袁磊
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金解放军总医院科技创新苗圃基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 靶向CD19的CAR修饰的NK细胞对B细胞淋巴瘤的杀伤被引量：2
- 2016年
- 目的:利用鼠杂交瘤技术筛选和制备治疗性CD19单克隆抗体,探讨以CD19 scFv序列构建CD19-CAR(p CD19-CAR)修饰的NK细胞对CD19^+B细胞淋巴瘤细胞的杀伤作用。方法 :用偶联多肽免疫小鼠制备CD19单克隆抗体,然后用基因测序法获得抗体的序列。分析抗体序列,并通过基因合成和分子克隆技术构建pCD19-CAR片段,然后将其克隆到慢病毒载体上,病毒包装制备后,转染NK-92MI细胞。最后,用流式细胞术检测不同的pCD9-CAR-NK-92MI细胞对CD19^+细胞的杀伤率。结果:(1)成功筛出特异性强的CD19单克隆抗体-pCD19;(2)抗体检测结果显示CD19+的Ramos细胞的阳性率为84.3%,Raji为85.6%,与商业化抗体结果相似;(3)被pCD19-CAR修饰的CD19-CAR阳性率为28.72%的NK-92MI细胞对CD19^+的Ramos和Raji细胞的杀伤效率明显高于未被修饰的NK-92MI细胞株对Ramos和Raji细胞的杀伤率[(47.1±1.7)%vs(24.7±6.2)%和(51.8±7.9)%vs(27.6±9.6)%,均P<0.05];对CD19-细胞Jurkat,不论是未被pCD19-CAR修饰的NK-92MI或是被修饰的NK-92MI细胞,几乎都不存在特异性杀伤作用[(16.1±0.7)%vs(17.7±2.9)%,P>0.05]。结论:成功构建pCD19-CAR,被pCD19-CAR修饰的NK-92MI细胞能特异性的识别CD19抗原并杀伤CD19^+B细胞淋巴瘤细胞。
- 袁园秦扬游凤涛陈丹邹建炫朱学军李炳宗袁磊孟会敏张波桢安钢力杨林
- 关键词：CD19B细胞淋巴瘤
- 嵌合抗原受体修饰的NK-92MI细胞对HER2阳性乳腺癌细胞的杀伤被引量：3
- 2016年
- 目的:探讨用特异性靶向HER2抗原的嵌合抗原受体(HER2-CAR)修饰的NK-92MI细胞对HER2阳性乳腺癌细胞的杀伤效率。方法:通过PCR获得HER2-CAR片段,运用常规分子克隆技术,将其构建到慢病毒载体上,利用包装的慢病毒颗粒对NK-92MI细胞进行转染;应用流式细胞术检测细胞转染效率以及转染前后NK-92MI的IFN-γ和颗粒酶分泌差异;使用7-AAD和流式细胞术体外检测HER2-CAR-NK92MI细胞对乳腺癌细胞的杀伤效率;构建小鼠乳腺癌原位肿瘤模型进行体内细胞毒性的检测。结果:用HER2-CAR修饰的NK-92MI细胞对HER2阳性乳腺癌肿瘤细胞MCF-7和T47D的杀伤效率明显高于未被基因修饰的NK-92MI细胞[分别为(62.4±1.3)%vs(22.1±1.2)%和(50.0±1.9)%vs(16.9±0.6)%,P<0.01];而两者对HER2阴性的乳腺癌细胞MDA-MB-468的杀伤效率没有明显差异[(13.6±1.4)%vs(12.7±0.8)%,P>0.05]。同时,经HER2-CAR修饰的NK-92MI细胞相比未被基因修饰的NK-92MI细胞,IFN-γ的分泌明显升高(P<0.01)。结论:经HER2-CAR修饰的NK-92MI细胞对HER2阳性乳腺癌细胞的杀伤效率明显提高,且具有特异性靶向,此为治疗乳腺癌等恶性肿瘤提供了临床依据。
- 孔潇秦扬李甲璐游凤涛朱学军袁磊孟会敏安钢力杨林
- 关键词：乳腺癌细胞
- 单中心191例健康供者应用G-CSF动员造血干细胞的影响因素分析被引量：10
- 2013年
