黄炯烈
- 作品数:45 被引量:171H指数:9
- 供职机构:中山大学中山医学院更多>>
- 发文基金:广东省自然科学基金国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 白纹伊蚊细胞色素P450 CYP6N亚家族新成员5’-及3’-非翻译区序列功能分析被引量:2
- 2001年
- 目的 获得白纹伊蚊细胞色素P45 0CYP6N亚家族新成员 5’ -及 3’ -非翻译区 (untranslatedregion ,UTR)核苷酸序列 ,并进行功能分析。方法 以本文作者已获得的白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株一新的细胞色素P45 0CYP6基因cDNA片段 ,设计 1对特异性引物 ,以反向引物 ,进行 5’ -cDNA末端快速扩增 (rapidamplificationofcDNAends ,RACE) ,以正向引物进行 3’ -RACE。然后分别进行克隆、测序和鉴定 ,以获得 5’ -UTR和 3’ -UTR ,并运用PC/GENE软件分析其功能。结果 获得CYP6N亚家族中两个新成员 5’ -UTR及 3’ -UTR ;其结构特征包括 :两个新成员前导序列均为 46个核苷酸 ;起始密码子ATG两侧核苷酸 - 3位是A、+ 4位是T ;5’ -UTR区域无稳定性的发卡结构 ;终止密码子在CYP6N3为TAA、在CYP6N4为TAG ,紧挨其 3’端核苷酸分别为A和G ,翻译产物羧基端均为亮氨酸。结论 成功地获得了白纹伊蚊细胞色素P45 0CYP6N亚家族两个新成员 5’ -及 3’ -非翻译区序列 ,进一步分析表明该两个新成员均能进行有效翻译 ,昆虫细胞色素P45 0基因翻译起始调控与翻译终止调控有部分类似于脊椎动物mRNA的翻译调控 ,但具有多态性的特点。
- 周国理黄炯烈吴瑜王玲
- 关键词:白纹伊蚊细胞色素P450非翻译区
- 美洲大蠊若虫cDNA表达文库的构建和初步鉴定
- 目的:构建美洲大蠊若虫cDNA表达文库.方法:应用定向克隆技术将相应cDNA片段插入λExCell/Not I/EcoR I/CIP载体的Not I和EcoR I双酶切位点间,并采用PCR方法对插入片段大小进行分析.结果...
- 刘志刚黄炯烈朱振宇周珍文刘玉琳龚十妹
- 文献传递
- 昆虫CYP6家族多样性与进化被引量:16
- 2002年
- 了解昆虫CYP6家族的多样性与进化 ,对认识昆虫细胞色素P45 0参与抗药性发生、发展的分子生物学机制具有重要的意义。作者就昆虫CYP6家族多样性的各种表现形式及其形成原因、自然进化史。
- 周国理黄炯烈
- 关键词:昆虫多样性进化
- 蚊虫胸内接种微丝蚴后血淋巴酚氧化酶活性的变化被引量:1
- 1991年
- 埃及伊蚊ref^m株和repRR株分别经胸内接种微丝蚴或TC199后,观察蚊血淋巴中酚氧化酶活性的变化。结果表明,不同接种处理的两株蚊在处理后第1天血淋巴酚氧化酶活性均显著提高,第2天后逐渐恢复至正常水平。但不同龄的同株蚊之间,同龄的不同株蚊之间,酶活性变化水平差异明显,接种处理后第1天酶活性升幅前者为1.74~1.91和4.87~5.27倍,后者为1.74~1.91和3.66~4.38倍。
- 黄炯烈
- 关键词:埃及伊蚊
- 白纹伊蚊乙酰胆碱酯酶基因片段克隆及鉴定被引量:4
- 2001年
- 目的 从白纹伊蚊中分离、克隆及鉴定乙酰胆碱酯酶 (ACh E)基因片段。 方法 根据已知的果蝇和斯氏按蚊 ACh E氨基酸序列保守区域设计简并引物 ,对白纹伊蚊 ACh E基因片段进行扩增 ,将凝胶回收的 PCR产物经与 T-载体质粒连接进行 T/ A克隆 ,用α互补筛选法筛选重组质粒克隆 ,用碱裂解法提取重组质粒 DNA并对重组质粒进行酶切鉴定和 PCR鉴定。 结果与结论 获得与设计相符的白纹伊蚊 ACh E基因片段
- 吴明玮张玲敏黄炯烈周国理吴瑜赵双星
- 关键词:白纹伊蚊乙酰胆碱酯酶抗药性克隆
- 昆虫细胞色素P450异源表达被引量:1
- 1999年
- 细胞色素P450酶在昆虫生长、发育及代谢外源化合物上起重要作甩,异源表达是研究昆虫P450酶的结构、功能及其表达调控的重要途径。昆虫细胞色素P450异源表达主要有三大体系:细菌、酵母、杆状病毒表达系统,本文就上述三太表达体系在昆虫细胞色素P450研究中的应用作一综述。
- 吴瑜周国理黄炯烈
- 关键词:昆虫细胞色素P450酶异源表达
- 成蚊传播登革病毒媒介效能的研究进展被引量:9
