丁红梅
- 作品数：83 被引量：122H指数：6
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- miR-1273g-3p通过靶向CNR1调节A549细胞迁移能力被引量：1
- 2014年
- 目的寻找hsa-miR-1273g-3p在人肺腺癌细胞A549中的特异性靶标并探索其生物学功能。方法定量PCR（qPCR）检测miR-1273g-3p在人肺癌细胞A549、H460和H1299中表达情况，利用生物信息学方法预测miR-1273g-3p靶基因，qPCR、免疫印迹（Western Blot）和荧光素酶实验确证靶标，划痕实验和MTS实验验证miR-1273g-3p的生物学功能。结果miR-1273g-3p在非小细胞肺癌细胞系A549、I-1460和H1299中高表达：qPCR、Western印迹和荧光素酶实验证实miR-1273g-3p能够靶向CNR1，可以在mRNA与蛋白水平上调控CNR1的表达；miR-1273g-3p能够通过改变CNR1的表达水平影响A549的细胞迁移能力，对细胞增殖影响不明显。结论研究证明CNR1是miR-1273g-3p的靶基因，揭示miR-1273g-3p通过靶向CNR1影响A549细胞迁移的新功能。
- 侯绿滨苏雪婷秦性良丁红梅黄皑雪李慧葛兴枫赵强李洁邵宁生
- 关键词：细胞迁移
- 小鼠sidt2基因的可变剪接验证
- 2008年
- 目的:验证小鼠基因sidt2中sidt2(l)和sidt2(s)为同一基因经可变剪接所得的结果。方法:对小鼠sidt2基因进行生物信息学分析及基因组PCR,确定其基因组定位情况;通过提取总RNA、RT-PCR,了解sidt2在小鼠多种组织中的表达情况;构建可变剪接报告载体,转染小鼠肝癌细胞Hepa1-6,并提取细胞总RNA、RT-PCR,检测其在细胞中的剪接行为,验证该基因存在可变剪接。结果及结论:证实小鼠sidt2存在可变剪接,其两条序列sidt2(l)和sidt2(s)为可变剪接的产物。
- 刘舒云李洁陈留存曹国军李少华赵强丁红梅高亚萍刘农乐王芳杨光邵宁生
- 关键词：可变剪接组织表达谱
- 一种基于mRNA质核比变化的miRNA靶基因鉴定方法和应用
- 本发明属于生物技术领域，涉及一种基于mRNA质核比变化的miRNA靶基因快速、准确鉴定方法；涉及该方法在生物医学领域中的应用。本发明通过以下技术方案实现：首先通过现有的miRNA靶标预测生物信息学软件，如Targetsc...
- 邵宁生李洁黄宝春夏伟陈留存李少华苏雪婷王芳丁红梅
- 文献传递
- 一种特异识别Vasorin(VASN)蛋白的寡核苷酸配基V4-2的序列和应用
- 本发明公开了属于分子生物医学技术领域的一种特异识别Vasorin(VASN)蛋白的寡核苷酸配基V4-2的序列和应用。本发明设计V4-2特异性的序列，采用5’端或3’端修饰、标记(如FITC、生物素或者地高辛)的方法检测V...
- 邵宁生李少华李慧王玮丁红梅李洁黄皑雪赵强
- 人vasorin蛋白的基因克隆、表达及纯化被引量：3
- 2014年
- 目的:克隆、表达人vasorin(VASN)蛋白。方法:利用PCR方法从HepG2细胞的cDNA中扩增获得目的基因,并插入带有6×His标签的原核高效可溶性表达载体pET28a中,构建重组表达质粒pET28a-VASN,将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后目的基因获得表达,对融合目的蛋白进行Ni2+金属螯合柱纯化。结果:内切酶鉴定及基因序列测定证实重组表达质粒构建成功;对目的蛋白进行了原核表达,SDS-PAGE显示相对分子质量为61×103的特异表达条带;Western印迹证实目的蛋白为VASN,且主要以包涵体形式存在;对经尿素变性的表达产物进行了亲和层析纯化,有利于以后的变性、复性过程。结论:获得了人VASN融合蛋白,为其进一步的生物学功能研究奠定了基础。
- 丁红梅赵强王玮李慧刘农乐李洁苏雪婷黄皑雪房涛李少华邵宁生
- 关键词：原核表达纯化
- 一种肝癌药物治疗的靶标及其应用
- 本发明公开了属于医学肿瘤学技术领域的一种肝癌药物治疗的靶标Vasorin蛋白及其应用。本发明通过液相差异SELEX的方法，以伴肝外转移的AFP阴性HCC患者血清为靶标，以正常人血清为消减靶标，获得特异识别肝癌患者血清的富...
