陈英
- 作品数：25 被引量：65H指数：4
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 基因芯片检测自噬与凋亡的基因表达谱改变被引量：3
- 2004年
- 目的:利用基因芯片研究自噬与凋亡关系,阐明两者间的分子调控机制。方法:采用4096条人类基因的cDNA芯片检测3-MA自噬抑制剂在诱导凋亡的人肝细胞株LO2基因表达谱的改变,以探讨在自噬被抑制的情况下,凋亡的发生及其相关基因的变化。结果:LO2细胞株cisplain凋亡诱导16小时的实验模型中,实验组在诱导凋亡前加入3-MA自噬抑制剂,诱导前后对照组与实验组相比,差异表达基因共151条。其中上调基因74条;下调基因77条。APG5基因无变化。结论:用基因表达芯片对3-MA自噬抑制剂在凋亡诱导的LO2细胞株基因表达谱的改变进行高通量分析,能够有效地观察出凋亡基因及相关基因的表达。自噬被抑制的状态下,凋亡相关基因同样表达,说明3-MA自噬抑制剂并不能阻止凋亡的发生。
- 陈英朴英杰
- 关键词：基因表达谱芯片凋亡自噬
- 大鼠原生殖细胞培养和分化的研究被引量：4
- 2001年
- 研究大鼠胚胎原生殖细胞 (prim ordial germ cells,PGCs)的培养及分化。取受精后 11～ 12 .5天大鼠 PGCs进行原代培养 ,光、电镜观察 PGCs及其分化细胞的微细结构 ,碱性磷酸酶染色检测细胞的分化程度。结果显示大鼠 PGCs大而圆 ,散在分布 ,或多个聚集成团 ,胞质中含有椭圆形的线粒体和丰富的核糖体 ,在鼠胚成纤维细胞饲养层存在的情况下 ,PGCs保持未分化状态 ,碱性磷酸酶反应呈强阳性。在缺乏饲养层的条件下 ,PGCs很快分化 ,形态不规则 ,有伪足 ,碱性磷酸酶反应减弱 ,进一步分化可形成具有细长突起的神经元样细胞、胞质中含有细丝束的表皮细胞、可见节律性跳动的心肌细胞、具有分泌颗粒的分泌细胞及似血管、心脏形状的管腔结构等 ,由 PGCs分化来的细胞碱性磷酸酶反应均呈阴性。结果表明大鼠 PGCs能够分化形成三个胚层的衍生物 ,生殖嵴来源的 PGCs是一种具有发育全能性的胚胎多能干细胞。本研究同时证明鼠胚饲养层能抑制大鼠
- 傅文玉路艳蒙陈英乔东访安连兵朴英杰
- 关键词：原生殖细胞碱性磷酸酶分化细胞培养
- 自噬体与脂褐素相互关系的透射电镜观察
- ＜正＞ 本文采用2月龄（体重130-140克）和18月龄（500～600g）雄性Wistar大鼠各5只,前者为幼年组,后者为老年组。在麻醉状态下取左心室肌组织和肝组织作形态学观察和细胞化学观察。形态学观察标本按电镜超薄切...
- 朴英杰陈英路艳蒙李佩英乔东访傅文玉刘连璞
- 文献传递
- 自噬分子机制的研究动向被引量：6
- 2000年
- 自噬是细胞对自身结构进行蛋白降解的一种方式。为从分子水平揭示细胞内部自噬调控机理 ,需研究该过程的各个环节。新近的研究 ,特别是近几年自噬基因的发现证实 ,蛋白磷酸化参与的自噬调控 ;自噬体膜的形成 ;微管系统传输自噬体以及自噬与凋亡的内在联系 ,都有分子水平的依据 ,这给更深入地研究自噬分子机理提供了重要的信息。
- 陈英彭心昭朴英杰
- 关键词：自噬分子机制细胞生物学
- 自噬基因APG5基因结构的生物信息学分析被引量：3
- 2001年
- 利用生物信息学手段对一种与人类细胞凋亡有关的基因———自噬基因 (Autophagy 5 ,简称APG5 )的基因组全序列进行拼接和基因结构分析 ,同时该基因的一个新的可变性剪切变异体 (APG5 β)被首次证实及报道。利用PCR技术从人胚脑cDNA文库和B细胞cDNA文库中调取APG5基因 ,装入绿色荧光蛋白pEGFP C1表达载体 ,测序确定其核苷酸序列 ,进行数据库搜索。该基因组全序列分散在核酸序列数据库GenBank的几个不同序列条目中。将相关克隆的基因组序列做相似性比对 ,用DOTPLOT方法确定其相互位置关系 ,并进行序列拼接 ,得到全长基因。利用GenScan、Genefinder等基因识别软件确定其内含子、外显子、转录起始位点、加尾信号等 ,分析其基因结构 ,在此基础上进一步分析其cDNA中外显子数目和排列顺序 ,证实了从B细胞cDNA文库中克隆所得的APG5为一种可变性剪切变异体。利用生物信息学工具 ,成功地拼接出全长为 1 5 0kb人类APG5基因基因组全序列 ,确定其有 8个外显子。根据剪切位点的特性找出其在序列中的位置 ,分别计算出内含子、外显子的长度 ,首次证实并报道APG5 β是第 3外显子缺失的可变性剪切变异体。将验证确实的APG5 β转染至人肝细胞株和HeLa细胞株 ,在共聚焦激光显微镜下可观察到其在细胞凋亡时的特异表达。
