袁忠民
- 作品数：38 被引量：46H指数：4
- 供职机构：广州医科大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广州市医药卫生科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程文化科学更多>>
- 胶质瘤中MKK7与c-Jun磷酸化的表达及其相关性被引量：3
- 2019年
- 目的探讨胶质瘤中MKK7和c-Jun磷酸化(p-c-Jun)的表达及意义,分析两者表达的相关性。方法选取弥漫型星形细胞瘤(15例)、少突胶质细胞瘤(5例)、间变性星形细胞瘤(11例)、间变性少突胶质细胞瘤(8例)、胶质母细胞瘤(53例)及其瘤旁正常脑组织(25例)共117例,采用免疫组织化学法检测MKK7、c-Jun及p-c-Jun的表达。体外培养神经胶质瘤细胞株U87,用脂质体转染MKK4-siRNA、MKK7-siRNA和对照siRNA,48h后Westernblot检测MKK7、c-Jun及p-c-Jun的表达水平。结果胶质母细胞瘤中p-c-Jun及MKK7的表达均明显高于其他组织学类型胶质瘤及胶质母细胞瘤瘤旁正常脑组织中的表达(P=0.000,P=0.000)。随着胶质瘤WHO分级的升高,p-c-Jun及MKK7的表达增高,且与WHO分级呈明显正相关(r=0.494,P=0.000;r=0.606,P=0.000)。胶质瘤及胶质母细胞瘤瘤旁正常脑组织中MKK7与p-c-Jun的表达存在正相关关系(r=0.387,P=0.000)。沉默神经胶质瘤细胞株U87MKK7表达抑制了c-Jun磷酸化水平。结论MKK7可以通过调控JNK/c-Jun活性进而促进胶质母细胞瘤的发生。
- 郅程赖妙玲廖德贵郝卓芳王业忠吴力强刘锶锶曾淑莲黄紫燕陈丹敏袁忠民
- 关键词：胶质瘤胶质母细胞瘤U87
- 抑制HDAC4可改善蛛网膜下腔出血早期脑损伤SD大鼠动物模型中神经行为
- 目的观察在SD大鼠蛛网膜下腔出血动物模型中,抑制HDAC4对早期脑损伤的作用。方法 4批共40只SD大鼠随机分为空白注射组和药物注射组,每组各20只,于SAH造模前24小时分别行侧脑室立体定位注射给药HDAC4抑制剂LM...
- 吴力强肖仕印曹娅莉刘锶锶袁忠民
- 关键词：蛛网膜下腔出血早期脑损伤组蛋白乙酰化
- 文献传递
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂抑制神经胶质瘤细胞增殖的机制研究被引量：4
- 2015年
- 目的 探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂抑制神经胶质瘤细胞株增殖的机制. 方法 分别用0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 μmol/L曲古菌素A（TSA）处理U251细胞48 h,0.5 μmol/L TSA处理细胞8、16、24、36、48 h,1μmol/L M344、0.5 μmol/L LBH589、6 mmol/L NaBu、6 mmol/L VPA处理细胞48 h,对照组加入等量溶剂,MTT法检测细胞存活率;Western blotting检测0.5 μmol/L TSA处理U251细胞8、16、24 h后c-Jun氨基末端激酶（JNK）、磷酸化JNK （p-JNK）蛋白的表达;Westernblotting、MTT法分别检测对照组、10 μmol/L SP600125组和1μmol/L CEP11004组细胞c-Jun、p-c-Jun蛋白的表达和细胞存活率;Western blotting、MTT法分别检测转染pcDNA3.1组、转染pcDNA3.1 ＋TSA组、转染pMKK7-JNK1组、转染pMKK7-JNK1 ＋TSA组细胞p-c-Jun、Flag蛋白的表达和细胞存活率. 结果 0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 μmol/L TSA组细胞存活率低于对照组,且TSA浓度越高,细胞存活率越低,半数抑制浓度（IC50）为0.5μmol/L;0.5 μmol/L TSA处理16、24、36、48 h后细胞存活率低于对照组,且处理时间越长,细胞存活率越低;1 μmol/L M344、0.5 μmol/L LBH589、6 mmol/L NaBu、6 mmol/L VPA组细胞存活率低于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.0.5 μmol/L TSA处理16h和24 h后细胞p-JNK蛋白水平显著降低;10 μμmol/L SP600125、1μmol/L CEP11004组细胞p-c-Jun蛋白的表达降低;10 μmol/L SP600125、1μmol/L CEP11004组细胞存活率低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;与转染pcDNA3.1组比较、转染pMKK7-JNK1组细胞存活率增加,与转染pcDNA3.1 ＋TSA组比较,转染pMKK7-JNK1 ＋TSA组细胞存活率增加,差异有统计学意义（P＜0.05）. 结论 组蛋白去乙酰化酶抑制剂抑制神经胶质瘤增殖的机制包含抑制JNK活性.