- 2005年
- 宋秀玲黄炯烈郑小英吴瑜
- 关键词:成蚊登革病毒媒介效能
- 蚊虫细胞色素P450基因系列研究被引量:1
- 2001年
- 报告中山医科大学寄生虫学教研室医学昆虫学室近 5年来有关蚊虫细胞色素P45 0基因 (CYP45 0 )系列研究结果 ,包括 :①通过简并引物PCR分别从致倦库蚊、白纹伊蚊及中华按蚊中获得 3个、2个、2个CYP4家族成员基因片段 ;通过简并引物PCR及RT PCR从白纹伊蚊中获得 16个CYP6家族成员基因片段 ;②利用cDNA末端快速扩增 (RACE)法获得了白纹伊蚊CYP6家族 3个新的全长cDNA序列及 7个超过其全长一半以上的cDNA序列。GenBankaccessionnumber分别为AF2 83836 AF2 83838(全长cDNA序列 )和AF2 84782 AF2 84783(非全长cDNA序列 ) ,被国际P45 0命名委员会正式命名为CYP 6N3v1 v3(全长cDNA序列 )和CYP 6N3v4、CYP 6N4v1 v6 ,并证实这些新基因同时存在于白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株及敏感株中 ;③运用基因步移方法从白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株中扩增出CYP 6N3上游 3 0 76bp调控序列 ;④对白纹伊蚊CYP 6N3、CYP 6N4非翻译区序列功能分析显示 :昆虫CYP45 0与其它真核mRNA翻译起始及终止机制相似 ,但具有多态性的特点 ;⑤对白纹伊蚊CYP 6N3上游启动子区序列特征与功能分析显示 :蚊虫中CYP45 0转录起始存在着复杂性 ;⑥证实蚊虫中 CYP6存在多样性 ,并分析讨论了此种多样性形成的可能机制 ;⑦分析讨论了蚊虫细胞色素P45 0
- 黄炯烈周国理吴瑜葛春喜王玲
- 关键词:按蚊属伊蚊属库蚊属蚊虫基因扩增
- 基因步移在分离蚊虫细胞色素P450启动子中的应用及意义被引量:2
- 2001年
- 【目的】快速扩增出白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株CYP 6N3基因 (CYP 6N3)上游启动子区序列。【方法】根据本室已获得的白纹伊蚊CYP 6N亚家族新成员CYP6N3全长cDNA的 5′ 末端核苷酸序列 ,设计 2个反向特异引物 (GSP1和GSP2 ) ,利用 4种限制性内切酶 DraⅠ、EcoRⅤ、Pvu Ⅱ和 StuⅠ分别消化白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株高分子量基因组DNA ,消化产物与适配子连接产生 4种消化的DNA库 (DL1、DL2、DL3及DL4) ,并分别以此为模板 ,进行基因步移。用特异引物GSP1与适配子引物AP1进行第 1步PCR扩增 ,然后再以第 1步PCR产物为模板、用内部特异引物GSP2与内部适配子引物AP2进行第 2次PCR扩增。【结果】第 1步PCR结果显示 :在上述 4种消化文库中分别扩增出约 80 6、2 190、2 2 0 6和 3 0 76bp的特异条带 ;第 2步PCR结果与第 1次PCR相类似 ,但各泳道主带扩增效率明显升高。【结论】本实验已成功地获得了白纹伊蚊溴氰菊酯抗性株 CYP6N3上游启动子区核苷酸序列及其 4种限制性内切酶图谱。此外还对基因步移法在昆虫细胞色素P45 0多样性及其参与杀虫剂抗性分子机理研究中的意义进行了讨论。
- 周国理黄炯烈吴瑜王玲
- 关键词:伊蚊属细胞色素P450CYP蚊虫
- 埃及伊蚊血淋巴被动传输后受体蚊对彭亨丝虫易感性的变化被引量:2
- 1990年
- 以感染和未感染有彭亨丝虫微丝蚴的埃及伊蚊不易感株和易感株为供体,将其血淋巴转输入易感株埃及伊蚊,同时胸内接种微丝蚴。转输后第3、第4和第5d观察。结果表明,接受未感染微丝蚴的易感株、接受感染或未感染微丝蚴的不易感株埃及伊蚊血淋巴转输的受体蚊体内微丝蚴黑化率分别为21.2%、31.2%和31.1%。提示供体蚊不论经否做丝蚴感染刺激;其血淋巴转输入受体蚊后的作用相似;而不同易感性蚊株的血淋巴对受体蚊的易感性具有明显不同的作用(P<0.01)。另外,黑化微丝蚴大部分集中于蚊腹部,约为64.3~73.6%;而存活幼虫和微丝蚴几乎全部集中在蚊胸部,达到98.4~99.8%,后者可能与幼虫选择发育部位有关。
- 黄炯烈
- 关键词:埃及伊蚊