高志勇
- 作品数：143 被引量：1,078H指数：19
- 供职机构：北京市疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金首都卫生发展科研专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- 应用TaqMan实时荧光-聚合酶链反应方法快速检测粪便标本空肠弯曲菌的研究被引量：1
- 2009年
- 目的建立空肠弯曲菌TaqMan实时荧光-PCR方法,用于粪便标本的直接检测。方法根据空肠弯曲菌特异性基因hipO和mapA分别设计引物和探针,在对2组引物和探针进行灵敏度、特异性和重复性评价的基础上,对45例临床腹泻患者粪便标本提取DNA之后,荧光PCR检测,同时进行分离培养。结果两组引物和探针能准确检测空肠弯曲菌菌株2株,检测限可达到10～20 cfu/ml,并与其他肠道致病菌无交叉反应。检测45份腹泻病例粪便标本,该方法检测到3份为阳性,同时进行的传统培养方法仅从该3份标本中的两份中分离到空肠弯曲菌。结论本研究建立的TaqMan荧光PCR检测粪便标本中所携带的空肠弯曲菌灵敏度高,特异性好,能够提高粪便中空肠弯曲菌的阳性检出率和缩短检测时限。
- 曲梅黄芳刘园窦相峰刘桂荣严寒秋高志勇王全意
- 关键词：空肠弯曲菌实时荧光PCR
- 北京市肠道门诊腹泻患者人杯状病毒感染调查被引量：10
- 2012年
- 目的调查北京地区肠道门诊就诊腹泻患者人杯状病毒的感染情况。方法收集北京市2011年4月至2012年3月丰台、昌平、怀柔3个区县的肠道门诊就诊腹泻患者450例，采集患者粪便标本，使用逆转录聚合酶链反应法（RT—PCR）对粪便标本进行人杯状病毒RNA检测，对RT—PCR阳性标本的PCR产物进行克隆测序。结果450例患者标本中68例人杯状病毒阳性（68／450，15．11％）。选择其中18例PCR产物进行克隆测序，将获得的序列进行比对分析、构建系统发生树，结果表明，15株为诺如病毒，3株为扎如病毒。其中诺如病毒GII／4型11株（11／18，61．11％），GII／7型1株（1／18，5．56％），G1I组未定型3株（3／18，16．67％）。结论人杯状病毒足北京地区肠道门诊就诊腹泻患者的重要病原，主要流行株为诺如病毒G1I／4型。
- 邓瑛高志勇严寒秋李锡太李伟红李洁贾蕾王全意
- 关键词：肠道门诊腹泻人杯状病毒基因型
- 非血缘关系骨髓及外周造血干细胞移植的比较被引量：6
- 2006年
- 目的比较非血缘关系骨髓（UBMT）及外周造血干细胞移植（UPBSCT）在移植疗效方面的差异。方法63例患者分为UBMT组30例，UPBSCT组33例。两组均采用本所的加强方案预防移植物抗宿主病（GVHD）的发生。所有患者在预处理阶段都应用了抗T细胞免疫球蛋白（ATG）或CD，单抗，但UPBSCT组以兔源性的ATG为主（21／33），而UBMT组以猪源性的ATG为主（17／25，P=0．02）。结果UBMT和UPBSCT组分别有28／30例和32／33例患者达到完全稳定的供者植入，UBMT组输入单个核细胞中位数（2．80×10^8／kg）少于UPBSCT组（6．16×10^8／kg，P〈0．05），WBC和PLT的中位植活时间长于UPBSCT组（17d比11d；27．5d比14d，P〈0．01）。两组≥Ⅱ度急性GVHD的累积发生率分别为66．7％和33．0％；其中Ⅲ-Ⅳ度为34．5％和7．3％（P〈0．05）。在对两组ATG的来源进行分层分析后发现急性GVHD的发生率没有统计差异。两组慢性GVHD的发生率分别为63．6％（14／22）、72．0％（18／25），其中广泛型分别为7例和5例，差异无统计学意义（P〉0．05）。UBMT和UPBSCT组巨细胞病毒（CMV）血症和CMV疾病的发生率分别为60．0％（18／30）、43．3％（13／30）；60．6％（20／33）、15．1％（5／33）。截至2005年6月，UBMT复发4例，死亡15例，总体生存率（OS）为47．22％，UPBSCT组复发6例，死亡8例，OS为62．45％。1年的总生存率分别为53．13％、78．06％（P=0．05），总的移植相关病死率分别为51．52％、19．68％（P=0．06）。结论UPBSCT同骨髓移植相比，造血重建快，并不增加急性GYHD的发生，两组生存率相近。
