刘桥
- 作品数:18 被引量:29H指数:3
- 供职机构:武汉市医学科学研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖北省自然科学基金武汉市卫生局科研项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 抗人APPβ水解位点单克隆抗体的制备及其初步鉴定被引量:3
- 2010年
- 目的:制备能特异识别结合人APPβ水解位点的单克隆抗体(mAb)。方法:以APPβ水解位点短序列多抗原肽免疫BALB/c小鼠,取脾细胞和骨髓瘤细胞Sp2/0进行常规融合,通过间接ELISA和有限稀释法进行筛选和亚克隆,获得能分泌针对APPβ水解位点mAb的杂交瘤,采用ELISA、Western blot等方法对其特异性进行检测。结果:获得2株稳定分泌抗人APPβ水解位点mAb的杂交瘤细胞株,分别命名为1A7和2H10,其Ig亚类分别为IgGl和lgG2b。Western blot显示2株抗体可以与全长APP结合。结论:成功制备了能特异识别结合APPβ水解位点的mAb,为进一步研究其对β位点封闭功能和构建小分子抗体奠定基础。
- 黄巍庞蓓蓓周婷熊波周贝刘桥
- 关键词:APP杂交瘤单克隆抗体阿尔茨海默病
- 武汉市新型农村合作医疗门诊统筹调查研究
- 2013年
- 目的与门诊家庭账户模式相比较,对比分析武汉市新型农村合作医疗门诊统筹历年以来开展的效果,探索完善新农合门诊统筹实施的政策措施。方法通过对比武汉市全市历年新农合门诊统筹运行前后的数据,分析实施情况,评价实施效果,并提出政策建议。结果门诊统筹较家庭账户,受益面显著扩大;次均费用降低。结论门诊统筹模式更有利于参合农民充分利用基层卫生资源,提高门诊基金使用效率,显著扩大了新农合的受益面,但操作难度加大,建议推进支付方式改革,同时加强乡村两级医疗机构基础建设和信息化建设,提高医务人员业务水平,使新农合门诊统筹工作能长期稳定开展。
- 黄俞敏王晓刚刘桥周永康杨璇
- 关键词:新型农村合作医疗门诊统筹
- 淀粉样前体蛋白β位点单链抗体抑制β淀粉样肽的分泌被引量:1
- 2015年
- 目的观察淀粉样前体蛋白(APP)β位点单链抗体(sc Fv)对APP的α和β代谢的影响,为其作为APPβ分泌酶特异抑制剂奠定基础。方法以APPβ位点sc Fv 2H10基因序列为模板,通过PCR引入Igκ轻链信号序列和myc标签,与真核表达载体pc DNA3.1hyg(^+)相连,转染过表达人瑞典突变型淀粉样前体蛋白695(APP695)的CHO细胞株(APP695sw/CHO),经潮霉素B筛选出稳定转染细胞株,用夹心ELISA检测稳定转染细胞株培养上清中Aβ40和分泌型APPα(s APPα)的含量,并分别比较两者的变化。结果经PCR、酶切和测序鉴定证明,获得引入Igκ分泌信号和myc标签的APPβ位点sc Fv基因片段,且与真核表达载体正确相连。转染APP695sw/CHO细胞后,经潮霉素B筛选得到稳定转染株;Western blot法可检测到目的蛋白表达,ELISA结果显示,与对照相比,稳定转染细胞培养上清Aβ40分泌量约下降30.4%、s APPα水平上升23.1%。结论 APPβ位点sc Fv在抑制Aβ分泌的同时还可能有利于APP的α代谢,可作为β分泌酶高特异性抑制剂。
- 黄巍周丽荣李小鸥孙红霞周婷黄晓刚刘桥
- 关键词:淀粉样前体蛋白单链抗体Β淀粉样肽
- 武汉市区域卫生信息化的现状与对策被引量:6
- 2010年
- 通过对武汉市卫生信息平台与数据中心、卫生电子政务、公共卫生信息系统、医院信息化建设和社区卫生服务等现状进行分析,找出存在的问题,并提出相应的对策。
- 李滔白雪刘毅俊黄晓刚刘桥梁刚黄薇张良海周胜萍李娜曾雨陈敏
- 关键词:区域卫生信息化
- 武汉市社区卫生服务数据标准化策略被引量:1
- 2009年
- 发挥社区卫生服务中心健康"守门人"的作用离不开信息化的支撑,然而无论是社区卫生服务信息交流与共享,还是建基于上的运作效率和服务质量的改善都依赖于社区卫生服务数据的标准化和统一化,本组文章是以武汉市社区卫生服务信息化现阶段所取得的成绩为蓝本,详细介绍了武汉市社区卫生服务数据标准制定的全过程。在此基础之上,为了满足社区卫生服务信息管理的要求,该组文章还设计了一套涵盖部门业务系统、数据交换平台、数据中心平台、统一应用平台等几个部分组成的社区卫生服务的信息化管理系统,实现了综合查询、决策支持、部门业务功能、统一管理等多项服务功能。这样的改革探索无疑对全国其他地区也有启发和借鉴意义。
- 黄薇周曦刘桥梁刚王春容张良海陈玉兰李娜范一凡陈敏
- 关键词:社区卫生服务中心信息化管理系统信息管理数据交换数据中心
- 武汉市社区卫生信息系统的设计与实施被引量:1
- 2009年
