刘蕾
- 作品数：10 被引量：37H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 血清10型鸭疫里默氏杆菌灭活油乳剂疫苗的研制被引量：5
- 2012年
- 鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipestifer,RA）感染是主要危害2~8周龄雏鸭的高致病性细菌性传染病。为研制血清10型RA灭活油乳剂疫苗,选取10株血清10型RA分离株进行动物体复壮、分离和鉴定后,分别对部分毒株进行了毒力测定和灭活油乳剂疫苗的研制。结果表明,所有试验用分离株对7日龄雏鸭均具有较强的致病力。分离株YXL1和HXb2的半数致死量分别为2.8×108 cfu和82 cfu,不同菌株之间的毒力差异很大。用研制的灭活油乳剂疫苗对雏鸭进行2次免疫后,免疫鸭可获得高水平的特异性抗体,并可抵抗强毒RA的攻击,以HXb2免疫后的攻毒保护性最好。抗体水平检测和攻毒保护试验结果表明,用血清10型RA分离株HXb2制备的油乳剂灭活疫苗具有良好的免疫保护作用。
- 王小兰刘蕾刘海文苗双胡青海韩先干丁铲于圣青
- 关键词：鸭疫里默氏杆菌灭活油乳剂疫苗酶联免疫吸附试验攻毒保护
- AI-2对鸭疫里氏杆菌粘附入侵Vero细胞及其相关基因转录水平的影响
- 自诱导信号分子AI-2(Autoinducer-2,AI-2)作为细菌间的通用自诱导信号分子,参与细菌众多生理功能的调控。本研究通过开展AI-2在鸭疫里氏杆菌(Riemerella antatipestifer,RA)C...
- 刘蕾韩先干刘瑞白灏董洪亮丁铲刘海文于圣青
- AI-2对鸭疫里氏杆菌粘附入侵Vero细胞及其相关基因转录水平的影响被引量：2
- 2013年
- 【目的】自诱导信号分子AI-2(Autoinducer-2,AI-2)作为细菌间的通用自诱导信号分子,参与细菌众多生理功能的调控。本研究通过开展AI-2在鸭疫里氏杆菌(Riemerella antatipestifer,RA)CH3株对非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)的粘附、入侵以及对RA相关基因调控作用的研究,为进一步研究AI-2对RA的调控作用奠定基础。【方法】在CH3(血清型1型)对Vero细胞的粘附、入侵过程中加入不同浓度的AI-2,研究其对CH3粘附、入侵Vero的影响;在添加184.0μmol/L AI-2的胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)中培养RA CH3菌株,利用real-time PCR来检测AI-2对RA相关基因转录水平的影响。【结果】结果表明,AI-2浓度为18.4μmol/L时,AI-2对CH3粘附Vero细胞的抑制性最强,为62%,当AI-2浓度为184.0μmol/L时,AI-2对CH3入侵Vero细胞的促进性最强为194%。荧光定量PCR结果表明AI-2对部分基因的转录有促进作用,对部分基因的转录有抑制作用。【结论】AI-2参与调控RA粘附、入侵Vero细胞及RA毒力因子、免疫原性蛋白基因以及代谢相关基因转录水平的调控。
- 刘蕾韩先干刘瑞白灏董洪亮丁铲刘海文于圣青
- 关键词：鸭疫里氏杆菌粘附入侵REAL-TIMEPCR
- 禽致病性大肠杆菌安徽分离株luxS和pfs基因的克隆、表达与细胞外合成AI-2活性检测被引量：14
- 2012年
- 【目的】LuxS/AI-2型密度感应系统存在于革兰氏阴性和阳性菌中,可产生用于细菌种间交流的通用自诱导信号分子AI-2(Autoinducer-2,AI-2),细菌许多生理功能都受此系统的调节。本研究开展对禽致病性大肠杆菌(Avian Pathogenic Escherichia coli,APEC)自诱导信号分子AI-2的检测和建立体外合成、定量的方法,为进一步研究APEC的AI-2调控作用奠定基础。【方法】利用哈维弧菌BB170(Vibrio harveyi BB170)开展对APEC AI-2的检测;利用表达、纯化的LuxS和Pfs在体外催化S-腺苷同型半胱氨酸(Sadenosylhomocysteine,SAH),进行AI-2的体外合成。【结果】APEC能产生自诱导信号分子AI-2;成功表达可用于AI-2合成的可溶性重组蛋白LuxS和Pfs;纯化的重组蛋白LuxS和Pfs与SAH同时作用后,合成了浓度为300μmol/L的AI-2;运用哈维弧菌BB170对合成的AI-2活性检测表明,其活性是阴性对照的700倍。【结论】APEC存在LuxS/AI-2型密度感应系统,APEC的LuxS和Pfs可以在体外催化SAH生成有活性的AI-2分子。本研究为进一步研究APEC的AI-2的调控作用奠定基础。
