龙月红
- 作品数：30 被引量：170H指数：10
- 供职机构：河北联合大学更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金石药集团医药联合研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学文化科学更多>>
- 刺五加HMGR基因的克隆与表达分析被引量：7
- 2012年
- 根据已报道的人参HMGR(3-羟基-3-甲基戊二酰CoA还原酶)基因cDNA序列设计引物,利用cDNA末端快速扩增(Rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术克隆刺五加HMGR基因的全长cDNA序列。运用生物信息学方法对该基因进行分析。通过RT-PCR法检测HMGR在刺五加不同生长发育时期和不同器官中的表达情况。结果克隆到长度为2 217 bp的刺五加HMGR基因cDNA序列,开放阅读框全长1 713 bp,编码570个氨基酸残基,包含HMGR家族的特异性识别序列。HMGR蛋白存在2个跨膜区域。RT-PCR结果显示,刺五加HMGR基因在各生长发育时期和器官中均有表达,但表达量具有显著差异,其中萌芽期的表达量最高,盛花期最低;各器官中,幼茎中表达量最高,是根中的1.58倍。
- 邢朝斌吴鹏龙月红何闪修乐山
- 关键词：刺五加克隆RT-PCR
- 刺五加叶片的透射电镜观察被引量：2
- 2013年
- ①目的观察刺五加叶片的亚显微结构,以期进一步探讨亚显微结构与刺五加苷含量的关系。②方法以3年生野生刺五加叶为材料,采用超薄切片技术制备样品,并于透射电子显微镜下观察细胞结构。③结果刺五加叶肉细胞中叶绿体、液泡、线粒体、细胞核等细胞器结构完整,清晰,刺五加叶片的超薄切片可有效地用于亚显微结构的观察。④结论试验中观察到清晰的刺五加叶片亚显微结构,为深入研究细胞的组织结构和刺五加的鉴别提供了新依据。
- 张红梅王明艳韩秀玲吴鹏龙月红邢朝斌
- 关键词：刺五加透射电镜亚显微结构超薄切片
- 河北联合大学校园植物多样性调查被引量：4
- 2013年
- 为了解河北联合大学校园植物的多样性,通过实地考察法,对其植物物种的种类、数量等进行系统调查。结果表明:河北联合大学校园植物资源较为丰富,共有植物138种,隶属于57科114属。其中菊科、蔷薇科物种较多,多年生木本植物应用频率较高,但绿化结构简单。
- 邢朝斌吴鹏刘岩龙月红
- 关键词：校园植物多样性
- 基于校园植物网的教学模式探索被引量：1
- 2013年
- 为了提升植物学相关课程的教学效果,在对校园植物进行系统调查和资料整理的基础上,建设了图文并茂的河北联合大学校园植物网,用以指导教学实践。校园植物网显著提高了教学质量和学生的学习兴趣,并营造出了良好的校园文化氛围。
- 邢朝斌张家琦龙月红刘岩
- 关键词：教学实践
- 刺五加过氧化氢酶基因的克隆与表达分析被引量：3
- 2014年
- 为了深入了解过氧化氢酶(catalase,CAT)基因在刺五加抗逆反应及次生代谢中的作用,采用RACE技术克隆到刺五加CAT基因的cDNA全长序列,并通过RT-PCR法检测了CAT在刺五加不同生长发育时期和器官中的表达情况。刺五加CAT基因cDNA全长1 840 bp,开放阅读框长1 479 bp,编码492个氨基酸的蛋白。该蛋白包含CAT家族的标志性序列,定位于过氧化物酶体。刺五加CAT基因在不同生长发育时期和器官中均有表达,但表达量具有显著差异(P<0.05)。其中盛花期的表达量最高,是最低量果实基本成熟期的1.28倍;各器官中,叶柄的表达量最高,是茎最低量的1.48倍。
- 邢朝斌刘岩修乐山龙月红吴鹏
- 关键词：刺五加过氧化物酶克隆
- 基于关键酶靶点基因研究内生青霉P116-1a提高刺五加皂苷含量的机制被引量：2
- 2015年
- 为了探明刺五加鲨烯合酶(squalene synthase,SS)、鲨烯环氧酶(squalene epoxidase,SE)和β-香树酯醇合成酶(β-amyrin synthase,β-AS)基因家族各成员中靶点基因在内生青霉P116-1a提高皂苷含量的作用机制,我们利用Real time PCR法检测了回接P116-1a对刺五加SS、SE和β-AS基因家族各成员表达的影响;应用分光光度法测定总皂苷含量变化,并以SPPS17.0软件进行相关性分析。结果表明,回接菌株P116-1a后,SS1的表达量显著降低(p<0.05),SS2呈先高后低的变化趋势。SE1的表达量显著提高(p<0.05)。回接的早期,P116-1a显著抑制了SE2的表达(pAS2<0.05),之后回复正常。β-AS1呈现先高后低的变化趋势与SS1的变化趋势相似;β-基因的表达量显著提高(p<0.05)。菌株P116-1a显著提高了刺五加的皂苷含量(p<0.05)。SS2、SE1和β-AS2的表达量变化与刺五加的皂苷含量变化呈显著的正相关关系。我们初步判断,SS2、SE1和β-AS2是P116-1a提高刺五加皂苷含量的作用靶点基因。
