孙淑芳
- 作品数：132 被引量：439H指数：11
- 供职机构：中国动物卫生与流行病学中心更多>>
- 发文基金：国家奶牛产业技术体系项目国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生经济管理环境科学与工程更多>>
- 己烯雌酚完全抗原的合成和多克隆抗体的制备被引量：4
- 2005年
- 采用混合酸酐法 ,将己烯雌酚与牛血清白蛋白或卵清蛋白偶联形成完全抗原。经紫外分光光度计扫描鉴定 ,并通过聚丙烯酰胺电泳实验 ,推算出牛血清白蛋白与DES HS的结合比是 1∶2 5～ 1∶30。以己烯雌酚 -牛血清白蛋白为抗原免疫家兔 ,制备出多克隆抗体 ,经酶联免疫吸附试验和琼脂扩散试验进行鉴定 ,并采用酶联免疫吸附方法进行效价测定 ,抗血清效价均超过了 1∶1 0 0 0 0。
- 曲志娜刘爽路平雷利辉陈德坤李葳孙淑芳张衍海郑增忍郭福生蒋正军
- 关键词：己烯雌酚多克隆抗体酶联免疫吸附测定法雌激素
- 运用RT-PCR一步法和Nested-CR法快速检测FMDV的研究被引量：5
- 1997年
- 将Ｏ、Ａ型ＦＭＤＶＲＮＡ分离纯化，用ＲＴ－ＰＣＲ法扩增其聚合酶编码基因，可检测到Ａ型１０－６倍稀释、Ｏ型１０－４倍稀释乳鼠肌肉毒。Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ扩增该基因内部片段，进一步说明该方法准确可靠。ＲＴ－ＰＣＲ一步完成使整个检测时间不超过１２小时。
- 蒋正军尹燕博龚振华马洪超孙淑芳蔡丽娟郭福生李葳吴时友黄运生林庆燕丁有胜骆德海陈义民
- 关键词：口蹄疫病毒FMDV聚合酶链反应
- 鸵鸟采精方法研究
- 尹燕博吉亚杰董武子梁成珠陆明哲孙淑芳于新文田茂春
- 基于不同抗原的犬布鲁氏菌病免疫层析胶体金抗体试纸条的制备和比较
- 2024年
- 为建立针对犬布鲁氏菌病的免疫层析胶体金快速检测方法,利用从犬种布鲁氏菌菌株提纯的膜蛋白和可溶性蛋白,原核表达纯化的外膜蛋白Omp31和BP26以及基于B细胞抗原肽的融合蛋白F14,分别制备了试纸条,然后采用犬布鲁氏菌病阳性和阴性血清,分别对上述试纸条进行敏感性和特异性比较。结果显示:Omp31抗原的敏感性最高,其次是F14和BP26,而全菌膜蛋白和全菌可溶性蛋白的敏感性较差;特异性上,使用由5种抗原制备的胶体金试纸条检测30份犬布鲁氏菌病阴性血清,结果均为阴性;5种试纸条与沙门氏菌、大肠杆菌(O157)、大肠杆菌(H7)、霍乱弧菌、副溶血弧菌、军团菌阳性血清均不发生交叉反应。另外,由F14和BP26制备的试纸条可识别羊布鲁氏菌病阳性血清,而由Omp31、全菌膜蛋白和全菌可溶性蛋白制备的试纸条均不能识别牛、羊布鲁氏菌病阳性血清。综上所述,Omp31、F14和BP26可作为制备犬布鲁氏菌病免疫层析胶体金检测卡的备选抗原。本研究为粗糙型布鲁氏菌引起的布鲁氏菌病的诊断提供了技术支撑。
- 郭晓涵焉鑫邵卫星殷德辉闫昊南文龙樊晓旭孙世雄张培培孙翔翔刘蒙达张皓博孙淑芳孙明军
- 关键词：犬种布鲁氏菌外膜蛋白
- 羊种布鲁氏菌Tat系统底物蛋白ErfK的抗原性和免疫原性研究
- 2024年