- 陈英彭心昭朴英杰
- 关键词：生物信息学基因结构自噬基因凋亡
- 肝癌细胞自噬性凋亡过程中caspase-3基因的克隆与鉴定被引量：3
- 2006年
- 目的从长春新碱诱导发生自噬性凋亡的肝癌细胞系HepG2中克隆caspase-3基因。方法提取细胞总RNA,采用RT-PCR技术扩增目的片段,构建重组克隆载体,测序鉴定及分析。结果经RT-PCR获得了预期的扩增产物即caspase-3基因625bp的核苷酸片段,其测序结果与文献报道一致。结论初步证明该caspase-3基因片段参与了长春新碱诱导的HepG2细胞自噬性凋亡过程。
- 彭心昭陈英朴英杰
- 关键词：自吞噬作用细胞凋亡长春新碱CASPASE-3基因
- 人肝细胞自噬性凋亡的形态学观察
- 陈英朴英杰
- 文献传递
- 人自噬基因APG5及一个新亚型APG5β的克隆
- 2001年
- 目的克隆APG5基因并在真核细胞中进行表达,从分子水平研究自噬与凋亡之间的关系。方法应用PCR技术,从人胚脑cDNA文库和B细胞cDNA文库中钓取APG5基因,连接到pEGFP-C1载体,测序确定核苷酸序列并进行生物信息学分析。利用脂质体lipofectin将带有目的基因的载体转入人肝细胞株和Hela细胞株。在共聚焦激光显微镜下观察融合蛋白表达。结果成功地钓取APG5及一个新亚型APG5β基因片段,两者连入pEGFP-C1载体并在Hela细胞株中获得表达。在共聚焦激光显微镜下观察到两者在凋亡细胞中表达。在凋亡诱导刺激下,随着凋亡的提前出现,融合蛋白表达的时间也提前。结论成功克隆APG5/APG5β基因,首次证实并报道一个新亚型APG5β,并在GenBank核酸序列数据库中登录(AF293841)。对两者功能进行了初步研究,为进一步研究自噬与凋亡之间的关系和可变性剪切的调节机制提供了有益的线索。
- 陈英彭心昭朴英杰
- 关键词：自噬基因凋亡生物信息学基因表达
- 自噬的抑制影响长春新碱诱导的肝癌细胞自噬性凋亡被引量：19
- 2004年
- 目的 研究自噬特异性抑制剂 3 甲基腺嘌呤 (3 methyladenine ,3MA)对长春新碱 (vincristine,VCR)诱导的肝癌细胞系HepG2细胞自噬性凋亡的影响。 方法 利用已建立的VCR诱导HepG2细胞自噬性凋亡之模型 ,采用monodansylcadaverin(MDC)染色及流式细胞术荧光强度测定方法对自噬进行定量研究 ,采用流式细胞术及DNA电泳检测细胞凋亡。结果 3MA可以特异性地阻止自噬泡形成 ,还可以部分地抑制HepG2细胞自噬性凋亡。 结论 自噬是VCR诱导的HepG2细胞自噬性凋亡所必需的。
- 彭心昭陈英朴英杰
- 关键词：长春新碱肝癌细胞自噬性凋亡自吞噬作用
- 长春新碱诱导的自噬性凋亡与细胞内游离Ca^(2+)浓度的相关性研究被引量：3
- 2000年
- 目的 研究长春新碱 (VCR)诱导的L 0 2细胞自噬性凋亡时细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 +]i)的变化 ,以及自噬特异性抑制剂 3 methyladenine(3MA)对此自噬性凋亡和 [Ca2 +]i的影响。方法 应用已建立的VCR诱导L 0 2细胞自噬性凋亡模型 ,使用电镜、流式细胞术检测细胞凋亡 ;用Fluo 3/AM荧光探针经流式细胞仪测定L 0 2细胞平均 [Ca2 +]i。结果 电镜及流式细胞术检测证实VCR诱导L 0 2细胞发生了自噬性凋亡 ,此凋亡过程中 [Ca2 +]i明显升高 ,以凋亡早期更为明显 :3MA可显著抑制VCR所致的 [Ca2 +]i升高并能降低凋亡细胞比例。结论 在体外条件下VCR可以诱导L 0 2细胞自噬性凋亡 ,其发生可能与VCR导致 [Ca2 +]i升高有关 ;3MA可能通过抑制 [Ca2 +]i升高而抑制自噬及VCR所致的自噬性凋亡。
- 彭心昭陈英乔东坊张淑春陈练波朴英杰
- 关键词：长春新碱CA^2+浓度凋亡自噬
