鲍建芳 作品数:38 被引量:220 H指数:9 供职机构: 浙江大学 更多>> 发文基金: 浙江省自然科学基金 国家自然科学基金 浙江省医药卫生科学研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 文化科学 更多>>
抗体芯片应用于真菌毒素多重检测的综合性实验设计 2023年 为践行科教协同育人理念,在病原生物学与免疫学实验教学环节,该文设计了抗体芯片应用于真菌毒素多重检测的综合性实验。基于竞争反应模式,通过设计抗体芯片布局和配套装置,同时制备真菌毒素完全抗原辣根过氧化物酶标物,经优化相关反应条件,最终建立了可实现真菌毒素多重检测的抗体芯片技术。结果显示,该方法可实现对4种真菌毒素的同时定量检测,灵敏度高、稳定性好。此综合性实验将病原微生物中真菌毒素的防控需求与免疫检测技术研究热点相结合,可在加深学生对课堂知识理解和掌握的同时,提升学习的全面性和系统性。与传统验证性实验相比,融入科研成果的综合性实验的开展,将巩固学生理论知识和实验操作技能,培养和激发其创新思维和科研热情,助力综合素质提升。 章先 王继璇 丁伟勇 鲍建芳 李肖梁关键词:抗体芯片 真菌毒素 实验教学 半胱氨酰白三烯受体2多克隆抗体制备及其鉴定 被引量:6 2009年 目的:制备半胱氨酰白三烯受体2(CysLT2)多克隆抗体,并鉴定其免疫学特性及应用。方法:以KLH偶联的CysLT2受体多肽免疫家兔制备抗体,用间接ELISA法测定抗体效价,以抗原阻断法测定抗体敏感性及特异性;同时,以新制备的抗体进行Western blot和免疫组化,检测CysLT2受体的组织表达。结果:ELISA测定显示,获得的家兔抗CysLT2受体抗体的效价大于1/1 047 296,对CysLT2受体的特异性强,对CysLT1受体和GPR17基本无交叉反应。Western blot结果显示,CysLT2受体在大鼠、小鼠肾、脑和肺中有较高的表达,其分子量在40 kD左右。免疫组化结果表明,CysLT2受体主要表达在大鼠神经元,也表达在部分星形胶质细胞。结论:制备的CysLT2受体多克隆抗体具有高效价和高特异性,能满足Western blot和免疫组化检测的要求。 陈丽萍 赵春贞 史文珍 戚玲玲 卢韵碧 张咏梅 张丽慧 方三华 鲍建芳 沈建根 魏尔清关键词:受体 半胱氨酰白三烯受体 多克隆抗体 乌梢蛇水解液中胶原物质的初步研究 被引量:1 2002年 沈杰 张之澧 倪立青 鲍建芳关键词:中药 鼠白细胞介素-12双亚基共表达质粒的构建及在体内外的表达 被引量:8 2002年 目的 :构建双亚基共表达鼠白细胞介素 - 12 (m IL- 12 )真核表达质粒 ,并观察其在体内外的表达。方法 :将m IL - 12 p35和 p4 0全长编码 c DNA构建在 pc DN A 3.1载体上 ,然后把 p35表达单元 (CMV- p35 - BGH PA)插入pc DNA 3.1/ p4 0载体 ,使两个目的基因均受各自的启动子 CMV控制 ,构建成 m IL - 12双亚基共表达质粒 p Cm IL -12 ,并进行体内外表达。结果 :p Cm IL - 12在体外转染 COS- 7细胞后 ,经 EL ISA证实有 m IL- 12表达 ,其表达上清能在体外明显增强小鼠 NK细胞活性。