黄源芳
- 作品数：5 被引量：18H指数：2
- 供职机构：四川大学华西基础医学与法医学院更多>>
- 发文基金：四川省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人参皂苷Rg1抗新生鼠缺氧缺血性脑损伤后神经元凋亡的研究被引量：12
- 2010年
- 目的人参皂苷Rg1可增强神经元对缺氧缺血应激的耐受能力,在缺氧缺血性脑损伤(hypoxia ischemia brain damage,HIBD)中发挥一定的抗凋亡作用。观察人参皂苷Rg1对新生鼠HIBD后神经元凋亡及神经功能恢复的影响,并探讨其可能机制。方法 10天龄SPF级SD大鼠54只,体重16～22g,随机分为假手术对照组(假手术组,n=6)、HIBD模型组(模型组,n=24)和人参皂苷Rg1组(Rg1组,n=24)。模型组及Rg1组大鼠采用结扎右侧颈总动脉并低氧通气制备HIBD模型;假手术组仅分离右侧颈总动脉,不结扎,不进行低氧通气。Rg1组于术后即刻腹腔内注射0.1mL含人参皂苷Rg1(40mg/kg)的生理盐水,此后每隔24h按相同剂量注射人参皂苷Rg1;模型组和假手术组相同时间点腹腔内注射0.1mL生理盐水。术后观察大鼠一般情况,于术后4、8、24、72h采用Longa评分法行神经行为学评价后,处死大鼠取右侧脑组织,采用Western blot及免疫组织化学染色检测缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor1α,HIF-1α)和活化的半胱天冬氨酸酶3(cleaved caspase3,CC3)蛋白表达;TUNEL法检测原位神经元凋亡情况。结果术后大鼠均存活至实验完成。与假手术组比较,模型组和Rg1组大鼠均出现不同程度的神经行为学异常;两组Longa评分与假手术组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);术后72h时Rg1组与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测显示,各组各时间点均有HIF-1α、CC3蛋白表达;模型组及Rg1组各时间点HIF-1α蛋白表达均较假手术组有明显增加(P<0.05),Rg1组均较同一时间点模型组有明显上调(P<0.05)。模型组各时间点CC3蛋白表达均较假手术组明显增加(P<0.05),Rg1组仅术后4h与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05);Rg1组各时间点均较模型组明显下调(P<0.05)。免疫组织化学染色可见HIF-1α蛋白、CC3蛋白定位主要集中在胞核及胞浆,各组各时间点蛋白表达强度与Western blot观察�
- 王德健黄源芳李巧云徐世军刘小康
- 关键词：缺氧缺血性脑损伤神经元凋亡人参皂苷RG1缺氧诱导因子1Α
- 焦磷酸测序检测产ESBLs革兰阴性菌的SHV基因型被引量：2
- 2012年
- 目的探讨一种快速、准确检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)革兰阴性菌的ESBLs基因分型方法。方法双纸片法确定产ESBLs的临床分离菌,聚合酶链反应(PCR)扩增ESBLs的SHV基因片段,用焦磷酸测序技术对29株成都市区临床分离的产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌进行SHV基因分型研究,检测SHV基因片段中编码35位氨基酸和编码43位氨基酸位点的基因多态性。同时,采用纸片扩散法进行药物敏感性试验。结果焦磷酸测序发现,本地区分离出的29株产ESBLs临床分离菌有21株扩增出SHV基因片段,且在43位氨基酸密码子均没有多态性,35位密码子有基因多态性,核苷酸由T突变为A,亮氨酸变为谷氨酰胺,突变发生率达到42.9%(9/21)。29株产ESBLs的菌株对亚胺培南全部敏感;对头孢西丁、头孢吡肟、头孢他啶耐药率分别为:大肠埃希菌29.4%、11.8%、41.2%;肺炎克雷伯菌50.0%、8.3%、33.3%;对氨苄西林、哌拉西林、头孢唑啉、头孢呋辛和复方磺胺甲口恶唑的耐药性较高,均达到75%以上,对其他药物均有不同程度的耐药性。结论焦磷酸测序技术可快速对临床分离菌产生的ESBLs耐药基因分型,具有准确、快速、实时和高通量等优点。
- 黄源芳宋晓红尹亚非扎拉嘎白乙拉姬小丽刘小康
- 关键词：焦磷酸测序
- 焦磷酸测序检测铜绿假单胞菌的SHV基因点突变
- 2012年
- 目的:通过焦磷酸测序技术检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)铜绿假单胞菌的SHV基因点突变,探讨一种快速、准确的ESBLs基因分型方法。方法:双纸片法确定产ESBLs的铜绿假单胞菌,纸片扩散法(K-B法)进行药敏试验,聚合酶链反应(PCR)法扩增ESBLs的SHV基因片段,用焦磷酸测序法检测16株产ESBLs铜绿假单胞菌的SHV基因35位和43位密码子点突变。结果:焦磷酸测序发现,本地区分离出的16株产ESBLs铜绿假单胞菌有10株扩增出SHV基因片段,且在43位密码子基因没有突变,35位密码子有基因突变,核苷酸由T突变为A,亮氨酸变为谷氨酰胺,突变发生率达到70%(7/10)。16株产ESBLs的菌株对亚胺培南全部敏感。结论:焦磷酸测序技术可快速检测产ESBLs铜绿假单胞菌的SHV基因点突变,具有准确、快速、实时和高通量等优点,可应用于产ESBLs菌株的ESBLs基因分型。
- 黄源芳宋晓红尹亚非扎拉嘎白乙拉姬小丽刘小康
- 关键词：焦磷酸测序铜绿假单胞菌ESBLS点突变
- 产ESBLs革兰阴性菌的TEM、SHV、CTX-M基因分型研究被引量：4
- 2011年
- 目的:检测本院临床产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)革兰阴性菌的TEM、SHV、CTX-M基因型特征。方法:双纸片法确定产ESBLs的临床分离菌,提取质粒DNA,PCR法扩增ESBLs的TEM、SHV、CTX-M基因片段,对临床分离的12株肺炎克雷伯菌,17株大肠埃希氏菌和16株铜绿假单胞菌,共45株革兰阴性菌进行TEM、SHV、CTX-M基因分型研究。结果:本院临床分离出的45株产ESBLs临床分离菌的质粒中,有36株扩增出TEM基因片段,33株扩增出SHV基因片段,31株扩增出CTX-M基因片段,TEM、SHV、CTX-M基因片段的检出率分别为80%、74%和68%。结论:TEM、SHV、CTX-M已成为本院临床分离产ESBLs菌的主要耐药基因型,有必要进一步加强临床耐药基因的监测,为临床用药和医院感染监控提供参考。
- 宋晓红尹亚非黄源芳刘小康
- 关键词：超广谱Β-内酰胺酶基因分型
- 肝靶向药物EVk在大鼠组织中的分布研究
- 2011年
- 目的研究合成表阿霉素与Vk3的偶联物(EVk)的组织分布情况。方法经同位素示踪法和HPLC法观察EVk在动物组织中的分布。结果同位素示踪法中,肝脏有一过性浓集现像,但未见特异性高药物浓度分布。结合HPLC检测到保留时间1.9、5.1 min处有两个较高的未知吸收峰,推测未知吸收峰应为EVk的肝代谢产物,肝组织较其他组织有较高的代谢物浓度。结论 EVk原药在肝脏及其他组织中的分布浓度低,但其代谢产物浓度较高,可能通过快速肝代谢进而通过代谢物在肝脏发挥靶向治疗作用。
- 鲁兰黄源芳贾乾斌邓勇金磊刘小康
- 关键词：肝靶向药物代谢产物