- 邵宁生李少华李慧王玮丁红梅李洁夏伟刘农乐赵强王芳
- 肿瘤坏死因子-α体外RNA伴侣分子活性研究
- RNA伴侣分子的定义是辅助RNA正确折叠的蛋白分子。RNA伴侣分子在所有生物中都是普遍而丰富存在的,但是现在尚未有细胞因子具有RNA伴侣分子活性的研究和报道。肿瘤坏死因子TNF-α是一种常见的炎症相关的细胞因子,我们首次...
- 曹国军杨光刘朝晖刘雪梅张洁张达矜刘农乐丁红梅范明沈倍奋邵宁生
- 文献传递
- H1299细胞中miR-138的功能性靶标动态变化与mRNA核／质比一致性研究
- 2013年
- 目的确定miRNA功能性靶基因的动态变化与mRNA核／质比的一致性。方法利用质／核比基因表达谱芯片和实时荧光定量PCR技术．研究转染miR-138的H1299细胞饥饿不同时间后生物信息学预测的miR-138靶基因变化与其相应基因核／质比的关系。结果H1299细胞中miR-138的功能性靶标动态变化规律与mRNA核／质比一致性较好。结论miRNA的功能性靶标是随着细胞的状态不同而发生动态变化。
- 苏雪婷夏伟李少华丁红梅赵强李慧黄皑雪秦性良侯绿滨房涛李洁邵宁生
- 关键词：MICRORNAMIR
- 人骨形成蛋白-2重组腺病毒表达载体的构建被引量：7
- 2001年
- 目的 构建人骨形成蛋白 - 2 (BMP- 2 )基因的重组腺病毒表达载体 ,为应用 BMP- 2基因治疗的研究奠定基础。方法 首先构建携带 BMP- 2基因的腺病毒穿梭质粒 p Ad CMV- BMP- 2 ,在脂质体介导下 ,与腺病毒基因组质粒 p JM17共转染 2 93细胞 ,经同源重组获得重组腺病毒 Ad- BMP- 2。结果 经限制性酶切和 PCR扩增鉴定 ,证实为复制缺陷型 BMP- 2重组腺病毒。结论 成功构建了 BMP- 2腺病毒表达载体。
- 刘建宇林欣裴建华王立春丁红梅王会信
- 关键词：腺病毒骨形成蛋白-2基因重组BMP-2
- RAP结合肽-hFcγ1融合蛋白的表达与初步活性鉴定
- 2004年
- 目的 :将肽库筛选到的正调控金黄色葡萄球菌 (金葡菌 )外毒素分泌的关键分子RAP(RNAⅢactivatingpro tein)的结合肽与人IgG1抗体Fc片段 (hFcγ1)融合表达 ,检测其干扰金葡菌外分泌毒素产生的活性。方法 :根据噬菌体肽库筛选到的RAP结合肽序列 ,选用大肠杆菌偏爱的密码子合成基因片段 ,将其融合在人IgG1抗体Fc片段基因序列的 5′端 ,构建pET rapbp fc融合表达载体 ,转化大肠杆菌并诱导表达。以包涵体形式存在的目的蛋白经变性、复性后 ,ELISA实验分别证实其与抗人IgG抗体及纯化RAP的结合活性。以MDBK细胞株为模型 ,MTT实验观察融合蛋白对金葡菌 196菌株外分泌毒素水平的影响。结果与结论 :融合基因在大肠杆菌中获得表达。复性后 ,融合蛋白的Fc片段及结合肽部分分别能够与抗人IgG抗体及RAP结合 ,且能在一定程度上降低金葡菌 196株上清中的毒素水平。
- 李少华杨光李洁丁红梅柳川沈倍奋邵宁生
- 关键词：RAP结合肽融合蛋白毒素
