岳磊
- 作品数：51 被引量：58H指数：4
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：云南省重点新产品开发计划云南省科技计划项目云南省应用基础研究计划面上项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学理学更多>>
- EV-A71灭活疫苗长期稳定性考察及结果分析被引量：4
- 2017年
- 目的考察肠道病毒A组71型(EV-A71)灭活疫苗的长期稳定性。方法对中国医学科学院医学生物学研究所生产的,在2~8℃条件下保存54个月的Ⅲ期临床样品,进行全面检定以分析各质量指标的变化;用原倍疫苗样品以0、28d两剂腹腔免疫6~8周龄的Balb/c小鼠,检测其血清抗体效价,进行疫苗效力单位(EU)测定;用2倍系列稀释法稀释疫苗,取不同稀释度样品免疫6~8周龄的Balb/c小鼠,检测其血清抗体效价,进行半数有效量ED50测定。结果该样品在2~8℃保存54个月,所有指标均在质量标准的合格要求范围内,仅pH值7.4接近标准上限;抗原含量为180 U/ml,与原检测值相比,下降仅9.1%;半数有效量(ED50)为6.29U,与原检测结果4.90U保持了良好一致;疫苗初次免疫小鼠后28d抗体阳转率为100%,中和抗体效价为1∶16~1∶256,GMT值为1∶52,EU值为6.5;加强免疫后第7天,中和抗体效价为1∶1 024~1∶4 096,几何平均滴度GMT大幅度上升至1∶1 552.1,其EU值为194.0;疫苗样品稀释至45 U/ml的抗原量,仍能使免疫小鼠产生100%的抗体阳转,且GMT值达1∶27.9。结论 EV-A71灭活疫苗于2~8℃条件下保存54个月,其质量指标无明显变化。
- 何鑫谢天宏洪超李华宋霞罗芳宇王微岳磊杨婷熊增平谢忠平
- 关键词：疫苗免疫原性手足口病
- 一种稳定表达人源KREMEN1受体的Vero细胞及其应用
- 本发明提供了一种稳定表达人源KREMEN1受体的Vero细胞及其应用，本发明使用慢病毒技术，在非洲绿猴肾细胞（Vero）中过表达人KREMEN1基因，构建了稳定表达人源KREMEN1（hKREMEN1）受体的新型Vero...
- 岳磊谢忠平李华谢天宏杨婷向虹王杰高微捷严敏
- CV-A16疫苗候选株 K168-8Ac 低温连续传代效果的评价
- 2019年
- 目的通过对柯萨奇A组16型(coxsackievirus A16,CV-A16)K168-8Ac毒株低温连续传代后的生长稳定性和免疫原性进行评价,为柯萨奇A组16型减毒疫苗的研究提供指导。方法用本科室筛选的CV-A16疫苗候选株K168-8Ac在KMB17细胞上32℃连续传代到第80代(P80),从中选取8个代次的病毒P35、P40、P50、P60、P64、P66、P69、P80,分别进行感染性滴度检测,然后用这8个代次的病毒原液分别免疫BALB/c小鼠,初次免疫后60 d进行加强免疫,于初次免疫后28 d、60 d及加强免疫后7 d、21 d进行采血;同时选取第80代的病毒进行10倍系列稀释至10^(-7),分别用原液和10倍系列稀释的8个稀释度的病毒(即7.75 lgCCID_(50)/ml～1.75 lgCCID_(50)/ml)免疫BALB/c小鼠,初次免疫后第28天进行加强免疫,于初次免疫后28 d、加强免疫后7 d、加强免疫后21 d采血,用体外微量细胞病变法进行中和抗体效价检测。结果 K168-8Ac毒株在32℃条件下在KMB17细胞上连续传代后,8个代次的病毒均有较高的感染性滴度,感染性滴度在7.37 lgCCID_(50)/ml～7.75 lgCCID_(50)/ml间波动(平均为7.56 lgCCID_(50)/ml),表明其增殖特性较稳定。8个代次的病毒免疫小鼠后抗体效价及抗体阳转率之间差异均无统计学意义,初次免疫28 d(一次免疫)中和抗体效价GMT仅为1∶27.1(1∶11～1∶64),但初次免疫60 d时GMT比初次免疫28 d增长了2.0倍,达到1∶54.3;加强免疫后7 d、21 d GMT为1∶422.0和1∶1 140.0,分别比初次免疫28 d增长了15.6倍及42.1倍。用P80的病毒以7.75 lgCCID_(50)～1.75 lgCCID_(50)的剂量免疫小鼠,其中和抗体效价随感染剂量的降低而降低;初次免疫后第28天,7.75 lgCCID_(50)及6.75 lgCCID_(50)两个病毒剂量的中和抗体效价GMT分别为1∶32及1∶14,而5.75 lgCCID_(50)以下的剂量全部阴性;加强免疫后7 d及21 d,病毒含量低至4.75 lgCCID_(50)的GMT仍能达到1∶11,但低于3.75 lgCCID_(50)则为阴性,加强免疫后7 d及21 d,平均中和效价均小�
