张丽
- 作品数：19 被引量：39H指数：4
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- 白血病干细胞的分子调控被引量：4
- 2009年
- 白血病干细胞(leukemic stem cell,LSC)的发现使得研究者能够更深入地阐释白血病的发病、复发、耐药等机制,为白血病的治疗开拓了新的研究途径和治疗方向。LSC与正常造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)有许多相似之处,如都具有自我更新能力和多向分化潜能,同时又具有自身独特的生物学性质。LSC具有某些特殊的细胞表面标志;有其自身的细胞周期特点。本文主要介绍LSC的分子调控机制,同时简单回顾LSC的起源和特征,靶向治疗等研究进展。
- 张丽梁英民
- 关键词：白血病干细胞分子调控靶向治疗
- 21-羟化酶缺陷症基因诊断方法的建立及应用被引量：3
- 2015年
- 目的建立一种荧光偏振检测技术联合直接测序法诊断先天性肾上腺皮质增生症中21-羟化酶缺陷症的新方法,并对中国人群中最常见的2种基因缺失和8种点突变进行检测。方法收集40例健康者及2例患者外周血,提取基因组DNA。设计通用引物,同时扩增CYP21A2和CYP21A1P等位基因片段,然后用序列特异的TAMRA荧光标记探针对扩增产物进行杂交检测,利用荧光偏振仪检测扩增杂交的荧光偏振值,确定是否存在该基因的缺失,同时用直接测序法验证检测结果;对Exon3Del 8bp(GAGACTAC)缺失进行检测时,将缺失的8个碱基设计在引物上,确保引物的特异性。同时根据CYP21A2基因与其假基因序列差异,设计5对特异性引物扩增CYP21A2基因,PCR后直接测序检测中国人群中最常见的8种点突变,包括P30L、i2g、I172N、E6Cluster、V281L、920-921insT、Q218X、R356W。结果荧光偏振法未检测到CYP21A2基因大片段缺失,检测结果与直接测序法结果对比差异无统计学意义(P>0.05),一致率达100%,40例健康者未检测到点突变,1例患者检测出Exon1G56R,Exon7c.920-921InsT插入杂合突变,1例患者检测出Exon4I172N、Exon8Q318X杂合突变。结论荧光偏振检测法联合直接测序法诊断21-OHD是一种高效的检测手段,可以广泛用于临床,不仅能对患者基因突变类型进行分析,在指导遗传咨询及产前诊断方面亦发挥重要作用。
- 张丽焦凯张菊
- 关键词：先天性肾上腺皮质增生症21-羟化酶缺乏症荧光偏振
- 所谓肺硬化性血管瘤的克隆性的研究被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨所谓肺硬化性血管瘤(PSH)组织内及整个病变的克隆性组成及意义。方法:选PSH患者手术切除标本29例,全部为女性。石蜡切片HE染色,应用激光捕获显微切割技术获取PSH组织中多角形细胞和表面立方细胞,分别提取基因组DNA,用甲基化敏感的限制性内切酶HhaⅠ消化,巢式聚合酶链反应扩增X染色体连锁的雄激素受体(AR)基因。AR基因产物经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染显示其长度多态性。结果:光镜下可见29例PSH均表现其典型的组织病理学特征:主要由实性、乳头状和血窦所构成,其中实性区细胞大小基本一致。高倍镜下可见实性区细胞呈圆形或多角形,胞质呈嗜酸性或略呈透明状,核分裂罕见;乳头状结构表面均被覆单层立方上皮。克隆性检测结果表明有23例显示AR基因位点具有多态性。经HhaI酶切后,所有具有多态性的标本2个条带中有1个条带的密度明显减弱或消失,而另一个条带保留,证明其均为肿瘤性增生。结论:PSH组织中的多角形细胞和表面立方细胞具有相同的单克隆增生模式,提示二者可能均为肿瘤的实质细胞。
- 张丽巩丽李艳红任凯夕姚丽兰淼朱少君韩秀娟王军张伟
- 关键词：单克隆硬化性血管瘤肺肿瘤雄激素受体
- 腰椎间盘突出症护理体验
- 目的：腰椎间盘突出症是临床上常见病、多发病，随着人们生活方式的改变和工作节奏的加快，腰椎间盘突出症的发病年龄有年轻化趋势，发病率也逐渐上升。为提高治疗效果，减轻患者痛苦，对腰椎间盘突出症患者进行正确的护理和健康教育显得尤...