- 陈育红黄晓军许兰平刘代红陈欢张耀臣韩伟高志勇吴彤张晓辉陆道培
- 关键词：造血干细胞移植移植物抗宿主病巨细胞病毒感染
- 细菌性痢疾诊断符合率初步研究被引量：16
- 2009年
- 目的判断临床诊断细菌性痢疾患者和实际志贺菌感染的符合率,探索影响符合率的因素。方法采用整群抽样的方法,对部分临床诊断为细菌性痢疾的病例进行问卷调查并留取便标本进行志贺菌培养。结果临床诊断为细菌性痢疾的患者,仅有18.3%培养出志贺菌。便培养阳性的患者,便常规红细胞数较多,有更加明显的流行病学史和临床特征。结论临床诊断的细菌性痢疾患者中,病原学诊断符合率较低,故对患者的治疗应结合具体临床表现实施。
- 贾蕾刘园刘桂荣黄芳高志勇吴晓娜窦相峰
- 关键词：细菌性痢疾符合率
- 成年人腹泻患者中A组轮状病毒的流行概况及暴发疫情
- 田祎高志勇王全意
- 应用2种RT-PCR方法检测和分析北京市市场销售牡蛎中诺如病毒基因特征被引量：3
- 2022年
- 目的应用实时荧光RT-PCR和半巢式RT-PCR方法检测和分析牡蛎中诺如病毒的基因特征。方法应用实时荧光RT-PCR和半巢式RT-PCR方法,对2014年11月至2015年10月北京市采集的新鲜市售牡蛎进行诺如病毒GⅠ/GⅡ组并联试验检测,分析检出率,应用符合率和一致性检验(Kappa值)对半巢式RT-PCR方法进行可靠性评价,应用半巢式RT-PCR方法扩增诺如病毒GⅠ/GⅡ衣壳蛋白区基因,对阳性产物进行测序。采用BioEdit 7.0.9.0软件进行序列比对、Mega 6.0软件构建进化树。结果72份样品中,实时荧光RT-PCR、半巢式RT-PCR和并联试验的诺如病毒检出率分别为31.94%(23/72)、38.89%(28/72)和48.61%(35/72)。2种方法符合率为73.61%,中度一致(Kappa值=0.43)。测序成功13株诺如病毒,11株(7株GⅡ.17、2株GⅡ.4 Sydney_2012、1株GⅡ.1和1株GⅡ.21基因型)为2种RT-PCR方法检测诺如病毒阳性样本所得;2株(GⅡ.17和GⅡ.3基因型各1株)为半巢式RT-PCR方法检测诺如病毒阳性样本、实时荧光RT-PCR方法检测诺如病毒阴性样本所得。这些毒株与腹泻患者、环境污水和贝类水产品参考株的相似性为84.4%~100.0%。结论用2种RT-PCR并联法检测牡蛎中诺如病毒,不仅能提高检出率还能获得更多基因型;牡蛎中诺如病毒毒株与人源、环境污水及贝类水产品参考毒株高度同源,应对经常接触牡蛎的人群及相关环境进行诺如病毒监测和防控。
- 严寒秋王永全崔海洋靳博高志勇王全意
- 关键词：诺如病毒基因特征牡蛎
- 酶联免疫吸附试验与实时荧光聚合酶链反应对A组轮状病毒的检测效果比较
- 2023年
- 目的比较酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)与实时荧光聚合酶链反应(real-time fluorescent polymerase chain reaction,实时荧光PCR)对A组轮状病毒的检测效果,为后续试验提供参考。方法收集2015—2020年北京市某医院肠道门诊5岁以下腹泻儿童粪便样本,使用ELISA和实时荧光PCR两种方法检测A组轮状病毒,采用GP基因分型方法检测ELISA和实时荧光PCR检测阳性的样本。使用SPSS 20.0软件进行Kappa和Spearman统计分析。结果2015—2020年共采集1412份粪便样本,其中155份ELISA检测阳性,166份实时荧光PCR检测阳性。对实时荧光PCR和ELISA两种方法的检测结果进行Kappa检验,Kappa=0.954>0.75,说明这两种诊断方法检测一致性良好。ELISA法的吸光度A值呈偏态分布,实时荧光PCR法的Ct值类似正态分布,Spearman相关系数r=0.088,P=0.278,Ct值和吸光度A值无相关性。有13份标本两种方法检测结果不一致,仅有1份为ELSIA阳性、实时荧光PCR阴性,12份均为ELSIA阴性、实时荧光PCR阳性,其中,10份有GP分型结果,4份为G2[P4],4份为G9[P8],1份为混合感染G2/9[P4],1份为未分型。结论两种诊断方法定性诊断的一致性良好,但ELISA吸光度A值和实时荧光PCR Ct值无相关性,不能通过任何一种方法结果数值来推断另一种方法的结果数值。基因分型结果提示ELISA阴性、实时荧光PCR阳性的样本可能与G2[P4]型别的毒株与检测抗体的匹配度不是很高有关。
