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mLumin转染人肝癌HepG2细胞系的建立被引量：1: 2011年; 目的:建立mLumin+的HepG2细胞系,为进一步建立肿瘤模型和小动物荧光成像观察奠定基础。方法:采用磷酸钙法,将pcDNA3.0-mLumin质粒转染至人肝癌细胞系HepG2,经G418筛选扩增后通过PCR检测mLumin基因在转染的肝癌细胞HepG2中的表达情况,同时应用荧光显微镜及流式细胞仪检测mLumin+的HepG2细胞比例,最终将其接种于裸鼠的皮下,观察致瘤情况。结果:RT-PCR鉴定证实肝癌细胞HepG2中有mLumin基因的mRNA表达。在倒置荧光显微镜下,采用绿光(540 nm)激发时,可以见到大量的发射红色荧光的细胞,流式细胞术检测有50%的阳性率。小动物活体成像仪显示裸鼠皮下接种能够成瘤,组织冰冻切片也证实HepG2细胞中有大量mLumin蛋白表达。结论:成功建立了mLumin+的HepG2细胞,为进一步进行肿瘤的基础和应用研究奠定了基础。; 刘霞闫美娜王荟万洋洋许凤姣邵青成静范兴文石慧娜邵启祥; 关键词：HEPG2 活体成像

调节因子X5及其复合物的研究进展被引量：1: 2017年; 调节因子X5(regulatory factor X5,RFX5)是在人体广泛表达的DNA结合蛋白,它通过结合RFXB和RFXAP形成RFX复合物,主要功能是转录调控主要组织相容性复合体MHCⅡ类基因。研究发现,RFX5还具有转录调控非MHC类靶基因的功能,尤其是与肿瘤相关的研究提示,RFX5可能在免疫系统和肿瘤进程中发挥重要的跨界分子作用。该文综述了RFX5及其组成RFX复合物的生物学特性,以及在裸淋巴细胞综合征、动脉粥样硬化和肿瘤等疾病中RFX5转录调控靶基因的研究进展。; 赵杨静谢兴旺王荟闫美娜邵启祥; 关键词：转录调控靶基因肿瘤

整合素α3在卵巢上皮细胞癌中的表达及意义被引量：6: 2017年; 目的:研究整合素α3(integrinα3,ITGA3)在卵巢上皮细胞癌组织和细胞系中的表达及其与卵巢上皮细胞癌发展的相关性。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫组织化学法分别检测卵巢上皮癌细胞系和癌组织以及良性组织中整合素α3 mRNA和蛋白的表达。结果:qRT-PCR检测结果显示,与正常卵巢上皮细胞相比,SKOV3和OVCAR-3卵巢癌细胞系中整合素α3 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。与卵巢良性组织相比,癌组织中整合素α3 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。免疫组化结果显示,与卵巢良性组织相比,卵巢癌组织中整合素α3蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。且晚期患者癌组织中整合素α3蛋白表达高于早期患者。结论:整合素α3在卵巢癌细胞系及癌组织中呈高表达,且与临床分期相关;其表达可能与卵巢癌的发生、发展和转移有一定相关性。; 陈小坤何瑶闫美娜杨鑫鑫倪晓鸽杨佩芳邵根宝卢小东周小明夏圣邵启祥; 关键词：整合素Α3 卵巢上皮细胞癌 QRT-PCR 免疫组织化学

mTIGIT-mLumin跨膜融合蛋白慢病毒载体和真核表达载体的构建及体外的稳定表达: 2018年; 目的:构建以mLumin荧光蛋白为指示系统的小鼠T细胞免疫球蛋白和结构域蛋白(mouse T cell Ig and ITIM domin,mTIGIT)胞外区真核表达载体,并表达mTIGIT-mLumin融合蛋白。方法:分别设计mTIGIT和mLumin的特异性引物,通过PCR技术扩增两个目的基因序列,经酶切、连接,克隆至plenti-puro和pcDNA3.1载体。将构建的plenti-puro-mTIGIT-mLumin慢病毒载体进行病毒包装并感染HEK-293T细胞,而pcDNA3.1-mTIGIT-mLumin真核表达质粒转染非洲绿猴肾成纤维Cos7细胞,利用两种表达载体的药物抗性进行筛选感染或转染的细胞,检测融合蛋白的表达情况。结果:通过PCR顺利扩增获得mTIGIT和mLumin,经酶切、连接插入至载体,基因测序结果证实克隆的mTIGIT和mLumin片段序列正确,并成功正确插入到plenti-puro载体和pcDNA3.1载体中;荧光显微镜和共聚焦显微镜观察显示,转染的HEK-293T细胞和Cos7细胞经过筛选能够稳定表达mTIGIH-mLumin融合蛋白。结论:成功构建plenti-puro-mTIGIT-mLumin慢病毒载体和pcDNA3.1-mTIGIT-mLumin真核表达载体,且能够在目的细胞中稳定表达mTIGIT-mLumin融合蛋白。; 王晶哲王小铃王娟杨鑫鑫闫美娜李欣悦王荟刘霞邵启祥; 关键词：重组质粒融合蛋白

新生儿呼吸窘迫综合征患儿外周血CD24及炎症因子mRNA表达水平及其意义被引量：5: 2015年; 目的检测新生儿呼吸窘迫综合症(NRDS)患儿外周血单个核细胞(PBMC)中CD24和炎症因子(TNF-α、MCP-1、IL-6、IL-17A)mRNA的表达水平,并探讨其在NRDS诊断及预后中的意义。方法采集30例NRDS患儿治疗前后和30例健康新生儿外周血标本,分离PBMC,用实时定量PCR检测CD24、TNF-α、MCP-1、IL-6、IL-17A mRNA表达水平。结果与健康新生儿比较,NRDS患儿CD24 mRNA水平明显升高(P<0.01),而TNF-α、MCP-1、IL-6、IL-17A mRNA水平差异无统计学意义(P均>0.05)。与治疗前相比,治疗后NRDS患儿外周血PBMC中IL-6、MCP-1和TNF-αmRNA表达水平无明显变化(P>0.05),但CD24有下降趋势,而IL-17A呈上升趋势,差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论 CD24可能成为NRDS诊断及预后评估的分子标志物。; 刘欣尹蕾闫美娜邵启祥; 关键词：CD24 炎症因子

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闫美娜