- 为分析羊种布鲁氏菌双精氨酸转运系统(twin-arginine translocation system,Tat system)毒力相关底物蛋白L,D-转肽酶ErfK诱导宿主产生的免疫应答情况,首先对布鲁氏菌M28毒株ErfK基因序列(WP_002963714.1)进行生物信息学分析,参考序列设计引物,构建表达载体pET-30a(+)-ErfK,经IPTG诱导表达、亲和层析和镍柱纯化获得目的蛋白;利用SDS-PAGE和Western blot对重组ErfK(rErfK)蛋白进行抗原性鉴定;将rErfK蛋白免疫小鼠,分别在免疫后15、30和45 d收集血清和脾脏,检测蛋白免疫后小鼠的细胞免疫应答和体液免疫应答情况。生物信息学预测结果显示,ErfK蛋白无跨膜结构,为亲水性蛋白,有多个T细胞和B细胞抗原表位;SDS-PAGE和Western blot均可获得25 kDa的蛋白条带,重组蛋白可与布鲁氏菌阳性血清发生反应,证明rErfK有良好的抗原性;小鼠免疫试验结果显示,rErfK组小鼠脾脏CD8^(+)T细胞含量相比PBS组显著上升(P<0.05),且脾脏Th1型细胞因子IL-2、TNF-α、IFN-γ和Th2型细胞因子IL-4转录水平均显著上升(P<0.05),此外,rErfK免疫也能极显著诱导小鼠血清中总IgG和特异性IgG的产生(P<0.01)。上述结果表明,经大肠杆菌表达的布鲁氏菌rErfK蛋白可诱导小鼠产生良好的体液免疫和细胞免疫应答。本研究为基于ErfK蛋白的布鲁氏菌病诊断试剂和亚单位疫苗研发提供了参考依据。
- 吴瑶焉鑫孙明军屈海龙郭晓涵闫昊张培培孙世雄李嘉琪孙翔翔刘蒙达张皓博南文龙南文龙邵卫星王方昆樊晓旭
- 关键词：布鲁氏菌抗原性免疫原性
- 鸵鸟血清主要无机生化指标的测定
- 尹燕博吉亚杰马洪超宋宏孙淑芳陆明哲蒋正军杜北
- 用PCR技术快速检测非洲猪瘟病毒被引量：7
- 1996年
- 选择编码非洲猪瘟病毒结构蛋白ＶＰ７３的部分基因片段为模板，用ＰＣＲ技术检测非洲猪瘟病毒ＤＮＡ，电泳分离可见１条长约１ｋｂ的ＤＮＡ扩增带。本方法具有安全、快速。
- 孙书华孙淑芳蒋正军吴时友
- 关键词：非洲猪瘟结构蛋白PCR猪瘟病毒
- 胚胎性别鉴定实用配套技术的初步试验被引量：4
- 1995年
- 胚胎性别鉴定PCR检测试剂盒和经切割取样性别鉴定后的胚胎冷冻保存,是达到胚胎性别鉴定实用化配套技术的主要关键技术。 本试验结果证明:1.在实验室将Y-DNA特异片段引物、dNTP和Tag酶等反应物,按比例配合成试剂盒后,进行冷冻保存的试剂盒,可取得与常规PCR检测操作技术方法的相同效果和准确率;2.采用快速冷冻的方法,冷冻保存切割取样性别鉴定后的胚胎,可取得57.1％(4/7)的移植成功率。
- 刘云海朱化彬罗应荣孙淑芳宫云浩吴时友杨化玉迟吉义
- 关键词：胚胎性别鉴定实用配套技术胚胎冷冻保存胜利油田试验结果PCR技术
- 哥伦比亚无口蹄疫区的建设管理介绍被引量：5
- 2011年
- 哥伦比亚无口蹄疫区建设始于上世纪90年代,历经10多年,先后建设了8片无疫区,到2010年,哥伦比亚实现了国家无口蹄疫。论文介绍了哥伦比亚无口蹄疫区建设的几个主要历程,总结分析了哥伦比亚无疫区建设所取得的成功经验,并对进一步推进我国无疫区建设提出了建议措施。
- 刘俊辉蒋正军张衍海郑增忍孙淑芳范钦磊郭建梅
- 关键词：建设管理
- 抗独特型抗体及其免疫调节作用
- Jerne,N.K于1974年提出的免疫调节网络学说认为:外来抗原在机体内应答产生的抗体(Ab1)可诱导产生抗Ab1的第二抗体(Ab2),并称之为抗独特型抗体(Anti-idiotype Antibody,Anti-1d...
- 蒋正军张衍海王永玲王玉东孙淑芳
- 文献传递