小鼠皮内注射 p Cm IL - 12亦能增强小鼠 NK细胞活性。结论 :所构建的质粒在体内外均能表达有生物学活性的 m IL- 陈玮 邵传森 沈建根 鲍建芳 潘建平 韩伟 寿林 项哨 郑树关键词:白细胞介素-12 MIL-12 天然杀伤细胞 分子克隆 幽门螺杆菌感染致胃上皮8-羟-2-脱氧鸟苷增加 被引量:2 2003年 沈建根 张松照 王建 朱永良 鲍建芳关键词:幽门螺杆菌 胃上皮 DNA损伤 胃癌 炎症反应 紫贻贝粗多糖提取物对小鼠免疫相关因子的影响 被引量:8 2011年 目的研究紫贻贝多糖对免疫力低下小鼠的免疫相关因子的影响。方法 30只6~8周龄,体重20 g左右,雌雄随机的ICR小鼠,分成正常对照(Control)、环磷酰胺(CTX)处理的免疫抑制(CTX)、高、中、低不同剂量紫贻贝粗多糖提取物(H-MEP、M-MEP、L-MEP)5组,每组6只。H-MEP、M-MEP、L-MEP三组每天分别腹腔注射0.1 ml 16、8和2的紫贻贝粗多糖提取物1w后,与CTX组一起腹腔注射CTX,再注射相应浓度的紫贻贝粗多糖提取物5d后处死小鼠,测定小鼠脾脏NK细胞的杀伤力,小鼠腹腔巨噬细胞产生的NO量以及血清中IL-2、IL-4、IFN-γ、TNF-α的含量。结果 H-MEP、M-MEP、L-MEP组小鼠NK细胞的杀伤力显著强于CTX组(P﹤0.05),H-MEP、M-MEP组甚至超过正常对照组(P﹤0.05);H-MEP、M-MEP组小鼠腹腔巨噬细胞产生的NO量明显超过CTX组(P<0.01),H-MEP组还显著超过正常对照组;高、中剂量多糖提取物组小鼠血清中IL-2显著高于CTX组,而IL-4与CTX组和正常对照组无差异;M-MEP组小鼠中血清IFN-γ显著高于免疫抑制组,H-MEP组TNF-α的含量显著高于免疫抑制组(P﹤0.05),与正常对照组,也明显增强(P﹤0.05)。结论紫贻贝多糖能上调免疫抑制小鼠的Th1细胞功能,纠正CTX引起的免疫抑制状态下的Th1向Th2形成的漂移,增强细胞免疫功能。 张旭 费红军 杨立峰 鲍建芳 李铎关键词:环磷酰胺 免疫因子 糖萜素对小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮的影响 被引量:5 2002年 目的 :探讨糖萜素对小鼠腹腔巨噬细胞产生NO的影响。方法 :在饲料中添加不同剂量糖萜素喂养NIH小鼠 ,以基础饲料为对照 ,检测环磷酰胺免疫抑制组与非抑制组不同时间段小鼠腹腔巨噬细胞产生NO的含量。结果 :含糖萜素饲料组于不同时间测得NO含量均较基础饲料组显著增高 (P <0 .0 5 )。免疫抑制状态下 ,含糖萜素饲料组NO含量也较基础饲料组高(P <0 .0 5 )。体外糖萜素不能直接影响NO的生成。结论 :糖萜素能显著提高小鼠体内巨噬细胞产生NO。 沈建根 鲍建芳 邵传森 詹勇关键词:糖萜素 小鼠 腹腔 巨噬细胞 一氧化氮 IL-12联合小剂量IL-2对人外周血单个核细胞增殖及杀瘤活性的影响 1999年 目的:探讨IL-12与IL-2 的最佳剂量配伍,以充分发挥两种细胞因子的抗肿瘤作用,从而减少使用剂量和降低毒副作用。方法:静止的或用小剂量IL-2 激活的人外周血单个核细胞(PBMC),以含不同浓度IL-12 和(或)IL-2 的培养液培养后,分别用3H-TdR掺入法和LDH释放法测定PBMC的增殖作用及杀瘤活性。