- 甄博珺田祎邹林高翔张萍张靖张扬郭晓晨高志勇
- 关键词：A组轮状病毒实时荧光PCR
- 2013-2015年北京市其他感染性腹泻病例流行病学特征分析被引量：25
- 2016年
- 目的分析2013-2015年北京市其他感染性腹泻病例流行特征,为预防措施的调整提供依据。方法病例信息来源于＂中国疾病预防控制信息系统＂,统计其中发病时间为2013-2015年北京市其他感染性腹泻病例信息,分析其他感染性腹泻的流行概况及其病原学分布等流行特征。结果 2013-2015年,其他感染性腹泻的发病数和发病率均呈逐年下降趋势。2013年和2014年,其他感染性腹泻存在夏季高峰（6-8月）和冬季高峰（11月）。高发人群集中在5岁以下儿童和20~39岁青壮年。男性发病数高于女性。散居儿童发病数最多,分别占每年发病总数的40.57%、40.00%和40.50%。不同年龄段不同性别人群每年其他感染性腹泻病例发病构成比比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。实验室确诊病例中,轮状病毒感染比例最高,三年分别占实验室确诊病例的51.04%、49.53%和49.48%。结论北京市其他感染性腹泻的高危人群为5岁以下散居儿童,实验室诊断报告率亟待提高。
- 田祎贾蕾高志勇霍达钱海坤王全意
- 关键词：其他感染性腹泻流行病学特征病原学
- 两种PCR方法检测霍乱肠毒素的结果分析被引量：1
- 2009年
- 目的：对两种PCR方法检测霍乱肠毒素（CT）的结果进行分析与比较。方法：利用普通PCR法和TaqMan荧光PCR法对霍乱弧菌的CT进行检测。结果：85株霍乱弧菌普通PCR法检测CT阳性19株,阴性66株;TaqMan荧光PCR法检测CT阳性20株,阴性65株。结论：普通PCR法和TaqMan荧光PCR法检测85株霍乱弧菌CT,只有1株前者阴性而后者阳性,其余84株的结果完全相符;DNA模板制备后普通PCR法检测CT需扩增、电泳和产物分析,4-5 h出结果,其过程繁琐;TaqMan荧光PCR法检测CT其操作方便简单,实现一管封闭反应,无需PCR后处理,结果直观,避免人为判断,1.5 h出结果,是一种更灵敏、准确和安全的CT快速检测法。
- 严寒秋黄芳曲梅高志勇刘园刘桂荣李洁
- 关键词：霍乱肠毒素TAQMAN
- 牡蛎中诺如病毒检测的前处理方法比较及应用被引量：9
- 2015年
- 目的 对牡蛎中诺如病毒检测的三种前处理方法进行比较并探讨应用策略.方法 2014年8月-2015年3月采集160只市售牡蛎,每组5只,共32组样品,取其肠腺组织采用直接处理法（M1）、PEG 8000沉淀法（M2）和蛋白酶K消化-PEG 8000沉淀法（M3）三种方法进行前处理,提取核酸后荧光定量RT-PCR检测诺如病毒核酸.应用串并联法对三种前处理方法的样品阳性率进行分析,利用x2检验比较不同方法的阳性率差异,应用一致性检验比较不同方法的一致性,对荧光RT-PCR所得到的Ct值进行ANOVA检验.结果 M1、M2、M3三种前处理方法诺如病毒阳性率依次为15.63％（5/32）、34.38％ （11/32）和37.50％ （12/32）;M1/M2/M3并联使用的阳性率最高,为50.00％ （16/32）;其次为M2/M3并联法,阳性率为46.88％ （15/32）;M1＋ M3串联或M1＋ M2＋ M3串联的阳性率最低,均为9.38％ （3/32）.M2/M3与M1/M2/M3的阳性率经x2检验比较,差异无统计学意义（P＞0.05）,两种方法经一致性检验,kappa=0.931（P＜0.05）,一致性较高.M1、M2、M3三种方法检测阳性样品的Ct值依次为33.44±0.66、33.70±1.88和33.42±2.44.经ANOVA检验,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 常规监测时推荐使用M2或M3,暴发疫情溯源时可考虑使用M2/M3并联法.
- 严寒秋霍达刘白薇高志勇李伟红杜轶威梁志超杨扬陈丽娟王全意
- 关键词：牡蛎诺如病毒前处理荧光定量RT-PCR