- 伍健伟梁建峰何伟文袁忠民
- 关键词：神经胶质瘤曲古菌素AJNK细胞增殖
- ATF2与c-Fos对c-Jun介导的神经元凋亡的调控作用
- 本论文的主体内容拟解决以下问题：
(1)撤钾诱导小脑颗粒神经元凋亡时，c-Jun主要与ATF2还是c-Fos形成二聚体?
(2)这个二聚体对凋亡是否必需?
(3)ATF2与c-Fos在c-J...
- 袁忠民
- 关键词：老年性痴呆症退行性疾病神经元凋亡钾元素
- 文献传递
- siRNA沉默兔bFGF基因表达对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨利用RNAi技术沉默bFGF基因抑制兔血管平滑肌细胞增殖的作用。方法:针对兔bFGF基因的mRNA序列合成siRNA,然后构建携带bFGF-siRNA的质粒载体,将其转染体外培养的VSMC,分别用MTT法、流式细胞术分析细胞增殖率和凋亡率的变化,免疫细胞化学染色观察细胞PCNA的表达变化,同时用RT-PCR检测细胞转染前后bFGF基因表达量的变化。结果:表达bFGF-siRNA的质粒载体转染后VSMC增殖能力减弱,凋亡增加,bFGF的mRNA表达量明显减弱。结论:利用bFGF-siRNA质粒表达载体沉默bFGF基因mRNA能抑制VSMC的增殖。
- 李明昌袁忠民陆永建柯炎斌
- 关键词：RNA干扰血管平滑肌细胞基因治疗
- 抑癌基因Deleted in Liver Cancer1在人胶质瘤细胞株中的作用及机制
- 2009年
- 目的探讨抑癌基因DLC1表达的isoform1及isoform2两个亚型在人胶质瘤细胞株中的表达、功能及机制。方法RT-PCR方法检测体外培养的胶质瘤细胞株U87-MG和SHG-44中DLC1isoform1,2的mRNA水平;10μM5-aza-2'-de-oxycytidine(5'-AZA)或者共含有500nMtrichostatinA(TSA)处理细胞36h,检测DLC1isoform1,2的表达;MTT方法检测转染DLC1isoform2及没有GAP活性的isoform2突变体DLC1-K714E表达质粒对胶质瘤细胞株U87-MG和SHG-44增殖的影响。结果在U87-MG细胞株中没有检测到DLC1isoform1;在SHG-44中检测到微量的DLC1isoform1,5'-AZA或者共含有TSA处理使其表达上调;DLC1isoform2在上述细胞株都能检测到,5'-AZA或者共含有TSA处理细胞未改变其表达水平;过表达DLC1isoform2及其突变体DCL1-K714E促进U87-MG和SHG-44细胞株增殖。结论DLC1isoform1在胶质瘤细胞株中不表达或低表达,可能原因是由于不转录或者启动子发生甲基化。DLC1isoform2有一定的表达水平,高表达的DLC1isoform2促进胶质瘤细胞增殖,且不依赖GAP活性。
- 袁忠民李明昌杜汉强陆永建
- 关键词：胶质瘤细胞株
- 组蛋白去乙酰化酶抑制剂对胶质瘤细胞增殖及MKK7表达的影响被引量：2
- 2016年
- 目的探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACI)对胶质瘤细胞增殖及MKK7表达的影响。方法体外培养神经胶质瘤细胞株U251,用脂质体转染MKK7-si RNA1、MKK7-si RNA2和对照si RNA,48 h后Western blot检测MKK7表达及JNK/c-Jun活性,Brd U掺入实验检测细胞增殖情况;用0.5μM组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(trichostatin A,TSA)处理细胞8 h,DMSO作对照,Western blot检测MKK7、p-JNK、JNK、p-c-Jun、c-Jun表达或磷酸化水平;用TSA分别处理细胞8、12、24 h,检测各时间点细胞增殖率;用其他组蛋白去乙酰化酶抑制剂包括伏立诺他(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA),丙戊酸(valproic acid,VPA),M344处理细胞检测MKK7表达及细胞增殖。结果同对照组相比,沉默MKK7表达抑制了JNK/c-Jun活性和细胞增殖(P=0.008);TSA处理细胞8 h显著抑制MKK7表达及JNK/c-Jun活性,SAHA、M344、VPA均显著抑制MKK7表达。TSA处理细胞8 h没有抑制细胞增殖,处理12 h显著抑制增殖(P=0.006),24 h抑制效应更明显(P=0.002);SAHA(P=0.001),M344(P=0.008)或VPA(P=0.002)处理细胞12 h均抑制了细胞增殖。结论组蛋白去乙酰化酶抑制剂可通过抑制MKK7表达抑制神经胶质瘤细胞增殖。
