赵海龙
- 作品数：8 被引量：16H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于SARS-CoV N蛋白稳定表达细胞株的间接免疫荧光检测方法的建立
- SARS作为烈性呼吸道传染病,其病原检测需在BSL-3级生物安全实验室中进行。免疫荧光法(IFA)不但可检测病毒特异抗原,也可检测病毒特异抗体,尤为重要的是,基于稳定表达病毒特异蛋白的细胞株而建立的免疫荧光方法,可在普通...
- 赵海龙姜涛陈水平赵慧邓永强于曼秦鄂德
- 关键词：呼吸道传染病病原检测免疫荧光蛋白抗体
- 文献传递
- 基于N蛋白稳定表达细胞株的SARS-CoV间接免疫荧光检测方法的建立
- 2007年
- 目的:建立基于SARS-CoVN蛋白稳定表达细胞系的间接免疫荧光法,以在普通实验室对SARS-CoV特异抗体进行检测。方法:将含有SARS-CoVN基因的重组质粒通过脂质体转染BHK-21细胞,筛选稳定表达细胞系并制备间接免疫荧光抗原片,以鼠抗SARS血清进行检测,并以其他呼吸道病毒抗体评估其特异性。结果与结论:建立了可检测SARS-CoV抗体的基于SARS-CoVN蛋白稳定表达重组细胞系的间接免疫荧光法,检测其他呼吸道病毒抗体为阴性,特异性良好。该间接免疫荧光法为SARS-CoV抗体的普通实验室检测提供了快速安全的诊断方法。
- 赵海龙姜涛陈水平赵慧邓永强于曼秦鄂德
- 关键词：SARS冠状病毒N蛋白免疫荧光
- 重要呼吸道病毒快速检测方法的建立
- 呼吸道病毒是一组能够通过呼吸道引起呼吸系统或及其他系统疾病的病毒病原。呼吸道病毒的传播方式决定了容易引发大流行如流感病毒和SARS病毒感染，对这类病毒的快速检测对于采取有效的防范和治疗措施极为重要。
本研究首先...
- 赵海龙
- 关键词：呼吸道病毒病毒检测免疫荧光
- 文献传递
- SARS_CoV中国株基因组全长cDNA的构建及其恢复病毒的生物学性质被引量：3
- 2006年
- 严重急性呼吸综合征是SARS-CoV引起的一种重要新发传染病,其致病机制的研究对于防治该病十分必要。为了利用反向遗传学技术研究SARS-CoV的致病机制,将覆盖SARS-CoVBJ01株基因组全长的7个cDNA片段纯化后进行体外连接,构建基因组全长cDNA分子,以其为模板,使用T7RNA聚合酶系统在体外进行转录,获得病毒RNA。用电穿孔转染法将转录体RNA导入VeroE6细胞,可观察到典型的SARS-CoV致细胞病变作用。对收获的恢复病毒采用RT-PCR方法进行鉴定,结果表明获得的恢复病毒与SARS-CoVBJ01株原病毒序列一致。以针对SARS-CoV的抗体对感染细胞作间接免疫荧光反应,证明获得了具有特异感染性的恢复病毒。同时用细胞病变法和空斑试验测定了恢复病毒及其亲本毒株的病毒滴度,结果表明二者在致病性上没有明显差异,恢复病毒具有与原型株相似的生物学特性。SARS-CoVBJ01株基因组全长cDNA的成功构建及对恢复病毒生物学性质的研究将为进一步探索SARS-CoV致病的分子机制及研制新型疫苗奠定良好的基础。
- 韩剑峰姜涛陈水平于曼秦鄂德赵卓李晓峰秦成峰邓永强赵慧赵海龙李晓萸
- 关键词：SARS-COV反向遗传学
- 基于N蛋白稳定表达细胞株的SARS-CoV间接免疫荧光检测方法的建立
- SARS 作为烈性呼吸道传染病,其病原检测需在 BSL-3级生物安全实验室中进行。免疫荧光法(IFA)不但可检测病毒特异抗原,也可检测病毒特异抗体,尤为重要的是,基于稳定表达病毒特异蛋白的细胞株而建立的免疫荧光方法,可在...
- 赵海龙姜涛陈水平赵慧邓永强于曼秦鄂德
- 文献传递
- 3种重要呼吸道病毒病原的多重实时PCR检测
- 呼吸道合胞病毒(BSV)、甲型流感病毒(IA)和SARS冠状病毒(SARS-CoV)分别属于副粘病毒科、正粘病毒科和冠状病毒科,它们主要通过气溶胶传播。呼吸道合胞病毒在临床呼吸道检测标本中所占比例最高,且致病性较强。甲型...
- 赵海龙姜涛邓永强陈水平李晓峰于曼秦鄂德
- 关键词：呼吸道病毒呼吸道传染病
- 文献传递
- 多重实时PCR检测三种呼吸道病毒被引量：4
- 2007年
- 目的建立多重实时PCR检测体系可同时快速检测引起人呼吸道感染的甲型流感病毒(IAV)、呼吸道合胞病毒(RSV)和SAPS冠状病毒(SARS-CoV)。方法通过对PCR反应条件的优化,建立了同时检测IAV、RSV和SARS-CoV的多重实时PCR方法。结果经熔解曲线分析,证实了该法可同时或分别检测3种重要呼吸道病毒。检测灵敏度分别为10^(0.7)TCID_(50)/ml、1 TCID_(50)/ml和10^(-0.5) TCID_(50)/ml。采用相同的反应体系和条件,分别对其他7种呼吸道病毒(包括乙型流感病毒,副流感病毒2型,柯萨奇病毒B3和B5血清型及腺病毒2、3和7血清型)进行扩增,均未检测出扩增产物。此种方法可在4h内完成。结论建立的多重实时PCR检测方法适用于3种重要呼吸道病毒的快速检测。
- 赵海龙姜涛邓永强陈水平李晓峰于曼秦鄂德
- 关键词：甲型流感病毒呼吸道合胞病毒SARS冠状病毒
- 重要呼吸道病毒病原的多重RT-PCR检测被引量：11
- 2006年
- 目的建立一种可同时快速检测引起人呼吸道感染的重要病毒病原的检测方法。方法通过对PCR反应条件的优化,建立同时检测甲型流感病毒(IA)、呼吸道合胞病毒(RSV)和SARS冠状病毒(SARS-CoV)的多重RT-PCR方法。结果该法可同时或分别扩增IA258bp、RSV348bp和SARS-CoV438bp的基因片段。检测的敏感性分别为101.7TCID50/ml、10TCID50/ml和101·5TCID50/ml。采用相同的反应体系和条件,分别对其他7种呼吸道病毒(包括乙型流感病毒,副流感病毒2型,柯萨奇病毒B3和B5血清型及腺病毒2、3和7血清型)进行扩增,均未检测出扩增产物。结论此种多重RT-PCR法可在6h内完成,适用于三种重要呼吸道病毒的快速甄别。
- 赵海龙姜涛陈水平赵慧李晓峰秦成峰于曼秦鄂德
- 关键词：多重RT-PCR流感病毒A型呼吸道合胞病毒SARS病毒
