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用髓鞘碱性蛋白建立豚鼠变态反应性脑脊髓炎模型: 2004年; 目的 :用髓鞘碱性蛋白 (MBP)诱导实验性变态反应性脑脊髓炎 (EAE)豚鼠模型。方法 :提取MBP并经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)鉴定后 ,用MBP +完全弗氏佐剂 (CFA)免疫豚鼠 ,观察豚鼠的临床症状和中枢神经系统 (CNS)的病理改变。结果 :实验组豚鼠均表现出典型的EAE症状 ,发病率为 10 0 % ,并在光镜下可见CNS血管周围炎性细胞浸润和白质脱髓鞘病理改变。结论 :用MBP +CFA成功地诱导了豚鼠的EAE模型 ,具有模型稳定、发病率高、动物价廉易得的优点 ,是研究多发性硬化 (MS); 陈明琪李虹庄永华蒋中华贾怡李明远; 关键词：实验性变态反应性脑脊髓炎髓鞘碱性蛋白自身免疫性疾病

2种纯化流感病毒方法的比较研究被引量：16: 2005年; 目的比较2种纯化浓缩鸡胚尿囊液中流感病毒方法。方法将流感病毒鸡胚尿囊液分别采用蔗糖密度梯度离心法(sucrose density gradient centrifugation,SDGC)和红细胞吸附释放法(absorptionandrelease RBC,AR RBC)进行纯化,收集纯化病毒测定血凝效价,比较2种纯化方法。结果SDGC法纯化病毒可在30%和45%蔗糖层面交界处的区带中检测到流感病毒,血凝效价为1∶2560;用AR RBC法纯化病毒过程中用新鲜鸡红细胞出现了溶血现象,而用甲醛处理过的鸡红细胞则无此现象,血凝效价均为1∶2560。结论与SDGC法纯化病毒比较,AR RBC法是一种经济实用、操作简便并有较高纯化效率的方法,尤以甲醛处理过的鸡红细胞纯化效果最好。; 曹康张卫东施桥发李虹蒋中华李明远; 关键词：鸡胚

非分型流感嗜血杆菌Hap_s蛋白的分离纯化被引量：2: 2007年; 目的优化非分型流感嗜血杆菌Haps蛋白质片段的分离纯化方法。方法采用盐析、透析脱盐、超滤浓缩、弱阳离子交换柱Hitrap CM Sepharose Fast Flow层析纯化Haps蛋白,优化Haps蛋白质片段的洗脱条件,包括pH值和离子强度,测定各洗脱液样品在280nm波长处的光吸收值(D280),用折线图显示,SDS-PAGE电泳检测分布图中处于峰值的样品,观察目的蛋白条带的出现。结果弱阳离子交换柱Hitrap CM Sepharose Fast Flow层析纯化HapS蛋白,缓冲液1洗脱液的D280分布为基线,缓冲液2洗脱液的D280分布折线图中有峰值出现,但峰有拖尾,SDS-PAGE电泳检测该洗脱峰主要为低分子量的蛋白条带;五种不同离子强度的缓冲液3洗脱液在100mmol/LNaCl离子强度时,D280的分布折线图显示有较高洗脱峰出现,SDS-PAGE电泳检测该洗脱峰有较明显的110000D的目的条带,其余离子强度下均未见明显洗脱峰出现。结论Sepharose CM FF层析柱分离纯化HapS蛋白质片段时,不同pH值的缓冲液对目的蛋白的洗脱没有明显影响,而主要影响杂蛋白的洗脱;100mmol/LNaCl离子强度的缓冲液3洗脱液获得较好的洗脱效果。; 李婉宜邝玉李明远杨远蒋中华姚锋陈长春; 关键词：蛋白纯化

小鼠beta-防御素2真核表达载体的构建及表达被引量：1: 2011年; 构建小鼠beta-防御素2(murie beta-defensin 2,mBD2)的真核表达载体pcDNA-mBD2,并观察其在真核细胞中的表达。从小鼠肝组织中提取mRNA通过逆转录聚合酶链反应扩增得到mBD2基因,定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)获得pcDNA-mBD2;经酶切和测序鉴定构建正确,应用脂质体法转染siha细胞,并通过蛋白免疫印迹法检测细胞内mBD2的表达。结果显示,构建了小鼠mBD2的真核表达载体,转染siha细胞培养并采用G418稳定筛选后,获得稳定转染细胞,收集并裂解转染细胞,蛋白免疫印迹法检测到转染细胞内mBD2的表达。成功构建了真核表达载体pcDNA-mBD2,为研究mBD2在宫颈癌发生发展过程中的作用及作用机制奠定基础。; 魏晓丽温浩金一帮蒋中华李明远; 关键词：真核表达逆转录聚合酶链反应蛋白免疫印迹

