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钟瑜: 作品数：11 被引量：49H指数：4; 供职机构：西北农林科技大学动物科技学院陕西省农业分子生物学重点实验室更多>>; 发文基金：公益性行业(农业)科研专项陕西省重大科技创新专项计划项目转基因生物新品种培育专项更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

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西农萨能奶山羊乳腺组织LXBα基因CDS的克隆及序列分析: 肝脏X受体α(LXBα)基因是核受体超家族的成员之一，可由巨噬细胞、脂肪细胞、骨骼肌细胞、肠细胞等脂类代谢旺盛的细胞产生。LX是调控胆固醇降解、吸收、从外围细胞中逆向转运、脂肪酸代谢及脂肪生成的关键酶。研究基于牛的LXB...; 钟瑜罗军王维; 关键词：核受体西农萨能奶山羊生物信息学; 文献传递

奶山羊短链脂肪酸受体GPR41基因的克隆及组织表达分析被引量：10: 2012年; 旨在克隆奶山羊GPR41(G protein-coupled receptor 41)基因并分析其组织表达谱,为进一步探讨其功能奠定基础。根据GenBank上已登录的牛、人和鼠的GPR41基因序列设计1对特异性引物,采用RT-PCR方法克隆奶山羊GPR41基因,利用实时荧光定量PCR方法分析奶山羊GPR41mRNA表达的组织特异性。测序结果表明奶山羊GPR41基因的CDS区为978bp,共编码325个氨基酸。奶山羊GPR41基因序列同源性分析表明:其与牛、人和鼠的核苷酸序列同源性分别为96%、78%和74%,与牛、人和鼠的氨基酸序列同源性分别为97%、76%和74%。实时荧光定量PCR分析结果表明:奶山羊GPR41基因在小肠组织中表达量最高,其次是乳腺组织,在心脏和肾脏中表达量极低。试验结果表明GPR41可能在小肠和乳腺组织中发挥着重要的生理作用。; 孙雨婷罗军朱江江赵旺生李君钟瑜郝娟; 关键词：奶山羊克隆

植物单宁的生理作用被引量：14: 2008年; 介绍了单宁抗氧化性、抑制微生物、抗肿瘤等生理作用,同时论述了它与其它酶和蛋白质、金属离子等的相互作用。; 钟瑜胡健刘阿静张继澍; 关键词：化学特性生理作用

LXRα基因RNA干扰和过表达对奶山羊乳腺上皮细胞脂肪酸代谢的影响: 肝X受体α(Liver X receptorsα,LXRα)为核受体超家族中的一员,在巨噬细胞、脂肪细胞、骨骼肌细胞、肠细胞等脂类代谢旺盛的细胞中表达量较高。LXRα基因在分布上具有组织的特异性,在维持胆固醇代谢、脂肪代...; 钟瑜; 关键词：LXRΑ 腺病毒载体乳腺上皮细胞; 文献传递

BHL等4种药物对油菜杀雄效果的研究被引量：12: 2008年; 采用不同浓度的BHL、快灭灵、乙烯利、二甲四氯钠在油菜蕾薹期对白菜型油菜自交系143C和甘蓝型油菜细胞质雄性不育系203A进行杀雄效果试验。结果表明：用0.5μg/mL BHL在油菜薹高15-20 cm,最大花蕾1.5-2.5 mm时期叶面喷施,单株受药量15-17 mL,间隔10 d后用相同浓度再喷一次,单株受药量8-10 mL,可诱发白菜型油菜91%全不育株率,可使甘蓝型油菜细胞质雄性不育系完全不育,低温不再产生微粉。而另3种药物在本试验中几乎没有杀雄效果。细胞学观察化学杀雄后白菜型油菜143C花药的发育过程：在造孢期造孢细胞粘连,空泡化;减数分裂至四分体期,花药不发育,或绒毡层与花粉母细胞粘连变形;单胞、二三胞花粉期药室有少量畸形花粉粒、或死花粉粒、或完全无花粉粒。; 井苗董振生严自斌董军刚钟瑜; 关键词：油菜化学杀雄细胞学