结果:①5~50 IU/m lIL-12 单独不能诱导PBMC增殖,但能与小剂量(10 IU/m l)IL-2 协同而促进PBMC的增殖,且能延长增殖作用时间。②经IL-12 作用后,PBMC对NK敏感的K562细胞及NK抵抗的Raji细胞均产生明显的杀伤活性。激活的PBMC经IL-12 和IL-2 各10 IU/m l联合培养后,对K562 细胞和Raji细胞的杀伤率达最大值,分别为72.0±4.2% 和65.4±5.8% ,显示出明显的协同作用。结论:人PBMC在体外经10 IU/m lIL-2激活后,再加入IL-12 和IL-2各10 IU/m l共同刺激。 夏大静 鲍建芳 沈建根 邵传森关键词:药物协同作用 乌梢蛇Ⅱ型胶原对关节炎大鼠免疫功能的影响 被引量:2 2008年 目的研究乌梢蛇Ⅱ型胶原对关节炎大鼠的免疫调节作用,以了解乌梢蛇治疗类风湿关节炎(RA)的机制。方法关节炎大鼠随机分成3组,即乌梢蛇Ⅱ型胶原组、牛Ⅱ型胶原组和关节炎对照组,另设健康对照组,每组7只,乌梢蛇Ⅱ型胶原组和牛Ⅱ型胶原组分别灌胃乌梢蛇Ⅱ型胶溶液1ml(Ⅱ型胶原15mg/kg)和牛Ⅱ型胶溶液1ml(Ⅱ型胶原15mg/kg),另两组灌胃不含胶原的胶原稀释液1ml,每日1次,连续15d后,取大鼠外周血测抗Ⅱ型胶原抗体、淋巴细胞亚群、肿瘤坏死因子(TNF)-01、白细胞介素(IL)-10、IL-1和IL-4水平。结果关节炎对照组:抗Ⅱ型胶原抗体、TNF-α水平和CD4^+T/CD8^+比值与健康对照组相比明显升高(P〈0.05),IL-10水平明显下降(P〈0.01);乌梢蛇Ⅱ型胶原组和牛Ⅱ型胶原组:TNF-α水平和CD4^+T/CD8^+比值与关节炎对照组相比明显下降(P〈0.05),与健康对照组比较差异无统计学意义(P〉0.05),抗Ⅱ型胶原抗体滴度较关节炎对照组下降(P〈0.05),与健康对照组差异有统计学意义(P〈0.01),IL-10水平较关节炎对照组升高(P〈0.01),与健康对照组差异有统计学意义(P〈0.05),口服Ⅱ型胶原两组间各项免疫指标比较差异均无统计学意义(P〈0.05);外周血IL-1和IL-4水平,4组差异无统计学意义(P〉0.05)。结论乌梢蛇Ⅱ型胶原与牛Ⅱ型胶原具有相同的免疫调节作用,两者能减低关节炎大鼠外周血TNF-α水平、抗Ⅱ型胶原抗体滴度和CD4^+T/CD8^+比值,提高IL^-10水平的作用,推测乌梢蛇Ⅱ型胶原可能是乌梢蛇治疗RA的活性药理成分。 沈杰 鲍建芳 何东仪 张之澧 倪立青关键词:关节炎 类风湿 乌梢蛇 抗淋球菌单克隆抗体的制备及其生物学特性研究 被引量:1 1999年 目的:研制抗淋球菌单克隆抗体,为建立新的淋病诊断方法奠定基础。方法:以淋球菌29106-5株作抗原,按常规淋巴细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体。并采用ELISA双抗体夹心法研究单抗的特异性和敏感性。结果:建立了5个持续分泌抗淋球菌单抗的杂交瘤细胞株。他们所分泌的抗体效价可达1∶8192~1∶32786。5株单抗均能与淋球菌发生特异性结合,但对脑膜炎球菌、葡萄球菌、大肠杆菌等15种其他微生物不起反应。淋球菌的最小检测量为1×104个/ml。 沈建根 鲍建芳 邵传森 董玉娥关键词:生物学特性 淋病