龙润乡
- 作品数：99 被引量：184H指数：7
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划云南省重点新产品开发计划云南省应用基础研究计划面上项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学建筑科学更多>>
- 甲型肝炎灭活疫苗体外相对效力检测方法的研究及应用被引量：10
- 2010年
- 目的建立甲型肝炎灭活疫苗体外相对效力检测方法。方法用双抗体夹心ELISA法检测试剂对甲型肝炎灭活疫苗及效力试验参比进行检测,以检测OD值为反应指标,用生物检定双平行线法的基本原理进行统计分析,计算待检疫苗对应于效力参比品的相对效力(R值)。结果样品HAAg含量与检测OD值之间具有高度的相关性,R2≥0.97,适用于建立双平行线检定方法;通过对3批样品3人次检测结果分析,验证了所建立方法的可靠性,回归、偏离平行、二次曲线、反二次曲线4个指标全部通过了验证;用所建立的体外相对效力试验检测法对32批次甲肝灭活疫苗进行检测,结果与小鼠体内效力检测结果具有良好一致性,均能反映疫苗相对效力,两种方法检测相对效力(R值)之间无明显差别(t=1.0354,P=0.3045)。结论所建立的甲型肝炎灭活疫苗体外相对效力试验是一种灵敏、特异、方便、快捷的效力测定方法,可应用于甲型肝炎灭活疫苗效力检测。
- 谢忠平龙润乡李华陈洪波宋霞黄铠洪超杨蓉白惠珠
- 关键词：甲型肝炎病毒甲型肝炎灭活疫苗效力抗原
- 肠道病毒71型抗原检测试剂参考品制备及标定被引量：7
- 2013年
- 目的制备一套EV71抗原检测试剂盒质量控制用参考品。方法用组织培养法制备的一组肠道病毒原液及EV71病毒液,制备成10份阴性参考品、10份阳性参考品、2份灵敏度参考品及1份精密度参考品;以上样品经多人次标定后确定最终结果。结果阴、阳性参考品各10份标定结果分别为10阴及10阳;2份灵敏度参考品标定结果分别为177.97U/mL和1966.86U/mL;精密度参考品平均CV值9.29%。参考品37℃保存5天及反复冻融6次对检测结果没有影响。结论制备的参考品经标定,并通过反复冻融、37℃热稳定性试验,检测结果稳定,可用于EV71抗原检测试剂的质量控制,保证抗原检测试剂检测结果的特异性、灵敏度及稳定性。
- 龙润乡李华杨蓉杨婷岳磊宋晓燕谢忠平
- 关键词：肠道病毒71型参考品
- 柯萨奇病毒A组16型多克隆抗体的制备及其在检定中的应用被引量：3
- 2017年
- 目的评价CV-A16-K168免疫血清对CV-A16不同毒株的中和抗体效价,确定完全中和不同病毒量所需的最低血清量,为CV-A16疫苗毒种检定中的鉴别试验和病毒外源因子检查提供参考。方法将CVA16病毒抗原辅以弗氏佐剂以皮下多点注射方式免疫新西兰大白兔,多次免疫后取血清,采用微量细胞病变法进行中和抗体效价检测和对15株不同CV-A16毒株的中和效价检测,并用CV-A16-4V和CV-A16-10R两个毒株分析中和不同量病毒所需的抗体量。结果浓缩抗原作为免疫原获得的兔抗CV-A16血清中和抗体效价可达1∶2 048;该免疫血清对15株CV-A16不同毒株的几何平均滴度(genomic mean titer,GMT)为1∶3 118;完全中和7.5lgCCID50/ml CV-A16病毒所需的最低血清量为128U,当病毒量在4.0~7.0lgCCID50/ml时,完全中和所需的最低血清量为48U,当病毒量低于4.0lgCCID50/ml时,1U的血清即可完全中和本病毒。结论 CV-A16-K168株作为免疫原可获得高效价的抗血清;用不同毒株检测得到的抗体效价存在差异;完全中和病毒所需的最低血清量与病毒量呈正相关;病毒量与测得的血清中和效价呈负相关。
- 谢天宏杨婷宋霞李华岳磊刘正玲龙润乡杨蓉罗芳宇朱凡丽谢忠平
- 关键词：柯萨奇病毒A组16型免疫血清
- 两种甲型肝炎病毒抗原检测方法的建立及应用效果
- 目的建立两种甲型肝炎病毒抗原(HAV-Ag)ELISA检测试剂盒,并对其检测效果进行评价。方法生物素标记甲型肝炎病毒抗体(HAV-Ab)与辣根过氧化物酶标记亲和素联合应用建立甲型肝炎病毒抗原BA-ELISA检测法;同时使...