- 本研究旨在探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员外周血造血干细胞的影响因素及对健康供者的影响。181例志愿健康供者应用G-CSF 5-10μg/(kg.d)动员,10例应用G-CSF 3.3-4.9μg/(kg.d)动员,12 h 1次,连续动员4-5 d;采集、检测外周血中单个核细胞(MNC)数与CD34+细胞数,并观察供者动员及采集过程中的不良反应。结果表明,与动员前相比,动员后(采集前)供者外周血白细胞数平均升高7倍(P<0.01);血小板数明显下降(P<0.01);血红蛋白含量无明显差异性。动员第4或5天采集效果无差异。男性供者采集的MNC、CD34+细胞数高于女性(P<0.01),高体重供者采集的MNC、CD34+数高于低体重供者,年龄对采集效果无明显影响。G-CSF剂量与采集效果无线性关系。供者不良反应轻微。结论:G-CSF可以有效动员外周血造血干细胞,供者无明显的不良反应。
- 王倩袁磊李红华赵瑜黄文荣薄剑王书红朱海燕窦立萍王全顺于力靖彧
- 关键词：粒细胞集落刺激因子供者外周血造血干细胞
- 伴CBFB-MYH11阳性的急性髓系白血病的临床分析被引量：5
- 2013年
- 本研究旨在探讨伴CBFB-MYH11阳性的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)的临床特征。回顾性分析293例AML中12例伴CBFB-MYH11阳性的急性髓系白血病患者的临床资料,包括性别、年龄、临床特点、免疫表型、治疗方案、疗效及预后。结果表明,在293例AML患者中伴CBFB-MYH11者占4%(12/293);本组12例发病中位年龄为32.5(21-57)岁;FAB分型为M4Eo 8例(66.7%),M4 4例(33.3%);初诊时中位白细胞数为19.8×109/L(2.46-164.3×109/L),WBC数的大于100×109/L者占16.7%(2/12);12例患者中,经1个疗程治疗达到完全缓解(CR)者10例(83.3%),经2个疗程治疗达CR者2例(16.7%),总CR率为100%;5年的RFS率和OS率分别为80%和83%。结论:伴CBFB-MYH11的患者多为FAB分型中的M4Eo或M4型,细胞多表达CD33、CD34、CD117、HLA-DR、CD15、CD64、CD14,伴CBFB-MYH11者诱导治疗完全缓解率高,总体生存时间及无复发生存时间长。
- 曹婷婷周敏航袁磊王倩窦立萍徐媛媛王楠王莉莉于力靖彧
- 关键词：急性髓系白血病化疗造血干细胞移植预后
- 异基因外周血造血干细胞移植治疗成人T淋巴母细胞淋巴瘤14例疗效观察
- 2016年
- 目的:探讨异基因外周血干细胞移植治疗成人T淋巴母细胞淋巴瘤的疗效。方法:收集14例异基因外周血干细胞移植治疗的成人T淋巴母细胞淋巴瘤患者的临床资料,回顾性分析造血重建,生存和复发情况及1、3、5年总生存率(OS)和无事件生存率(EFS)。结果:所有患者中性粒细胞均成功植入,中性粒细胞>0.5×10~9/L的中位时间为13(10-19)d,13例患者血小板成功植入,血小板>20×10~9/L的中位时间为17(12-62)d。发生急性GVHD 6例,其中3度以上急性GVHD 1例,14例患者中发生慢性GVHD 5例。100 d内移植相关死亡1例,死因为冠心病和肺部感染。中位随访时间为26.5个月,1、3、5年预期总生存率分别为85.7%、47.6%及38.1%,EFS分别为85.7%,34.1%,34.1%。复发率42.8%,中位复发时间为移植后22.5个月。至今存活7例患者,其中1例无病生存达103个月。结论:异基因外周血造血干细胞移植治疗成人T淋巴母细胞淋巴瘤是一种比较安全、有效的方法。
- 魏华萍赵小利黄文荣薄剑李红华赵瑜朱海燕靖彧袁磊王利谷振阳杨楠王飞雁王全顺刘代红于力高春记
- 关键词：淋巴瘤T淋巴母细胞淋巴瘤异基因外周血造血干细胞移植
- 多发性骨髓瘤细胞中P53介导的Ran转录调控的研究
- 研究背景:多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是浆细胞起源的恶性血液系统疾病，导致相关器官或组织损伤。欧美国家发病率15000例/年左右，中位生存期约为4-5年。尽管新药治疗MM的疗效在过去十年得到显著...
- 袁磊
- 关键词：多发性骨髓瘤P53基因转录活性基因调控
- 文献传递