- 袁忠民曾敏灵唐晓梅伍燕娜何国振
- 关键词：神经胶质瘤组蛋白去乙酰化酶抑制剂增殖
- 浅谈出国留学的几点感想
- 2016年
- 每年有大批留学人员出国学习先进的理论和技术,但也有相当一部分人并没有达到预定的学习目的。结合本人赴美留学1年半的一些经历和心得,总结几点感想和建议供将要出国深造或正在留学的人员参考:明确学习目的;选准合作导师;勤于沟通,善于学习,精于凝练;顺应管理,融入学术氛围。
- 袁忠民
- 关键词：留学
- 他喹莫德对人胶质母细胞瘤细胞恶性表型的影响及相关机制
- 2023年
- 目的 探索他喹莫德(Tasquinimod,Tasq)对胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,GBM)细胞增殖、迁移、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)、干细胞特性等恶性表型的影响及相关机制,为开发Tasq作为潜在治疗GBM的药物提供研究基础。方法 通过CCK-8法、细胞凋亡染色、Transwell实验、克隆形成实验评价Tasq对不同GBM细胞系(U87、U251)增殖、凋亡、迁移和集落形成的影响;Western blot检测凋亡、EMT等相关蛋白的表达情况。利用肿瘤干细胞成球实验检测Tasq对胶质瘤干细胞(glioma stem cell,GSC)球体形成能力的影响,免疫荧光染色和Western blot检测GSC中干细胞特性相关蛋白的表达情况。结果 Tasq呈浓度依赖性和时间依赖性抑制U87和U251的增殖;Tasq能抑制U87和U251迁移和集落形成,诱导其发生凋亡;Tasq促进凋亡蛋白Cleaved Caspase-3表达的同时下调抗凋亡蛋白BCL-2和EMT相关蛋白(Snail、Vimentin)的表达;Tasq能显著降低GSC的成球能力及干细胞特性相关蛋白(SOX2、Nestin)的表达,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 Tasq能在体外抑制GBM细胞增殖、迁移、集落形成,诱导其凋亡,Tasq可能通过抑制GBM细胞的EMT和干细胞特性抑制其恶性进展。
- 柳晓蕊袁忠民郅程张媚媚简晓顺彭怀东
- 关键词：胶质母细胞瘤细胞上皮间质转化干细胞特性
- DLC1基因在人脑胶质瘤组织中的表达被引量：2
- 2010年
- 目的 探讨抑癌基因DLC1在人脑胶质瘤组织中的表达和功能.方法 收集广州医学院第二附属医院神经外科自2007年1月至2009年6月手术切除的胶质瘤标本39例及同期行颅脑减压术治疗的颅脑损伤患者的正常脑组织10例,实时荧光定量PCR检测DLC1 mRNA的表达;将质粒pCS2-DLC1转染体外常规培养的人胶质瘤细胞株U251,同时用空载体pCS2-MT转染作为对照组,转染后36 h应用Western blot检测DLC1表达标签蛋白Mvc,应用MTT检测U251细胞增殖能力的变化.结果实时荧光定量PCR结果显示胶质瘤组织中DLC1 mRNA表达水平高于对照组,差异有统计学意义（P=0.000）,且Ⅰ级胶质瘤组织DLC1 mRNA的表达水平高于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级,差异有统计学意义（平均秩次分别为44.20、30.23、32.25、31.0,H=18.818,P=0.001）;Western blot检测结果显示DLC1标签蛋白Mvc在pCS2-DLCI转染组细胞呈过表达,在pCS2-MT转染组细胞无明显表达;MTT检测显示pCS2-DLC1转染组U251细胞吸光度值高于pCS2-MT转染组,差异有统计学意义（P=0.002）.结论 高表达的DLC1可能促进胶质瘤的形成和发展.
- 袁忠民李明昌杜汉强陆永建
- 关键词：细胞增殖