- 龙润乡谢忠平杨蓉李华白慧珠
- 关键词：甲型肝炎病毒ELISA检测BA-ELISA
- 文献传递
- 一种预防手足口病和甲型肝炎的联合疫苗及其制备方法
- 本发明公开了一种预防手足口病和甲型肝炎的联合疫苗及其制备方法，本联合疫苗包含灭活的EV71抗原、灭活的CA16抗原和灭活的HAV抗原；通过分别将肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CA16)以及用甲型肝炎病...
- 谢忠平李华龙润乡宋霞谢天宏杨婷罗芳宇岳磊杨蓉洪超王正鑫
- 文献传递
- HAV抗原检测ELISA试剂盒的验证及应用被引量：1
- 2019年
- 目的验证甲型肝炎灭活疫苗(人二倍体细胞)(甲肝疫苗)生产场地变更后原生产场地制备的ELISA试剂盒对HAV抗原检测的一致性.方法用原生产场地制备的抗HAV多克隆抗体包被的酶标板、辣根过氧化物酶标记的抗HAV抗体制备ELISA试剂盒,并对该试剂盒进行线性、精密度、准确度、专属性和稳定性验证,同时用该试剂盒检测甲肝疫苗中间品的HAV抗原浓度,考察其适用性.结果在新生产场地中ELISA试剂盒的检测线性范围为0.2~6.4 IU/ml,线性决定系数大于0.99.该试剂盒的精密度良好,检测结果的变异系数均小于15%.不同HAV抗原浓度样品的回收率为84%~104%.该试剂盒可特异性检测HAV,不与非HAV及HAV培养基质发生反应.包被抗体的酶标板于37℃放置7 d对检测结果没有影响.该试剂盒检测结果显示,HAV收获液、HAV纯化液和甲肝疫苗半成品的平均HAV抗原浓度分别为213.25、146.70和48.91 IU/ml,符合在生产过程中HAV抗原含量下降的规律.结论原生产场地制备的ELISA试剂盒可用于检测新生产场地生产的甲肝疫苗.
- 张浩然廉亚茹姜莉龙润乡杨蓉苏杰杨二霞
- 关键词：酶联免疫吸附测定
- HCV分片断抗体检测及优势抗原表位分析
- 目的：对HCV不同抗体片段进行检测分析，分析HCV优势抗原表位，为HCV抗原、抗体检测及疫苗研究提供帮助。
方法：收集经ELISA法检测抗HCV阳性血清样本90份，使用抗HCV分片段试剂进行检测，并用荧光定量P...
- 谢忠平杨蓉龙润乡李华白惠株廖云蒋蕊鞠王燕洪超
- 关键词：丙型肝炎病毒抗体检测
- 文献传递
- 国产HAVAB-E在甲肝疫苗抗体检测中的应用效果
- 2002年
- 目的 评估国产HAVAB -E诊断试剂盒在甲肝减毒活疫苗抗体检测中的应用效果。方法 用Abbott实验室的HAVAB -IMx以及中国医学科学院医学生物学研究所 (昆明 )和浙江省医学科学院普康生物技术公司生产的HAVAB -E 3种试剂对 184份疫苗接种者的 12周血进行检测对比试验。IMx试剂经用WHO甲肝免疫球蛋白标准品标化后定量检测标本的mIU/ml。结果 总体GMT为 2 7 2mIU/ml,其中 16 7份 (90 8% )抗体水平 >10mIU/ml。此结果较接近疫苗的保护效果。国产试剂的阳性率分别为 95 1% (175 /184 ,昆明 -E)和 90 2 % (16 6 /184 ,浙江 -E) ,两试剂结果一致率为 92 9%。国产试剂阳性率随抗体水平升高呈增加趋势 ,当滴度 >2 0mIU/ml时 ,与IMx的符合率分别为 98 1% (10 5 /10 7,昆明 -E)和 94 4 % (10 1/10 7,浙江 -E)。结论 两种国产酶免诊断试剂的定性检测结果真实可靠 ,在甲肝减毒活疫苗抗体检测中能客观反映疫苗的免疫原性和保护效果 ,是值得推广使用的诊断试剂。
- 龙润乡曹逸云周德久谭顺革陈洪波董德祥
- 关键词：甲型肝炎疫苗抗体检测
- 甲肝灭活疫苗接种安全性及免疫效果观察被引量：9
- 2002年
