辛娜
- 作品数：22 被引量：46H指数：4
- 供职机构：中国医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省教育厅基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- GLI基因与单纯性先天性心脏病的相关性研究
- 目的我室前期工作应用遗传连锁不平衡检验将单纯性先天性心脏病遗传易感基因定位至12q13 区域内3．4cM。该候选区域内已知基因主要有Hox C、GLI、CBX5等。GLI基因是一类重要的机体发育调控基因,主要通过shh信...
- 邱广蓉宫立国徐小延辛娜孙开来
- 文献传递
- 人胚胎发育时期足部组织中锌指蛋白548可能和HOXD13相互作用形成蛋白复合体而发挥作用吗?
- 2010年
- 背景:HOX基因家族是一个高度保守的转录因子家族,该家族在胚胎发育阶段基本体轴和次级体轴的形成中起作用,同时在中枢神经系统、中轴骨、胃肠和泌尿生殖系及外生殖器和肢体的发育中起重要作用。目的:观察孕14周人胚胎足部发育过程中与HOXD13相互作用的蛋白质。方法:取胎儿足部组织,应用蛋白提取试剂盒提取蛋白,加入6μgHOXD13抗体进行免疫沉淀实验获取HOXD13相互作用的蛋白质,以加入非特异的IgG作为阴性对照。考马斯亮蓝染色后观察沉淀下来蛋白质形成的条带,切取需要条带送质谱分析。结果与结论:利用HOXD13抗体在孕14周人胚足部组织蛋白质中获取了一个可能与HOXD13相互作用的蛋白质,相对分子质量约为60000,经质谱鉴定后为锌指蛋白548。在孕14周人胚足部发育过程中,HOXD13可能和锌指蛋白548结合形成蛋白复合体而发挥转录调控作用。
- 王莉莉辛娜孙开来
- 关键词：相互作用蛋白转录调控
- 胎盘间充质干细胞低氧培养液对肠黏膜上皮细胞氧化应激损伤的保护作用被引量：6
- 2016年
- 目的研究胎盘间充质干细胞(p MSCs)低氧培养液对肠黏膜上皮细胞氧化应激损伤的作用。方法组织块培养法提取p MSCs,流式细胞术检测表面标志,ELISA检测p MSCs常氧(21%O_2)或低氧(1%O_2)培养5 d后培养液中胰岛素样生长因子1(IGF-1)的含量。人结肠腺癌细胞(Caco2)经100μmol/L H_2O_2处理12 h后分别培养于正常培养液、p MSCs常氧培养液或p MSCs低氧培养液,5 d后台盼蓝染色测细胞存活情况,MTT测细胞增殖,Annexin V-FITC/PI双染测细胞凋亡。结果 p MSCs阳性表达CD29,CD44。p MSCs低氧培养液中的IGF-1明显多于p MSCs常氧培养液(P<0.05)。与p MSCs常氧培养液相比,p MSCs低氧培养液中H_2O_2处理的Caco2存活细胞多,增殖快,凋亡少(P<0.05)。向p MSCs低氧培养液中加入IGF-1抗体后,细胞增殖减慢,凋亡增多(P<0.05)。结论 p MSCs低氧培养液对H_2O_2处理的Caco2具有保护作用。机制与IGF-1促进细胞增殖、抑制凋亡相关。
- 杜莉莉吕润潇杨晓漪辛娜马廷贤
- 关键词：胎盘间充质干细胞低氧氧化应激
- 心脏形成关键基因-TBX5在大鼠胚胎心脏中的克隆及表达研究(英文)被引量：2
- 2006年
- 为了研究心脏形成关键基因-TBX5的表达情况,选择Wistar大鼠作为从分子水平研究心脏发育的实验动物并从胎鼠心脏中克隆了TBX5 cDNA全长(GenBank登录号:AY859491),其cDNA及氨基酸序列不同于GenBank预测序列;随后应用RT-PCR及Northern blot分析TBX5基因在大鼠各组织中的表达情况,发现TBX5为单一转录本,在大鼠各组织均有表达,心脏中表达最强;构建荧光表达载体,转染大鼠肝癌细胞,观察TBX5亚细胞定位,结果证实TBX5基因在细胞核中表达;最后构建原核表达载体,IPTG诱导表达获得了GST-TBX5融合蛋白。以上工作为进一步鉴定心脏发育中TBX5相关转录因子及研究相互间的调控机制奠定了基础。
- 宫立国邱广蓉辛娜徐小延孙开来
- 关键词：TBX5基因克隆心脏发育
- 单纯性先天性心脏病中TBX5基因表达异常的机制被引量：7
- 2009年
- 为探讨人类单纯性先天性心脏病患者中TBX5基因表达下调的可能原因,应用变性高效液相色谱(DHPLC)方法检测100例单纯性先天性心脏病患者中TBX5基因上游1200bp调控区的突变情况;应用甲基化敏感性限制性内切酶(MS-RE)法检测50例单纯性先天性心脏病患者和5例非先天性心脏病患者心肌组织TBX5基因启动子区两个CpG岛(转录起始点上游-49～-188bp和-247～-464bp处)的甲基化情况;应用P-match软件预测小鼠Tbx5基因上游转录因子Nkx2-5的结合位点,构建Nkx2-5表达载体转染小鼠H9C2(2-1)心肌细胞,RT-PCR及Western blotting检测Tbx5基因表达,凝胶阻滞实验(EMSA)验证Nkx2-5和Tbx5基因的作用。结果在100例单纯性先天性心脏病患者中,未检测到TBX5基因上游1200bp调控区突变;非先天性心脏病患者和单纯性先天性心脏病患者在两个CpG岛存在相同的甲基化;小鼠Tbx5基因转录起始点上游-312～-315bp可能存在Nkx2-5的结合位点,转染Nkx2-5表达载体后Tbx5基因在mRNA及蛋白质水平均有表达增高趋势,Nkx2-5在体外可以与Tbx5基因上游-312～-315bp序列相结合。以上结果提示TBX5基因调控区突变和两个CpG岛的甲基化不是单纯性先天性心脏病患者心肌组织中TBX5基因表达下调的原因,TBX5基因表达下调可能由于NKX2-5的表达异常引起。
- 辛娜邱广蓉宫立国徐小延孙开来
- 关键词：先天性心脏病
- 单纯性先天性心脏病中TBX5基因表达改变的机制研究
- 应用变性高效液相色谱(DHPLC)方法检测100例单纯性先天性心脏病患者中 TBX5基因上游1200bp 调控区的突变情况;应用甲基化敏感性限制性内切酶(MS-RE)法检测50例单纯性先天性心脏病患者和5例非先天性心脏病...