- 龙月红杨果李非非邢朝斌
- 关键词：刺五加皂苷类
- 内生真菌对刺五加皂苷合成关键酶基因表达及皂苷含量的影响被引量：17
- 2012年
- 目的:分析刺五加内生真菌菌株P116-1a,P116-1b,P109-4,P312-1对刺五加中皂苷合成关键酶基因SS(squalenesynthase),SE(squalene epoxidase),bAS(β-amyrin synthase)表达量和皂苷含量的影响。方法:伤口法回接内生真菌。以GAPDH为内参照基因,Real time PCR法检测关键酶基因表达量的变化。分光光度法测定刺五加的总皂苷含量。结果:回接P116-1a和P116-1b 30 d,刺五加SS基因的表达量显著提高(P<0.05),P109-4和P312-1无显著变化,之后出现降低-相等-降低的变化趋势。回接菌株P312-1 30 d,刺五加SE的表达量显著提升(P<0.05),回接菌株P116-1b和P312-1 90 d,SE的表达量分别显著提升至对照的130%,161%(P<0.05)。回接120 d,4个菌株处理的SE表达量均显著高于对照(P<0.05)。各处理bAS的表达量在回接60～120 d时均显著高于对照(P<0.05)。4个菌株均显著提高了刺五加的皂苷含量(P<0.05)。结论:菌株P116-1a,P116-1b,P109-4,P312-1可显著影响刺五加SS,SE,bAS的表达量,进而影响刺五加的皂苷含量,其中bAS为主要靶点基因。
- 邢朝斌龙月红劳凤云何闪梁能松李宝财
- 关键词：刺五加内生真菌关键酶基因
- 刺五加甲羟戊酸焦磷酸脱羧酶基因的克隆与表达分析被引量：11
- 2012年
- 利用RACE技术克隆刺五加甲羟戊酸焦磷酸脱羧酶(mevalonate diphosphate decarboxylase,MDD)基因的全长cDNA序列,运用生物信息学方法对该基因进行分析,并通过RT-PCR法检测MDD在刺五加不同生长发育时期和不同器官中的表达情况。结果表明:(1)刺五加MDD基因cDNA序列全长1 769bp(GenBank登录号为JQ905594),开放阅读框全长1 263bp,编码420个氨基酸残基,包含GHMP激酶超家族的特异性识别序列;刺五加MDD蛋白的二级结构中含有161个α螺旋,占38.33%;68个延伸链,占16.19%;19个β折叠,占4.52%;172个无规则卷曲,占40.95%;刺五加MDD蛋白无跨膜区域,定位于膜外。(2)刺五加MDD基因在不同生长发育时期和器官中均有表达,但表达量具有显著差异(P<0.05)。在整个生长期中,MDD的表达呈现高-低-高-低的变化趋势,第一个表达高峰出现在萌芽期至叶片完全展开时,第二个高峰出现在果实体积快速增长期,最高表达量(叶片完全展开期)为最低表达量(叶片衰老期)的4.51倍;不同器官中,幼茎的表达量最高,为最低表达量(叶片)的7.22倍,但叶片、叶柄和根中的表达量差异不显著。研究结果为阐明刺五加皂苷的生物合成及对其进行表达调控奠定了基础。
- 邢朝斌龙月红何闪周秘修乐山
- 关键词：刺五加
- 生物技术专业创新性实践教学体系的建立与实践被引量：10
- 2013年
- 面对生物技术专业毕业生与企业需求的研究开发型人才不相适应的现象,通过搭建本科生参加科研的创新性实验教学平台和实验教学体系,设置配套的教学与科研紧密结合的实验教学内容,完善管理措施、评价体系和建立配套实验室等措施.使学生通过基础实验——综合提高型实验——研究创新性实验三个层次的训练,在熟悉生物学的基本概念、方法后,逐渐形成较为系统的科研理念,将实验教学从基础性、综合性向研究性、开放性推进,显著提高了学生的研发能力.
- 邢朝斌田喜凤吴鹏龙月红
- 关键词：生物技术实践教学
- 刺五加鲨烯合酶基因cDNA的克隆与序列分析被引量：7
- 2012年
- 采用改良的异硫氰酸胍法提取刺五加总RNA,逆转录为cDNA,根据已报道的人参鲨烯合酶基因(squalene synthasegene,SS)cDNA序列设计引物,利用RT-PCR法克隆刺五加SS基因的cDNA序列。克隆得到长度为1258 bp的刺五加SS基因cDNA序列,开放阅读框全长1248 bp,编码415个氨基酸残基,GenBank登录号为HQ456918,与人参的SS1、SS2和SS3氨基酸序列一致性分别为91.73%、97.59%和96.63%。首次分离并报道了刺五加SS基因cDNA序列,为刺五加苷生物合成中关键酶的表达分析及调控机理研究提供参考。
- 龙月红邢朝斌王明艳吴鹏陈龙梁能松何闪
- 关键词：刺五加克隆RT-PCR
