陈留存
- 作品数：11 被引量：4H指数：1
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 小鼠sidt2基因的可变剪接验证
- 2008年
- 目的:验证小鼠基因sidt2中sidt2(l)和sidt2(s)为同一基因经可变剪接所得的结果。方法:对小鼠sidt2基因进行生物信息学分析及基因组PCR,确定其基因组定位情况;通过提取总RNA、RT-PCR,了解sidt2在小鼠多种组织中的表达情况;构建可变剪接报告载体,转染小鼠肝癌细胞Hepa1-6,并提取细胞总RNA、RT-PCR,检测其在细胞中的剪接行为,验证该基因存在可变剪接。结果及结论:证实小鼠sidt2存在可变剪接,其两条序列sidt2(l)和sidt2(s)为可变剪接的产物。
- 刘舒云李洁陈留存曹国军李少华赵强丁红梅高亚萍刘农乐王芳杨光邵宁生
- 关键词：可变剪接组织表达谱
- 一种基于mRNA质核比变化的miRNA靶基因鉴定方法和应用
- 本发明属于生物技术领域，涉及一种基于mRNA质核比变化的miRNA靶基因快速、准确鉴定方法；涉及该方法在生物医学领域中的应用。本发明通过以下技术方案实现：首先通过现有的miRNA靶标预测生物信息学软件，如Targetsc...
- 邵宁生李洁黄宝春夏伟陈留存李少华苏雪婷王芳丁红梅
- 文献传递
- 人类新基因flj20174的克隆、亚细胞定位、表达谱及功能初探
- 2006年
- 目的:研究人类系统性RNA i相关基因flj20174的克隆表达、亚细胞定位和表达谱,以及功能的初步探索。方法:利用生物信息学方法分析、预测flj20174基因的表达谱和功能;采用RT-PCR技术,从健康人外周血单个核细胞cDNA中,扩增获得flj20174可能的全长编码区,并将其亚克隆于pEGFP-N1载体;利用Northern杂交鉴定其转录本;利用半定量PCR确定flj20174在免疫组织和免疫细胞中的表达谱;通过脂质体转染入HeLa细胞,观察融合蛋白的亚细胞定位和过表达对细胞状态的影响。结果与结论:获得了2 484 bp的全长编码区,测序后发现与NCB I公布的Ak00018的序列完全一致;Northern杂交证实其转录本约为4 669 bp;证实该基因属于低丰度基因,在免疫细胞中有相对较高的表达,并在B细胞和T细胞激活后表达量下降;与EGFP融合表达后可见该蛋白主要分布于内膜系统,而且过表达该融合蛋白可以引起细胞的死亡,推测此过程可能与机体的免疫防御相关。
- 刘朝晖曹国军陈留存杨光李少华高亚萍丁红梅范明沈倍奋邵宁生
- 关键词：基因表达亚细胞定位细胞凋亡
- 系统性RNAi研究进展被引量：1
- 2005年
- 系统性是RNAi效应的一个重要特征,在线虫、原生动物及植物中RNAi均具有系统性,即RNAi效应可在细胞间与组织间进行传递。本文主要介绍线虫及植物中的系统性RNAi及与此效应有关的基因及信号分子,并探讨了其可能的作用机制及生物学意义。
- 陈留存邵宁生沈倍奋
- 关键词：RNA干扰信号分子
- Mir-200b抑制膀胱癌细胞T24的迁移被引量：1
- 2010年
- 目的在膀胱癌细胞系中过表达mir-200b,观察其对T24细胞迁移能力的影响,并检测WASF-3表达水平的改变。方法将mir-200b mimic,WASF-3 siRNA及阴性对照分别转染T24细胞,通过qPCR及Western印迹实验检测WASF-3表达水平的改变;利用Transwell实验检测转染后T24细胞迁移能力的改变。结果转染mir-200b及WASF-3 siRNA后WASF-3在mRNA及蛋白水平上均有明显下降,同时细胞迁移能力亦有明显下降。结论mir-200b能够通过改变WASF-3的表达水平抑制膀胱癌细胞系T24的迁移能力,为进一步探索miRNA在膀胱癌发生发展过程中的作用提供了研究基础。
- 夏伟宋涛李洁陈留存李少华丁红梅王芳邵宁生
- 关键词：微小RNA膀胱肿瘤T24
- 小鼠新基因msid2结构与功能的初步研究
- 在植物和线虫中，RNAi(RNAinterference，RNA干涉)可以在细胞与细胞之间传递，这种现象被称为系统性RNAi(systemicRNAi)。线虫sid-1基因(systemicRNAiinterferenc...