- 发挥社区卫生服务中心健康"守门人"的作用离不开信息化的支撑,然而无论是社区卫生服务信息交流与共享,还是建基于上的运作效率和服务质量的改善都依赖于社区卫生服务数据的标准化和统一化,本组文章是以武汉市社区卫生服务信息化现阶段所取得的成绩为蓝本,详细介绍了武汉市社区卫生服务数据标准制定的全过程。在此基础之上,为了满足社区卫生服务信息管理的要求,该组文章还设计了一套涵盖部门业务系统、数据交换平台、数据中心平台、统一应用平台等几个部分组成的社区卫生服务的信息化管理系统,实现了综合查询、决策支持、部门业务功能、统一管理等多项服务功能。这样的改革探索无疑对全国其他地区也有启发和借鉴意义。
- 张良海梁刚刘桥李滔王春容黄薇刘毅俊黄晓刚周曦陈玉兰李娜陈敏
- 关键词:社区卫生服务管理卫生信息系统辅助决策系统统计报表专业网站
- Kozak序列(+4G)对携带EGFP标签的人淀粉样前体蛋白751在CHO细胞中表达的影响被引量:1
- 2011年
- 目的:观察Kozak序列(+4G)对稳定转染的人淀粉样前体蛋白(hAPP751)-EGFP融合真核表达载体在CHO细胞中表达的影响,为APP的水解代谢研究提供细胞模型。方法:分别将含Kozak序列(+4G)和不含Kozak序列的hAPP751全长基因片段亚克隆入pEGFP-N1表达载体,得到pEGFP-hAPP751(+4G)和pEGFP-hAPP751重组质粒,转染CHO细胞,通过G418筛选稳定转染细胞株,再用倒置荧光显微镜挑取绿色荧光强的细胞进行亚克隆,并观察融合蛋白的表达强度和细胞定位,最后用EGFP抗体通过Western印迹检测融合蛋白。结果:PCR、酶切和测序证明将含Kozak序列(+4G)和不含Kozak序列的hAPP751全长基因片段分别连入了真核表达载体pEGFP-N1中;荧光显微镜下观察pEGFP-hAPP751(+4G)稳定转染细胞的细胞膜和细胞质产生较强的绿色荧光,其中在细胞质中成不均匀颗粒状分布,Western印迹检测到相对分子质量约156 000的融合表达蛋白,与预期相符;pEGFP-hAPP751转染细胞,其绿色荧光十分微弱且在整个细胞均匀分布,Western印迹检测到相对分子质量约26 000的EGFP,但检测不到预期的hAPP751-EGFP融合表达蛋白。结论:Kozak序列(+4G)可以明显促进hAPP751的表达,获得稳定转染且高水平融合表达hAPP751-EGFP的细胞株。
- 黄巍庞蓓蓓熊波周婷刘桥
- 关键词:增强型绿色荧光蛋白
- APPβ分泌酶切割位点特异性单链抗体的制备和鉴定被引量:3
- 2012年
- 目的制备针对人淀粉样蛋白前体(APP)β分泌酶切割位点的特异性单链抗体(ScFv),并进行鉴定。方法设计扩增单克隆抗体细胞株重链和轻链可变区基因片段VH和VL的引物,利用RT-PCR技术,从本室制备的抗人APPβ分泌酶切割位点单克隆抗体细胞株中扩增出VH和VL基因片段,然后通过重叠引物延伸法(SOE)将VH和VL基因拼接成ScFv基因片段,再将其亚克隆入原核表达载体pET-28a中,转化E.coli BL21(DE3)诱导表达,目的蛋白经镍柱纯化和复性后,用SDS-PAGE、ELISA和Western blot等方法对其检测分析。结果成功从一株抗人APPβ位点单克隆抗体细胞株2H10中扩增出VH和VL并拼接成ScFv片段,片段长744 bp,编码248个氨基酸。PCR、酶切和测序表明表达载体构建成功,转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导可以表达出约29 ku的目的蛋白,主要为包涵体形式,经镍柱纯化和复性后,获得纯度达90%以上的ScFv蛋白,ELISA和Western blot检测表明可溶性ScFv可以与人APPβ分泌酶切割位点序列短肽和全长APP结合。结论成功构建并表达人APPβ分泌酶切割位点的特异性单链抗体,为进一步研究其生物学活性奠定基础。
- 黄巍周丽荣周婷孙红霞黄晓刚刘桥
- 关键词:Β分泌酶单链抗体阿尔采末病Β淀粉样蛋白
- 针刺结合中药外敷治疗寻常痤疮的临床研究
- 韩铁军王晓霞胡家瑞王夏青夏烽高琼卫静项红赵岩胡汉平熊瑛柴小玲孙莉刘桥黄晓刚
- 成果简介:寻常痤疮是一种青春期常见的毛囊皮脂腺的慢性炎症性疾病,表现为粉刺、丘疹、脓疱、结节、囊肿和瘢痕,好发于面、背、胸等富含皮脂腺的部位。有研究显示中国44.5%的青少年患有寻常痤疮,近65%的(16-17岁)学生既...
- 关键词:
- 关键词:针刺治疗中药外敷治疗中药制剂
- 乳健宁胶囊制备工艺的研究被引量:1
- 2014年
- 目的对乳健宁的制备工艺进行研究。方法观察挥发油不同时间的提取量,以浸膏得率和芍药苷为评价指标进行水煮正交试验。结果第1次加水10倍量,煎煮1.5 h,第2次和第3次加水8倍量,煎煮1 h,为最佳水煎煮工艺。结论以上研究结果可作为乳健宁的制备工艺。
- 周国运韩铁军张义生周少林刘桥黄晓刚刘欣万芳