- 谢天宏宋霞杨婷李华龙润乡岳磊张也何鑫王正鑫谢忠平
- 关键词：柯萨奇病毒A组16型疫苗感染性滴度
- CVA10致手足口病的流行情况与疫苗研究进展被引量：3
- 2019年
- 手足口病主要由两种类型的肠道病毒,柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CVA16)和新型肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)引起。1997年,手足口病在一些国家和地区以及我国的多个省市暴发流行,其中柯萨奇病毒A组10型(coxsackievirus A10,CVA10)引起的手足口病发生率及重病率明显增多。因此,CVA10流行情况以及相关疫苗的研究对预防手足口病至关重要。现就以上方面的研究进展做一综述。
- 高微捷岳磊谢忠平
- 关键词：手足口病流行病学疫苗
- 5种不同细胞对柯萨奇病毒A组16型和肠道病毒71型的敏感性研究被引量：1
- 2015年
- 目的：评价肠道病毒研究中常用的5种细胞对柯萨奇病毒A组16型（coxsackievirus A16， CA16）和肠道病毒71型（enterovirus 71，EV71）的敏感性，为分离和培养CA16和EV71提供实验室依据。方法用分离的各15株CA16和EV71分别感染 RD、Vero、KMB17、Hep2和L20B细胞，每天观察细胞病变情况，按Karber法计算病毒感染性滴度。采用不同的统计学方法（包括方差分析和卡方检验）比较5种细胞对CA16和EV71的敏感性差异。结果5种细胞的CA16和EV71病毒感染性滴度间的差异具有统计学意义（CA16：F＝18．481，P＝0．000；EV71：χ2＝63．106，P＝0．000）。在5种细胞中，RD细胞对2种病毒的敏感性最高，CA16和 EV71的病毒感染性滴度分别可达7．8和8．2 lgCCID50／ml ，且均于接种细胞后48 h达增殖高峰，第4天进入增殖平台期；2种病毒在 Hep2和L20B细胞中的病毒感染性滴度均较低，CA16分别为5．2和4．2 lgCCID50／ml ，EV71分别为4．9和4．0 lgCCID50／ml ，且2种病毒在接种后第6～7天才达增殖高峰，但仅L20B细胞中的2种病毒于接种后第7天进入增殖平台期；CA16在 Vero 和 KMB17细胞中的病毒感染性滴度分别为6．9和7．3 lgCCID50／ml ，EV71分别为7．1和6．8 lgCCID50／ml ，2种病毒均在接种Vero和KMB17细胞后第3天达到增殖高峰，第5天进入增殖平台期。结论 RD细胞对CA16和 EV71的敏感性最好，其次是Vero和KMB17细胞，而Hep2和L20B细胞并非是分离和培养这2种病毒的理想细胞。
- 杨婷谢天宏宋霞李华岳磊龙润乡杨蓉罗芳宇朱凡丽张也谢忠平
- 关键词：肠道病毒属病毒培养细胞系敏感性
- IPV-D抗原检测试剂参考品的制备及标定被引量：1
- 2019年
- 目的制备一套可对IPV-D抗原检测进行质量控制的参考品。方法用组织培养的方法制备出3套用于IPVD抗原Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型的参考品;每个型别参考品有22份样品,包含10份阳性参考品,10份阴性参考品,1份灵敏度参考品,1份精密性参考品;每个型别参考品经9人次标定。结果 IPV-Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型参考品中10份阳参全部阳性,10份阴参全部阴性,灵敏度标定值分别1413. 13、1684. 66、1561. 95DU/ml,精密性参考品平均CV值分别为4. 52%、6. 54%、5. 68%;参考品37℃放置5天,反复冻融5次稳定性良好。结论制备的IPV-D抗原检测试剂参考品经各项试验检测结果合格,可用于IPV-D抗原检测试剂的质控。
- 谭振国龙润乡杨蓉罗芳宇李华谢天宏杨婷岳磊谢忠平
- 关键词：参考品
- 一种脊髓灰质炎病毒Ⅲ型D抗原预包被检测方法及其检测试剂盒和应用
- 本发明提供一种预包被的可进行批量生产的脊髓灰质炎病毒（Polio virus）Ⅲ型D抗原检测方法，采用牛（兔、羊）抗Ⅲ型脊髓灰质炎病毒D抗原纯化抗体包被微孔板，并通过保护剂对包被板和包被抗体进行保护后制备成预包被板，同时...
