黄勇
- 作品数：7 被引量：4H指数：1
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程更多>>
- RRLC/Q-TOF-MS分析烧伤患者尿液的代谢产物
- 目的:应用质谱技术对中、重度烧伤患者烧伤早期与健康人的尿液代谢物的比较,寻找特异性的代谢产物,用于烧伤病人的病情诊断和治疗。方法:收集不同程度烧伤患者和健康人的尿样,应用RRLC/Q-TOF-MS技术获取大量烧伤病人和健...
- 贺伟峰马理王颖黄勇谭江玲崔艳艳杨思思姚志慧罗高兴吴军
- 树突状表皮T淋巴细胞在小鼠皮肤移植免疫排斥反应中的作用及机制
- 2015年
- 目的探讨树突状表皮T淋巴细胞（DETC）在小鼠皮肤移植免疫排斥反应中的作用及其相天机制。方法（1）取1只野生型C57BL／6雄性小鼠背部全层皮肤，分离表皮细胞，流式细胞仪检测DETC表达情况及细胞表型。另取1只野生型C57BL／6雄性小鼠背部全层皮肤，分离表皮，免疫荧光技术观察DETC形态学特征。（2）分别取4只绿色荧光蛋白（GFP）标记C57BL／6雄性小鼠、7只野生型C57BL／6雌性小鼠（野生型组）以及7只γδ8T淋巴细胞6基因敲除C57BL／6雌性小鼠（基因敲除组）。剪去野生型组与基因敲除组小鼠背部1．4cm×1．4cm大小全层皮肤，移植GFP标记C57BL／6雄悱小鼠背部1．2cm×1．2cm大小全层皮肤，通过小动物活体成像仪及肉眼观察，判定并记录移植皮片存活时间。（3）取2只野生型C57BL／6雄性小鼠，分离表皮细胞，加入48孔板，按随机数字表法分为激活组和对照组，每组4孔。激活组加入2g／mL刀豆蛋白A10μL，对照组加入等量PBS，处理24h后用流式细胞仪枪测DETC表达γ干扰素情况。（4）取4只GFP标记C57BL／6雄性小鼠（供体）；取14只野生型C57BL／6雌性小鼠（受体），按随机数字表法分为γ干扰素中和组和对照组，每组7只。按（2）中方法构建皮肤移植模型，术前和术后72h，γ干扰素中和组小鼠腹腔注射1mg／mLγ干扰素中和抗体200μL，对照组注射等量生理盐水，同（2）中方法观察并记录移植皮片存活时间，并将γ干扰素中和组与（2）中基因敲除组移植皮片存活时间进行比较。对皮片生存曲线进行Log-rank（Mantel-Cox）检验。结果（1）小鼠皮肤表皮细胞内DETC阳性表达率为7．27％，且DETC均为CD3^＋表型细胞。DETC呈树突状散在分布于小鼠皮肤表皮中。（2）基因敲除组小鼠移植皮片存活时间为22～35d，较野生型组的12～16d明显延长（χ^2=14．10，P〈0．001），（3）激活组DE
- 黄华燕荣帅刘美希周俊峄谭江琳张晓容胡晓红黄勇贺伟峰吴军罗高兴
- 关键词：干扰素Γ移植免疫学
- 高效液相色谱-质谱法在筛选胆管癌肿瘤标志物中的应用被引量：2
- 2011年
- 目的应用蛋白质组学技术筛选人胆汁中与胆管癌相关的蛋白质分子。方法收集2008年3月至2009年10月重庆医科大学附属第一医院肝胆外科经明确病理诊断的胆管癌住院患者的胆汁共15例,正常人胆汁5例。应用非离子型脱脂剂结合分子筛超滤方法制备纯化胆汁样本,通过高效液相色谱-质谱法(HPLC-CHIP-MS/MS)鉴定差异表达的蛋白质,并用Spectrum Mill software对检测结果进行分析。结果与正常人胆汁比较,在胆管癌患者胆汁中,检测到109个高可信蛋白,其中12个为新增蛋白质,其功能主要涉及癌细胞的发生、增殖、分化、转移等。结论高效液相色谱-质谱法鉴定的12个差异表达蛋白质可能成为研究胆管癌的生物学分子标志物。