西农萨能奶山羊乳腺组织LXRα基因CDS的克隆及序列分析: 钟瑜罗军王维; 关键词：核受体

奶山羊LXRα基因shRNA序列的筛选及腺病毒载体的构建与鉴定被引量：1: 2011年; 【目的】构建针对奶山羊肝脏X受体α(Liver X receptorα,LXRα)基因的干扰腺病毒载体。【方法】根据奶山羊LXRα基因CDS区域设计小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA),分别构建pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA及pDsRed1/C1-LXRα载体,共转染HEK 293细胞,48h后观察其荧光蛋白表达量,筛选出具有明显干扰效应的shRNA。将具有明显干扰效应的shRNA载体与腺病毒骨架载体pAd/PL-DEST在LR ClonaseTMⅡ重组酶的作用下进行重组,经氨苄青霉素及氯霉素抗性筛选后获得重组腺病毒载体。将构建好的重组腺病毒载体经PacⅠ酶切线性化并回收后,转染HEK 293细胞,培养7～10d后收集细胞并反复冻融,收集细胞裂解液,反复扩增3次后,获得高滴度的重组腺病毒,测定其病毒滴度。【结果】①设计出了shRNA-490、shRNA-496、shRNA-509和shRNA-923 4条shRNA序列;②得到shRNA-490和shRNA-923 2条具有明显干扰效应的shRNA;③获得pAd/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA-490和pAd/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA-923 2个重组腺病毒载体,ScaⅠ酶切及测序结果均正确,2个腺病毒重组载体滴度均为5×108 PFU/mL。【结论】奶山羊LXRα基因重组shRNA腺病毒载体构建成功,为利用RNA干扰技术研究LXRα基因在乳腺上皮细胞中的功能奠定了基础。; 钟瑜罗军王维胡仕良李君孙雨婷郝娟石恒波; 关键词：RNA干扰腺病毒载体奶山羊

西农萨能奶山羊LXRα基因的克隆、序列分析及组织表达被引量：4: 2011年; 采集西农萨能奶山羊乳腺组织,利用RT-PCR和RACE技术分离并克隆LXRα基因的cDNA序列。其全长1 654 bp(GenBank收录号为GU332719),包括5′UTR150 bp,CDS1 344 bp和3′UTR160 bp,该基因编码447个氨基酸。经氨基酸序列分析发现,山羊LXRα与GenBank中牛(Bos taurus)、小鼠(Mus muscu-lus)、褐鼠(Rattus norvegicus)、猪(Sus scrofa)和人(Homosapiens)的LXRα相似性较高,均在90%以上。蛋白质结构分析表明,其蛋白质分子量为50.35 ku,等电点为6.3。具有受体特征结构域:配体结合区域(Lig-and-binding Domain,LBD)、DNA结合区域(DNA-binding Domain,DBD)和锌指蛋白C4型区域(Zinc fingerC4 type,zf-C4)。整个序列具有较强的亲水性且不含信号肽与跨膜结构,该基因定位于细胞核。此外,还通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术对LXRα基因进行组织表达分析。在所检测的西农萨能奶山羊11个组织中均有LXRα基因的mRNA存在,其中小肠组织中表达最丰富,乳腺、肝脏、脾脏、皮脂次之,心脏相对最低。; 王维罗军钟瑜朱越滕炎玲林先滋王桢; 关键词：西农萨能奶山羊 LXRΑ

西农萨能奶山羊乳腺组织LXRα基因CDS的克隆及序列分析: 肝脏X受体α(LXRα)基因是核受体超家族的成员之一,可由巨噬细胞、脂肪细胞、骨骼肌细胞、肠细胞等脂类代谢旺盛的细胞产生。LXR是调控胆固醇降解、吸收、从外围细胞中逆向转运、脂肪酸代谢及脂肪生成的关键酶。研究基于牛的LX...; 钟瑜罗军王维; 关键词：核受体西农萨能奶山羊基因克隆; 文献传递

猪PDCD5基因的克隆与真核表达: 2011年; 用RT-PCR方法从猪肝组织中扩增出猪PDCD5(programmed cell death 5)编码序列,TA克隆至pMD-19T载体中,软件分析猪PDCD5基因的核算序列和蛋白序列,进行染色体定位.构建真核表达载体,将PDCD5基因编码区序列插入绿色荧光蛋白报告基因的真核表达载体pEGFP-C1中.通过脂质体转染法将重组载体瞬转入猪脐静脉血管内皮细胞系(SUVECs)进行瞬时表达.结果表明:该序列编码125个氨基酸,猪PDCD5基因定位于猪6号染色体,含有6个外显子,与人PDCD5基因高度同源.双酶切鉴定和测序表明:重组真核表达载体构建成功,荧光检测和Western blot检测显示PDCD5融合蛋白表达.研究结果为探讨猪PDCD5基因在细胞凋亡调控中的功能提供了基础数据.; 胡健王静娜陈新雨温俊歌徐瑶钟瑜张德礼; 关键词：CELL 克隆真核表达

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