- 韩先干白灏刘蕾陈文静丁铲胡青海祁克宗于圣青
- 关键词：禽致病性大肠杆菌密度感应系统LUXS
- 影响禽致病性大肠杆菌信号分子AI-2产生的因素分析被引量：8
- 2013年
- 【目的】探讨禽致病性大肠杆菌(Avian Pathogenic Escherichia coli,APEC)在不同生长时期和不同培养条件下,信号分子AI-2(Autoinducer-2,AI-2)的合成与luxS和pfs的转录水平之间的关系。【方法】利用哈维弧菌BB170(vibrio harveyi BB170)检测不同生长时期和不同培养条件下APEC的AI-2活性。同时利用Real-time PCR检测APEC不同生长时期和不同培养条件下luxS和pfs的转录水平。【结果】APEC在不同生长时期的AI-2活性与luxS的转录水平保持一致。培养基中加入葡萄糖,麦芽糖和NaCl后,AI-2活性和luxS转录水平都上调,加入蔗糖后则都下调,两者保持一致性。AI-2活性与pfs的转录水平则并不一致。【结论】APEC的AI-2产生水平与luxS的转录水平有高度的相关性,而与pfs的转录水平没有显著相关性;葡萄糖、麦芽糖和NaCl,促进AI-2的合成。
- 白灏韩先干刘蕾祁克宗刘海文丁铲于圣青
- 关键词：禽致病性大肠杆菌LUXSPFSREAL-TIMEPCR
- 信号分子AI-2对禽致病性大肠杆菌的调控作用被引量：6
- 2012年
- 【目的】研究信号分子AI-2对禽致病性大肠杆菌(APEC)的调控作用。【方法】采用改良结晶紫半定量法和荧光染色法检测AI-2对APEC生物被膜形成能力的影响。Real-time PCR检测AI-2对APEC毒力基因转录水平的影响。活菌计数法观察AI-2对APEC黏附和入侵鸡胚成纤维细胞DF-1的影响。【结果】AI-2在浓度为0.185 mmol.L-1时,生物被膜形成能力显著增强,而浓度为0.037mmol.L-1和0.285mmol.L-1时,生物被膜形成能力无显著变化。Real-time PCR结果显示加入AI-2后,APEC毒力基因pfs,vat,luxS,tsh,fuyA,iucD转录水平显著下调,ompA和iss则上调。加入AI-2后,APEC对DF-1细胞的黏附和入侵能力分别下降到原来的57.35%和36.64%。【结论】AI-2对禽致病性大肠杆菌生物被膜形成具有浓度依赖性,在适宜浓度下能显著增强。AI-2能减弱禽致病性大肠杆菌毒力基因的转录水平和对DF-1的黏附和入侵能力。表明AI-2参与调控APEC致病性。
- 白灏韩先干刘蕾单雪芹宋军刘瑞董洪亮刘海文丁铲于圣青
- 关键词：禽致病性大肠杆菌生物被膜毒力基因入侵
- λpL/pR-cI857温控系统的改造及其对大肠杆菌菌蜕制备的影响被引量：4
- 2012年
- 菌蜕是革兰氏阴性菌在噬菌体Phix174的溶菌基因E的作用下形成的细菌空壳,通常由λpL/pR-cI857温控系统通过调控E基因的表达制备。通过重叠PCR技术,将λpL/pR-cI857温控系统中λpR启动子的第2个操纵基因(OR2)的第9位碱基由T突变为C(T→C)。溶菌试验结果表明,突变后的λpL/pR-cI857系统在37℃时仍能稳定抑制基因E的表达,对大肠杆菌的溶菌率为99.9%。通过对λpR启动子的改造,扩大了λpL/pR-cI857温控系统的温度调控范围,为菌蜕疫苗的研制提供了参考。
- 董洪亮韩先干白灏何亮刘蕾刘瑞柴同杰丁铲刘海文于圣青
- 关键词：大肠杆菌重叠PCR突变
- 信号分子AI-2对禽致病性大肠杆菌的调控作用
- 研究信号分子AI-2对禽致病性大肠杆菌(APEC)的调控作用.采用改良结晶紫半定量法和荧光染色法检测AI-2对APEC生物被膜形成能力的影响[1,2,3].Real-time PCR检测AI-2对APEC毒力基因转录水平...
- 白灏于圣青韩先干刘蕾单雪芹宋军刘瑞董洪亮刘海文丁铲
- AI-2对鸭疫里默氏杆菌生物学功能调控的研究
- 鸭疫里默氏杆菌病曾被称为鸭疫巴氏杆菌（Pasterurella anatispestifer，PA）病、鸭传染性浆膜炎（Infectious serositis）等，引起该病的病原是鸭疫里默氏杆菌（Riemerella ...
- 刘蕾
- 关键词：鸭疫里默氏杆菌生物被膜
- 文献传递
- 植物青枯菌Po82菌株致病力分化相关基因的分离及其功能研究
- 青枯菌(Ralstonia solanacearum)，是一种地域分布广且寄主范围非常大的毁灭性植物病原细菌。本实验室保存的Po82菌株与香蕉青枯菌及NPB菌株同属于演化型II/序列变种4，且兼具青枯菌2号和3号小种的致...
- 刘蕾
- 关键词：青枯菌抑制性差减杂交全基因组测序III型分泌系统
- 文献传递