- 张磊杨闯王颖黄勇王济明吴军
- 关键词：胆管癌胆汁分子标志物
- 尿蛋白电泳分析和质谱鉴定被引量：1
- 2016年
- 目的探究尿蛋白的最佳沉淀方法 ,且对常规损失蛋白进行鉴定分析。方法采用有机溶剂沉淀法,即用三氯乙酸/90%丙酮法、三氯乙酸/100%丙酮法和90%丙酮法分别沉淀尿液中蛋白质,对90%丙酮法所得到沉淀的可溶部分和不溶部分进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺分离和质谱鉴定。结果 90%丙酮沉淀法获得的尿蛋白量相对较高。将90%丙酮法沉淀的尿蛋白不溶部分和可溶部分进行质谱鉴定,可溶部分得到53种蛋白,不溶部分得到49种蛋白,且不溶部分特有的蛋白包括免疫球蛋白κ轻链基因1-5、谷氨酰氨肽酶、突变体1、芳基硫酸酯酶A前体等14种。结论尿液沉淀的不溶部分中特有蛋白的发现有助于尿液蛋白质组的全谱研究,对临床特异蛋白的检测具有重要意义。
- 王颖黄勇张小容罗高兴贺伟峰吴军
- 关键词：蛋白质组学质谱分析法
- 皮肤组织蛋白的质谱分析
- 目的:通过对皮肤组织的蛋白质组学研究,建立成人正常皮肤蛋白图谱,为进一步研究烧伤瘢痕形成机制等奠定基础。方法:利用蛋白酶法消化分离皮肤表皮和真皮,液氮研磨法提取表皮、真皮及全皮组织总蛋白.采用SDS-PAGE分离提取蛋白...
- 贺伟峰马理黄勇王颖谭江玲詹日兴崔艳艳杨思思孙薇姚志慧罗高兴吴军
- 关键词：皮肤组织SDS-PAGE蛋白质组学质谱技术
- 皮肤组织蛋白的质谱分析
- 目的 通过对皮肤组织的蛋白质组学研究，建立成人正常皮肤蛋白图谱，为进一步研究烧伤瘢痕形成机制等奠定基础。方法 利用蛋白酶法消化分离皮肤表皮和真皮，液氮研磨法提取表皮、真皮及全皮组织总蛋白。采用SDS-PAGE分离提取蛋白...
- 马理姚志慧罗高兴吴军黄勇王颖贺伟峰谭江玲詹日兴崔艳艳杨思思孙薇
- 关键词：皮肤组织SDS-PAGE蛋白质组学质谱技术
- 文献传递
- 真核起始因子(eIF6)对M2型巨噬细胞炎性介质表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨真核细胞起始因子(e IF6)基因对M2型巨噬细胞纤维化相关因子分泌及重要蛋白酶表达的影响。方法采用e IF6野生型(e IF6+/+)及敲降型(e IF6+/-)C57BL/6雄性小鼠,腹腔灌洗获得巨噬细胞,通过白介素4(IL-4)诱导形成M2型巨噬细胞。应用基因芯片比较e IF6+/+与e IF6+/-小鼠M2型巨噬细胞基因表达谱的差异,并通过RT-PCR及ELISA对芯片检测结果进行验证。结果基因芯片检测结果显示,与e IF6+/-小鼠组比,e IF6+/+小鼠M2型巨噬细胞中血管内皮生长因子(VEGF)及金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)基因表达显著下调,基质金属蛋白酶2(MMP-2)基因表达显著上调。RT-PCR及ELISA检测结果显示,与e IF6+/-小鼠相比,e IF6+/+小鼠M2型巨噬细胞中VEGF、TIMP-2 m RNA及蛋白表达水平明显下降(P<0.05),而MMP-2 m RNA及蛋白表达水平明显上升(P<0.05)。结论 e IF6可能通过抑制VEGF生成而防止血管及肉芽组织过度增生,同时通过调节MMP-2/TIMP-2的比例以平衡细胞外基质的降解与沉积,从而缓解瘢痕形成。
- 文帅胡晓红张小容黄勇贺伟峰罗高兴吴军
- 关键词：巨噬细胞纤维化