- 陈留存
- 关键词：基因表达细胞定位原位杂交P19细胞基因组序列
- 文献传递
- 小鼠新基因msid2的克隆、亚细胞定位及表达特征被引量：1
- 2005年
- 目的:研究小鼠系统性RNAi相关基因msid2的克隆、亚细胞定位及表达特征。方法:通过生物信息学方法寻找小鼠中与线虫的sid1基因同源的基因,用RT PCR方法从小鼠大脑中分离到其全长cDNA;将其亚克隆到绿色荧光蛋白表达载体pEGFP N1,用脂质体介导转入CHO细胞,确定其亚细胞定位。结果与结论:基因msid2的cDNA全长1353bp,编码450个氨基酸,定位于小鼠16号染色体,其基因组全长16kb,包括14个外显子和13个内含子。亚细胞定位试验结果初步表明,该蛋白定位于内质网及质膜。RT PCR结果显示msid2在小鼠大脑、小脑中高表达,而在其他组织表达水平较低。
- 陈留存杨光孙红高亚萍周厚清刘朝晖丁红梅赵强柳川范明沈倍奋邵宁生
- 关键词：基因表达亚细胞定位CHO细胞
- 组合aptamer在金黄色葡萄球菌检测中的应用研究
- 金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，由其引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。当前检测金葡菌的方法仍以传统的微生物检测方法为主，需要对样品进行分类培养、染色观察以及相应的酶学试验，耗时、不灵敏是这类方法普遍存在的...
- 李少华曹晓晓丁红梅陈留存徐华李洁刘农乐邵宁生
- 关键词：金黄色葡萄球菌微生物检测
- 文献传递
- 人成纤维细胞饲养层促进人角朊细胞生长
- 2007年
- 目的探讨人成纤维细胞(HFB)是否可作为饲养层支持人角朊细胞(KC)的生长。方法分离培养人真皮FB,用丝裂霉素C处理制成饲养层,应用RT-PCR、免疫细胞化学染色方法检测Ⅰ型、Ⅲ型前胶原mRNA和胶原蛋白的表达;在FB饲养层上接种人KC,观察其促进KC贴壁、生长、移行及分化的作用;并设置NIH3T3细胞饲养层为对照组,在其上接种人KC,观察KC贴壁数和膜片完全融合时间。结果FB饲养层Ⅰ型前胶原mRNA的表达有所增加(P<0.05)、Ⅲ型前胶原mRNA的表达无明显变化,抗Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白抗体阳性;以适宜密度接种的成纤维细胞饲养层,KC贴壁、生长和分化良好;二种饲养层KC贴壁数和膜片完全融合时间无差异。结论人真皮FB饲养层能够分泌Ⅰ型和Ⅲ型胶原,促进人KC生长并形成复层细胞。
- 车鹏程孙红陈留存杨光崔建中
- 关键词：成纤维细胞饲养层
- 血脂康对血管紧张素Ⅱ诱导新生大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响被引量：1
- 2007年
- 赵淑健叶平邵宁生杨光陈留存刘坤申
- 关键词：心肌成纤维细胞增殖新生大鼠心肌纤维化动脉粥样斑块血管内皮功能