- 张丽张方海
- 关键词：腰椎间盘突出症护理健康教育
- Notch信号在急性早幼粒细胞白血病患者骨髓中的表达被引量：2
- 2009年
- 目的:通过检测急性早幼粒细胞性白血病(APL)患者治疗前后骨髓中Notch信号途径中受体、配体和靶基因的表达情况,探讨其在APL发生中的作用.方法:采用半定量RT-PCR技术检测APL患者治疗前后骨髓中Notch1,Notch2,Notch3,Notch4,Delta-like-l,Delta-like-4,Jagged1,Jag-ged2,Hes1,Hes5的表达.结果:受体Notch2、配体Jagged1、靶基因Hes1的表达在APL完全缓解后明显下调,其它受体、配体及靶基因的变化无统计学意义.结论:在APL患者治疗前后存在Notch基因的改变,Notch信号的这些改变在APL的发病机制中可能有重要作用.
- 张丽夏德雨李国辉蒋姗姗谷芳娜梁英民
- 关键词：NOTCH急性早幼粒细胞白血病
- 多参数流式细胞术在白血病免疫分型中的应用
- ＜正＞目的探讨多参数流式细胞仪在白血病免疫分型中的特点及临床意义。方法回顾分型了68例新住院的白血病患者的免疫分型资料及骨髓形态学,组织化学及遗传学资料。采用BD FACS Calibur流式细胞仪,CD45/ssc双参...
- 蒋姗姗梁英民刘利郝森旺刘强陈任安杜娟张丽
- 文献传递
- 人Delta-like4^(ext)-93-217原核表达、纯化及蛋白活性检测被引量：1
- 2009年
- 目的:原核表达、纯化融合蛋白TRX/hDll4ext-93-217,并对其活性进行检测.方法:采用PCR方法扩增hDll4ext-93-217多核苷酸序列,克隆入pMD18T载体.测序正确后,将其亚克隆入pET32a(+)原核表达载体,获得pET32a(+)-hDll4ext-93-217载体.以该载体转化E.coli菌株BL21,IPTG诱导其表达.以镍离子螯合柱纯化目的蛋白,采用SDS-PAGE,Western Blot方法鉴定目的蛋白的表达;采用萤光素酶报告基因系统检测目的蛋白活性.结果:通过PCR扩增获得了目的片段hDll4ext-93-217,成功构建了该蛋白的原核表达载体pET32a(+)-hDll4ext-93-217.采用SDS-PAGE,Western Blot等方法均可检测到目的可溶性融合蛋白TRX/hDll4ext-93-217的表达.融合蛋白TRX/hDll4ext-93-217在25℃,IPTG终浓度0.5mmol/L条件下诱导表达8h的蛋白表达量最高.以镍离子螯合柱纯化,获得纯化融合蛋白TRX/hDll4ext-93-217浓度为1.5g/L,其荧光素酶报告基因的刺激活性与空白对照组及TRX组相比较差异具有显著性(P=0.0154,P=0.0227,P<0.05).结论:通过原核表达获得的可溶性融合蛋白TRX/hDll4ext-93-217可活化Notch信号途径.