- 杨蓉罗芳宇谢忠平龙润乡李华杨婷陈洪波谢天宏岳磊谭振国王正鑫
- 文献传递
- 柯萨奇病毒A组10型免疫荧光检测方法的建立及其在灭活验证中的应用
- 2023年
- 目的建立检测柯萨奇病毒A组10型(coxsackievirus A10,CVA10)病毒颗粒的免疫荧光检测方法,使用该方法对病毒的灭活进行辅助验证。方法在非洲绿猴肾细胞(African green monkey kidney cell,Vero)、人恶性胚胎横纹肌瘤细胞(human malignant embryonic rhabdomyoma cells,RD)、非洲绿猴胚胎肾细胞(African green monkey embryonic kidney cells,MA104)三种细胞上检测病毒滴度,绘制滴度曲线确定最敏感细胞;以兔抗CVA10多克隆抗体为一抗、Alexa Fluor®594偶联的山羊抗兔IgG为荧光二抗,对实验条件进行优化,建立检测CVA10的免疫荧光方法,并与灭活验证中细胞盲传实验结果进行比较。结果RD细胞为CVA10最敏感细胞,一抗最佳稀释度为1∶100,二抗最佳稀释度为1∶200。病毒感染RD细胞后24 h可检测到的病毒量下限为50 CCID_(50)/ml,感染4 d时的检测下限为0.5 CCID_(50)/ml。Vero细胞为CVA10的较敏感细胞,相同条件下,病毒感染Vero细胞后24 h可检测到的病毒下限为80 CCID_(50)/ml,5 d时的检测下限为1 CCID_(50)/ml。灭活验证中,免疫荧光结果与细胞盲传实验结果具有一致性。结论成功建立了CVA10的免疫荧光检测方法,该方法可辅助细胞盲传实验进行灭活验证。
- 张宇昊杨婷李华岳磊向虹谢天宏张也谢忠平
- 关键词：免疫荧光检测敏感性
- 人呼吸道合胞病毒Long株的免疫原性初探被引量：1
- 2014年
- 目的评价人呼吸道合胞病毒(HRSV)Long株的免疫原性,为进一步的研究疫苗提供实验数据。方法将HRSV制备成纯化抗原,取40只ICR鼠,随机分为4组,分别用纯化HRSV、纯化HRSV+Al(OH)3、并设0.01 mol/L PBS、Al(OH)3对照组,0天、28天免疫小鼠,采用中和试验检测血清中和抗体,流式检测7种细胞因子。结果初免后28天,加Al(OH)3组与无Al(OH)3组抗体阳转率分别为60%和50%,抗体几何平均效价(GMT)分别为1∶4.49和1∶5.27;加强免疫后,Al(OH)3组与无Al(OH)3组小鼠血清抗体阳转率均达100%,抗体几何平均效价(GMT)分别为1∶17.15和1∶10.56,平均增长3.8倍和2.0倍;中和抗体在组间无差异,而组内初免与再免的中和抗体有统计学差异(P<0.01)。加Al(OH)3样品组与无Al(OH)3样品组,所检测7种细胞因子均诱导IL-6及TNF,与两个对照组间有统计学差异(P<0.05),而另外5种细胞因子则无明显升高。结论人呼吸道合胞病毒Long株可产生良好的免疫效应。
- 李华杨婷岳磊刘正玲姜广菊龙润乡杨蓉罗芳宇谢忠平
- 关键词：人呼吸道合胞病毒细胞因子免疫原性
- 肠道病毒71型抗原检测试剂参考品制备及标定被引量：7
- 2013年
- 目的制备一套EV71抗原检测试剂盒质量控制用参考品。方法用组织培养法制备的一组肠道病毒原液及EV71病毒液,制备成10份阴性参考品、10份阳性参考品、2份灵敏度参考品及1份精密度参考品;以上样品经多人次标定后确定最终结果。结果阴、阳性参考品各10份标定结果分别为10阴及10阳;2份灵敏度参考品标定结果分别为177.97U/mL和1966.86U/mL;精密度参考品平均CV值9.29%。参考品37℃保存5天及反复冻融6次对检测结果没有影响。结论制备的参考品经标定,并通过反复冻融、37℃热稳定性试验,检测结果稳定,可用于EV71抗原检测试剂的质量控制,保证抗原检测试剂检测结果的特异性、灵敏度及稳定性。
- 龙润乡李华杨蓉杨婷岳磊宋晓燕谢忠平
- 关键词：肠道病毒71型参考品
