细胞术检测LILRB5-GFP和LILRB5-flag在293T细胞中的表达。构建慢病毒表达载体pHR-LILRB5,与p8.91和pMD共同转入293T细胞,产生标记有绿色荧光的LILRB5慢病毒,感染单核细胞系THP-1后通过流式细胞术检测LILRB5的表达。结果测序显示真核表达载体pEGFP-LILRB5-flag的序列与预期相符,瞬时转染pEGFP-LILRB5-flag的293T细胞可检测到绿色荧光蛋白的表达,流式细胞术检测显示LILRB5-flag在细胞膜表面有表达;构建亚克隆慢病毒载体pHR-LILRB5,经测序验证后,转染293T细胞,产生LILRB5的慢病毒,并感染THP-1细胞,流式细胞术检测LILRB5在THP-1细胞稳定表达。结论构建LILRB5的慢病毒载体,通过LILRB5慢病毒感染建立LILRB5的稳转THP-1细胞系。
- 王希娣张之勇任霞宋冠华禹林昌史美艳袁晓芬郭强李莲莲张晓瑜姜国胜
- 关键词：绿色荧光蛋白单核细胞慢病毒转染
