陈杰
- 作品数：5 被引量：15H指数：2
- 供职机构：天津医科大学第二医院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- LuxS基因缺失的变形链球菌突变株的构建及鉴定被引量：11
- 2008年
- 目的通过同源重组法构建LuxS基因缺失的变形链球菌（Streptococcus mutans）突变株。方法运用基因同源重组方法将红霉素抗性基因（Eym‘）连接到PCR扩增LuxS基因两端区域产生的2个基因片段之间，并共同插入到pUC19载体的多克隆位点中，构建出带红霉素抗性标志的缺失突变载体pUCluxKO。将突变载体转化到含完整LuxS基因的突变受体变形链球菌标准株中，红霉素筛选出LuxS基因缺失的变形链球菌突变株，并经PCR、生物荧光检测及DNA测序鉴定。结果构建的突变载体经限制性内切核酸酶酶切分析显示，产生的条带与设计结果完全一致。PCR方法扩增突变株LuxS和Eym＇基因显示，LuxS基因已被完整敲除掉，经生物荧光检测，突变株不能诱导哈氏弧菌（Vibrio hazy／）BB170的生物发光，说明不能产生信号分子AI-2（autoinducer-2）。DNA测序证实筛选得到了LaxS基因缺失的变形链球菌突变株。连续传代培养后证实，变形链球菌LaxS基因突变株具有良好的稳定性。结论成功构建出LaxS基因缺失的变形链球菌突变株，为研究LaxS基因对变形链球菌致龋毒力的影响奠定了基础。
- 于丹妮韩福胜韩玉植陈杰
- 关键词：变形链球菌LUXS基因突变株
- 变形链球菌菌斑生物膜相关基因突变的研究进展
- 2007年
- 变形链球菌能生成菌斑生物膜,后者与龋病的发生密切相关。随着现代口腔医学和分子生物学的发展,菌斑生物膜相关基因的研究也越来越多,发现了许多与之相关的基因,主要包括与黏附力相关的基因、与群体感应信号系统相关的基因等。对变形链球菌菌斑生物膜相关基因的研究可以更深入地了解其致龋机制,并对寻找防龋新途径作出有益的探索。本文就近年来与变形链球菌菌斑生物膜相关的基因突变研究作一综述。
- 陈杰于丹妮
- 关键词：变形链球菌菌斑生物膜基因突变
- LuxS基因缺失对变形链球菌耐酸性的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨变形链球菌Ingbritt C(血清C型)国际标准株与LuxS基因缺失的变形链球菌突变株之间耐酸能力的差异。方法:配制相同浓度的变形链球菌标准株与LuxS缺陷株菌悬液,分别在不同pH值(pH3.5～7.0)的BHI液体培养基中培养相同时间后,用紫外分光光度计测定吸光度,比较2种菌株的生长情况;先在轻度酸性环境(pH5.5)中预酸化,再将2种菌株于致死性pH值环境(pH3.0)中培养,比较其适应性耐酸能力。结果:①pH值为6.0～7.0时,2种菌珠在相同pH值条件下生长情况间的差异无显著性(P>0.05),且3组不同pH值条件下细菌生长情况间的差异亦无显著性(P>0.05);②pH值为4.5～5.5时,2种菌株的生长情况的差异有显著性(P<0.05);③在pH值为3.0时,LuxS缺陷株的生存率(0.006 5%)要明显低于标准株的生存率(0.078%),差异有显著性(P<0.05)。④在pH值5.5环境下预酸化后,LuxS缺陷株的生存率(0.747%)约为标准株生存率(8.65%)的1/10。结论:在亚致死性pH值中,变形链球菌标准株与LuxS缺陷株的耐酸能力具有差异,标准株的耐酸能力强于LuxS缺陷株,2种菌株均表现出了适应性耐酸的能力;变形链球菌LuxS缺陷株对酸的敏感性增加,而适应性耐酸能力仍然存在。
- 于丹妮陈杰张耀超韩育植
- 关键词：变形链球菌LUXS基因耐酸性突变株
- LuxS基因缺失对变形链球菌蛋白表达的影响被引量：2
- 2010年
- 目的通过双向电泳技术对比研究变形链球菌标准株与LuxS突变株菌体总蛋白质的表达差异,为进一步研究LuxS信号系统对变形链球菌致龋毒力的调控机制奠定基础。方法提取变形链球菌标准株及LuxS突变株的菌体总蛋白质,采用双向电泳技术对比研究两者蛋白质的表达差异,找出差异蛋白点。结果与标准株菌体总蛋白2-DE图谱相比较,LuxS突变株菌体总蛋白2-DE图谱中有61个斑点的蛋白质表达量发生了改变:36个点蛋白质表达量升高,25个点蛋白质表达量降低。结论变形链球菌标准株与LuxS突变株菌体总蛋白存在明显的差异,表现为2-DE图谱蛋白斑点染色的深浅不同,提示LuxS突变株菌体总蛋白发生了量的变化。
- 张耀超陈杰于丹妮
- 关键词：变形链球菌LUXS基因突变株蛋白质
- 变形链球菌AI-2活性测定及luxS基因同源重组质粒的构建被引量：8
- 2008年
- 目的构建用于转化变形链球菌的luxS基因缺失的同源重组克隆载体。方法利用哈氏弧菌（Vibrio harveyi）BB170作为报告菌株，对变形链球菌在不同生长时期诱导生物发光的能力进行测定，然后分别PCR扩增变链菌luxS基因上下游片段及质粒PJT10的红霉素抗性基因片段，采用分子克隆技术将基因片段依次双酶切后连接人载体pUC19，构建luxS基因缺失的重组质粒，转化到大肠杆菌DH5α感受态细胞经筛选后，抽提重组质粒，进行酶切鉴定。结果变链菌国际标准株可诱导哈氏弧菌BB170的生物发光现象，提示变链菌中存在AI-2数量感应通路。构建的重组质粒pUCluxKO经PstI-BamHI双酶切，产物电泳在大约1000bp和5000bp处各见一条特异条带；经BamHI—KpnI双酶切，产物电泳在大约1500bp和4500bp处各见一条特异条带；经KpnI—EcoRI双酶切后，产物电泳在大约1000bp和5000bp处各见一条特异条带。结论变链菌luxS基因同源重组质粒构建成功，为进一步通过同源重组法构建变链菌luxS基因缺陷株奠定基础。
- 于丹妮韩育植韩福胜陈杰
- 关键词：链球菌基因重组质粒
