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排序方式：

利用半定量RT-PCR检测烟碱生物合成的方法被引量：2: 2009年; 将水培65 d的烟株进行打顶处理,测定打顶和不打顶烟株上部叶的烟碱含量。分别提取根中总RNA,利用腐胺-N-甲基转移酶(PMT)基因特异引物进行actin做内参的半定量RT-PCR,分析打顶前后PMT转录水平。结果表明,上部烟叶烟碱含量和腐胺-N-甲基转移酶基因表达量的变化趋势是一致的。; 马雷戚元成刘卫群; 关键词：烟碱

打顶烟草根尖组织抑制性消减cDNA文库的构建及其序列分析被引量：2: 2011年; 【目的】构建烟草打顶后根尖组织的消减文库,寻找调控烟碱生物合成的相关候选基因。【方法】以打顶株为测验子(tester)、以非打顶株为驱赶子(driver),利用抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization,SSH)和反向Northern杂交技术构建和筛选烟草打顶前后根尖组织消减文库,并对差异表达克隆进行生物信息学分析。【结果】构建了具有高消减效率的cDNA文库。PCR验证消减文库阳性克隆的插入片段为200—1 000 bp。经反向Northern杂交,从850个克隆中筛选到560个杂交信号差异明显的克隆,测序后得到273条有效序列。对273个已知功能基因的ESTs进行分类,生物碱合成类占4%、植物激素代谢类占3%、信号转导和转录因子类占18%、胁迫和防御类占32%、蛋白质代谢占9%、碳代谢占6%、其它代谢占15%、功能未知类占13%。RT-PCR结果显示,NTAT84和NTAT71序列在烟株打顶后转录活性均升高。【结论】应用SSH技术构建了烟草打顶前后根尖组织消减cDNA文库。; 戚元成马雷王菲菲刘卫群; 关键词：烟草烟碱

烟草打顶前后根尖组织SSH-cDNA文库的构建与分析: 烟碱是烟草特有的生物碱,是烟草根系合成的次生代谢产物。烟碱自精氨酸或鸟氨酸途径形成吡咯环,自天冬氨酸途径形成嘧啶环,最终两环缩合形成烟碱的生物合成途径已被研究的相当清楚。打顶以后,烟株体内烟碱含量大量积累,然而对造成烟株...; 马雷; 关键词：打顶烟碱合成基因筛选; 文献传递

烟草打顶对腐胺N-甲基转移酶基因表达的影响被引量：6: 2009年; 水培65d的烟株进行打顶后,测定打顶和不打顶烟株上部叶中烟碱含量。分别提取根中总RNA,以腐胺N-甲基转移酶基因(PMT)特异引物、肌动蛋白基因(actin)为内参作半定量RT-PCR分析;同时将提取的总RNA转膜,用地高辛标记PMTRT-PCR产物作探针,进行Northern杂交分析的结果表明,打顶后的上部烟叶中烟碱含量和PMT基因表达量显著增加。; 戚元成马雷王菲菲刘卫群; 关键词：烟草打顶半定量RT-PCR NORTHERN杂交

过量表达腺苷甲硫氨酸合成酶基因能提高转基因烟草中多聚胺的生物合成被引量：4: 2009年; 以土壤农杆菌介导的转化方法将盐地碱蓬的腺苷甲硫氨酸合成酶cDNA(SsSAMS2)转化到烟草K326中。PCR分析的结果表明,SsSAMS2整合进K326的基因组内。共筛选到8个转基因纯合品系,分析其中3个品系(ST8-9、ST14-2、ST3-5)基因表达和多聚胺含量的结果表明,SsSAMS2可在转基因烟草中表达,转基因烟草中的多聚胺含量明显高于野生型烟草。这些结果表明,腺苷甲硫氨酸合成酶基因已在转基因烟草中过量表达并导致多聚胺含量提高。; 戚元成马雷王菲菲刘卫群; 关键词：转基因烟草

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马雷