- 伍艳兰黄斯勇牛晓丽张丽陈茹菲何飞张萍梁英民刘利
- 关键词：NOTCH信号途径造血干细胞原核表达
- 丝裂霉素C对粘膜损伤修复作用的实验研究被引量：11
- 2005年
- 目的 观察高浓度和长时间接触丝裂霉素C(MitomycinC ,MMC)对创面损伤修复的作用,以期为临床上MMC的合理应用提供依据。方法 将使用同种方法致鼻粘膜损伤的4 0只兔随机分为4组,每组10只。分别为生理氯化钠溶液对照组(A)和3组MMC实验组,B组药物浓度0 .4mg·ml-1、接触时间5min ;C组药物浓度0 .4mg·ml-1、留置;D组浓度2 .0mg·ml-1、接触时间5min。术后1月对各组粘膜愈合情况、病理形态学变化进行观察。结果 A组9例粘连,B组仅有2例粘连发生,B组与A组比较差异具有显著性的意义(P <0 .0 5 )。C组、D组均未有粘连发生。C组有6例鼻中隔穿孔,D组2例。光镜和电镜检查显示:A组成纤维细胞大量增殖,B组、C组、D组的成纤维细胞增殖受到抑制,B组创面修复良好,C组、D组中可见大量坏死细胞,粘膜上皮不连续,D组有结构异常的合胞纤毛和裸纤毛出现。结论 MMC能有效的抑制成纤维细胞增殖,但是高浓度和长时间接触MMC对于创面愈合均有不良影响。应用浓度0 .4mg·ml-1MMC ,接触时间5min对于鼻粘膜修复是安全、简单而有效的。
- 张丽陈文弦成诗银崔鹏程陈剑秋刘志
- 关键词：丝裂霉素C病理形态学变化鼻粘膜损伤坏死细胞粘膜上皮粘膜修复
- 肿瘤细胞内特异表达TRAIL载体的构建及其在喉癌细胞株Hepa2中的表达被引量：5
- 2005年
- 目的:克隆人可溶性TRAIL(sTRAIL)基因并构建肿瘤细胞特异性真核表达载体,为肿瘤基因治疗的靶向性奠定实验基础.方法:提取人外周血淋巴细胞总RNA,采用RTPCR扩增含有IL2信号肽和TRAIL凋亡诱导功能区的融合基因,克隆入真核表达载体pGL3181hTERT肿瘤特异性端粒酶启动子的下游,构建可分泌表达TRAIL基因的真核表达载体pGL3-181hTERT/TRAIL.用WesternBlotting鉴定喉癌细胞株Hepa2中表达产物.结果:RTPCR扩增得到了613bp的cDNA片段.经酶切及测序鉴定,与GenBank中报道的IL2信号肽和TRAIL凋亡诱导功能区cDNA序列完全一致,成功构建了肿瘤特异性高效分泌表达可溶性人TRAIL的重组真核表达载体pGL3181hTERT/TRAIL.WesternBlotting结果显示,获得的瞬时转染TRAIL在喉癌Hepa2肿瘤细胞中能有效表达.结论:重组真核表达载体pGL3/TRAIL的成功构建,为肿瘤基因治疗的靶向性提供了可行的理想工具.
- 成诗银张惠中陈剑秋张丽韩明坤
- 关键词：TRAIL
- 肺硬化性血管瘤整个病变的克隆性
- 2009年
- 目的:探讨肺硬化性血管瘤(PSH)整个病变的克隆性并阐明其本质.方法:利用激光显微切割技术获取22例女性肺PSH组织中多角形细胞和表面立方细胞构成的整个病变及病变周围正常肺组织,分别提取基因组DNA,通过基于女性体细胞构成组织内X染色体失活嵌合性和磷酸甘油酸激酶(PGK)基因位点的克隆性分析、观察PSH整个病变的克隆性.结果:22例肺PSH光镜下均表现为典型的组织病理学特征,即呈实性、乳头状、硬化性和出血性组织结构.病变主要由间质圆形或多角形细胞及被覆在乳头状结构表面的立方细胞所构成.克隆性检测结果表明有7例31.8%(7/22)显示PGK基因位点多态性.经HpaⅡ酶切后,所有具有多态性的标本2个条带中有1个条带的密度明显减弱或消失,而另1个条带保留,证明其均为肿瘤性增生.结论:PSH是一种真性肿瘤,构成PSH的2种主要细胞起源于同一类型细胞.
- 任凯夕巩丽张丽李艳红张伟朱少君韩秀娟姚丽兰淼
- 关键词：单克隆硬化性血管瘤肺肿瘤