- 辛娜官立国邱广蓉徐小延孙开来
- 文献传递
- GLI1基因I495L和D933G多态性与先天性心脏病的相关性被引量：7
- 2010年
- 目的探讨GLI1基因I495L和D933G多态性与先天性心脏病(CHD)的相关性。方法采用病例对照研究,选择180例CHD患儿[病例组,包括ASD37例、VSD65例及法洛四联症(TOF)78例]和200名健康体检儿童(健康对照组)。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)进行GLI1基因I495L和D933G位点多态性检测,分析上述2个多态位点基因型频率和等位基因频率在病例组和对照组的分布,比较各个位点不同基因型与CHD患病风险的关系。应用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果 GLI1基因I495L多态位点基因型频率在VSD组、TOF组的分布与健康对照组比较差异有统计学意义(P=0.024,0.029),等位基因频率的分布亦存在统计学差异(P=0.015,0.004),且C等位基因携带者患VSD和TOF的风险高于A等位基因携带者(VSD:OR=1.658,95%CI1.101～2.496;TOF:OR=1.757,95%CI1.198～2.575);GLI1基因D933G多态位点基因型频率在VSD组、TOF组的分布与健康对照组比较存在统计学差异(P=0.015,0.018),等位基因频率的分布亦存在统计学差异(P=0.039,0.008),且G等位基因携带者患VSD和TOF的风险高于A等位基因携带者(VSD:OR=1.520,95%CI1.020～2.266;TOF:OR=1.654,95%CI1.137～2.406)。结论 GLI1基因I495L和D933G多态性与CHD具有明显的相关性,具有C、G等位基因的个体患CHD的风险增高。
- 邱广蓉李晓明辛娜姜红堃刘红波孙开来
- 关键词：多态性
- TBX5基因启动子区域突变、甲基化分析及相互作用蛋白研究
- 目的：
先天性心脏病(congenital hean disease，CHD)是常见的出生缺陷，发病率为4％～8％。临床资料和流行病学研究表明，遗传因素在CHD的发病过程中发挥重要作用，遗传率为55％～65％。...
- 辛娜
- 关键词：TBX5基因甲基化免疫共沉淀
- 文献传递
- TBX5基因在大鼠心脏中的克隆及表达研究
- 目的选择Wistar大鼠作为从分子水平研究心脏发育的实验动物。从胎鼠心脏中克隆大鼠TBX5 基因并研究该基因的组织表达及亚细胞定位情况,构建TBX5原核表达载体并提取融合蛋白,为进一步功能研究奠定基础。方法提取胎鼠心脏R...
- 宫立国邱广蓉徐小延辛娜孙开来
- 文献传递
- 小鼠腹腔巨噬细胞不同分离方法的比较被引量：1
- 2015年
- 目的比较不同方法分离的小鼠腹腔巨噬细胞的生物学特性并找出最优方法。方法采用3种方法分离小鼠腹腔巨噬细胞:5%淀粉肉汤小鼠腹腔注射3 d后灌洗(5%淀粉肉汤组);直接DMEM液腹腔灌洗(无血清DMEM组);含75%血清DMEM液腹腔注射30 min后灌洗(75%血清DMEM组),每组6只小鼠。观察各组巨噬细胞形态、计数细胞数量、流式细胞仪测细胞纯度、台盼蓝染色测细胞存活率、划痕实验测迁移能力及ELISA检测脂多糖(LPS)刺激后巨噬细胞分泌TNFα、IL-6及IL-1β的水平。结果 3组巨噬细胞的形态、纯度、存活率相似,75%血清DMEM组巨噬细胞数量为(80.47±0.82)×105个,明显多于5%淀粉肉汤组(5.64±0.31)×105个及无血清DMEM组(2.63±0.42)×105个(P<0.05);75%血清DMEM组巨噬细胞迁移能力明显高于其他两组(P<0.05);75%血清DMEM组巨噬细胞分泌TNFα(15.51±0.51)ng/m L、IL-6(415.33±1.55)pg/m L、IL-1β(421.01±2.64)pg/m L,均多于5%淀粉肉汤组TNFα(10.50±0.50)ng/m L、IL-6(386.33±1.52)pg/m L、IL-1β(375.33±2.51)pg/m L(P<0.05),也多于无血清DMEM组TNFα(9.56±0.25)ng/m L、IL-6(384.66±1.15)pg/m L、IL-1β(393.34±2.62)pg/m L(P<0.05)。结论 75%血清DMEM液腹腔注射30 min后灌洗是一个比较好的分离小鼠腹腔巨噬细胞的方法。
- 杜莉莉吕润潇于艳秋辛娜金玉楠
- 关键词：巨噬细胞小鼠迁移细胞因子