- 目的 观察甲型肝炎灭活疫苗的安全性及免疫效果。方法 挑选甲肝抗体阴性、丙氨酸转氨酶 (ALT)正常的健康的恒河猴 10只。随机分为 5组 ,每组 2只 ,每只接种 1ml甲肝疫苗 ,分别接种甲肝灭活疫苗吕 8株 (Lu8)、H2 株及史克疫苗。方案 :0、4周接种。接种 3天内 ,每天观察有无局部及全身反应。首次注射后每周采静脉血 1次 ,加强 1针后每 2周采血 1次检测抗HAV及ALT ,14周后改为每 4周采血 1次直至 4 6周。每周采粪便 2次 ,连采 4周 ,用KMB17细胞进行病毒分离。 4、8周肝组织穿刺作病理学检查。结果 接种疫苗后 3天内 ,所有猴子均无局部及全身反应。ALT正常 ,4、8周肝脏穿刺无特殊组织病理改变。首次注射后 2周 10 0 %抗体阳转 ,4周效价为 374 8mIU/ml～ 937mIU/ml。加强 1针后抗HAV效价有 10倍以上升高 ,抗体最高达 14 992mIU/ml,到 4 6周抗体水平持续在 2998 4mIU/ml～ 74 96mIU/ml之间 ,GMT为 31 2～ 34 2。大便传代 2次无排毒。结论 4批国产甲肝灭活疫苗接种恒河猴具有很好的安全性和可靠的免疫效果。
- 谭顺革金炜翔龙润乡陈洪波李华杨丽仙陈统球
- 关键词：甲型肝炎灭活疫苗恒河猴免疫效果
- 不同灭活剂对柯萨奇病毒A组16型免疫原性的影响被引量：4
- 2020年
- 目的评价甲醛及β-丙内酯对纯化柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CV-A16)灭活效果及免疫原性的影响。方法将制备的CV-A16-168病毒液经浓缩、纯化后,用不同浓度甲醛(1∶400、1∶2000、1∶4000、1∶8000)及β-丙内酯(1∶1000、1∶2000、1∶3000、1∶4000)灭活,CV-A16抗原ELISA检测试剂盒检测抗原含量,确定最适灭活浓度。用1∶4000甲醛及1∶2000β-丙内酯灭活CV-A16-168,按抗原含量分别制备为640和320 U/mL,加入Al(OH)3佐剂,制备灭活CV-A16-168实验疫苗,免疫BALB/c小鼠2次,间隔28 d,于首次免疫后28、35 d采血分离血清,采用体外微量中和试验检测小鼠血清中和抗体效价,流式细胞术检测血清细胞因子水平。将甲醛灭活和β-丙内酯灭活实验疫苗分别腹腔注射5只BALB/c雌鼠和雄鼠2次,间隔28 d,初免后7 d,雌雄小鼠合笼,怀孕后取出单独饲养,待乳鼠出生48 h内,分别用CV-A16-G10株(原型株,A基因型)、CV-A16-154株(B基因型)及CVA16-G20株(B基因型)进行1000 LD50的病毒株颅内注射,观察21 d乳鼠的临床症状及生存情况。结果1∶4000甲醛37℃3 d及1∶2000β-丙内酯4℃24 h均可完全灭活CV-A16-168。小鼠经灭活CV-A16-168实验疫苗免疫后,血清中和抗体阳转率均达到100%,甲醛灭活抗原含量640和320 U/mL组抗体GMT分别为1∶7131.55和1∶5042.77,平均增长42.2和45.3倍;β-丙内酯灭活抗原含量640和320 U/mL组抗体GMT分别为1∶10085.54和1∶6208.38,平均增长42.2和48.5倍;不同灭活剂处理的相同抗原含量间抗体GMT差异无统计学意义(P均>0.05),但组内二次免疫间的抗体GMT差异有统计学意义(P<0.001);甲醛和β-丙内酯灭活实验疫苗免疫小鼠后均诱导产生IFNγ,抗原含量640与320 U/mL组比较,有显著升高(P<0.001)。乳鼠经CV-A16不同基因型毒株攻毒,观察21 d后,全部存活,母传抗体可对不同基因型毒株颅内注射攻毒的乳鼠产生100%的保护。结论1∶4000甲醛及1∶2000β-丙内酯均可完全�
- 李华岳磊张也杨婷谢天宏何鑫高微捷卫星辰龙润乡杨蓉罗芳宇谢忠平
- 关键词：柯萨奇病毒A组16型甲醛灭活免疫原性