大鼠γ-干扰素诱导蛋白-10在大肠杆菌中的表达和鉴定被引量：4: 2006年; 目的原核表达大鼠γ干扰素诱导蛋白10,并对其进行鉴定。方法从大鼠脾细胞中提取RNA,用RTPCR方法得到IP10cDNA,双酶切将其插入pET32a(+)载体中。重组质粒pET32a(+)IP10经酶切、PCR及测序鉴定后转化大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。结果所获得的大鼠IP10克隆,经测序与GenBank报道的完全一致。所表达的产物经SDSPAGE和Westernblot分析获得证实。结论已成功构建原核表达载体pET32a(+)IP10,并使其在大肠杆菌中获得了融合表达。; 代吕霞祁志荣李明远蒋中华张林李虹; 关键词：克隆原核表达

小鼠IL-18真核表达质粒的构建及其生物学活性的鉴定被引量：1: 2005年; 目的构建小鼠白细胞介素18(interleukin18,IL-18)的真核表达质粒,并检测其表达的IL-18的生物学活性。方法采用RT-PCR获得小鼠IL-18基因,通过EcoRⅠ和HindⅢ双酶切及连接反应,构建pEGFP-mIL-18真核表达载体,重组载体经过限制性内切酶、PCR及DNA序列测定等证实连接片段的正确性后,转染HEK293细胞系,荧光显微镜观察GFP-mIL-18融合蛋白的表达,收集转染后72h的上清液,MTT法检测上清液中IL-18表达产物的生物学活性。结果酶切分析、PCR鉴定、DNA测序表明成功地构建了pEGFP-mIL-18真核表达载体,MTT法证明表达产物有刺激小鼠脾细胞增殖的功能。结论所获pEGFP-mIL-18真核表达载体能在体外表达具有生物学活性的IL-18,为进一步研究IL-18的功能和运用奠定了基础。; 贾静李虹李明远吕梅励杨志惠陈文捷贾怡蒋中华张林; 关键词：白细胞介素18 融合蛋白真核表达

不可分型流感嗜血杆菌重组Hap蛋白免疫抗小鼠急性感染的实验研究被引量：1: 2010年; 目的：观察重组Hap蛋白免疫抗不可分型流感嗜血杆菌（NHTi）感染的免疫保护效果，初步探讨其保护机制。方法：用纯化的Hap重组蛋白与黏膜免疫佐剂霍乱肠毒素B亚单位（CT-B）联合鼻腔免疫C57BL／6小鼠。NHTi琼脂珠悬液对免疫小鼠进行气管内注射，建立小鼠NHTi急性肺部感染模型。NHTi攻击5d后，收集实验小鼠的支气管肺泡灌洗液（BALF）进行白细胞计数，并取其肺组织进行肺部荷菌数检测及肺组织的病理检测。结果：Hap重组蛋白与CT—B的联合免疫能显著降低小鼠BALF中的白细胞总数、中性粒细胞渗出（P〈0．05）及感染小鼠肺组织内NTHi的荷菌数，并减轻感染小鼠支气管、细支气管周围及肺泡内的炎性浸润程度，明显改善其肺组织的病变。结论：鼻腔免疫的Hap重组蛋白在动物体内能发挥良好抗NTHi感染的免疫保护作用，为NTHi新型疫苗的研发提供了理论基础和实验依据。; 李婉宜王保宁左凤琼曾蔚丰锋邝玉蒋中华李明远; 关键词：黏膜免疫

基于层次注意力神经网络的结核分枝杆菌耐药性预测方法及装置: 本发明公开了一种基于层次注意力神经网络的结核分枝杆菌耐药性预测方法及装置，涉及生物信息学、深度学习与计算机应用技术领域。本发明利用自然语言处理（NLP）技术解决耐药性预测的问题，将菌株基因上的突变视为词、相应基因中所有突...; 孙群蒋中华于中华陈黎卢永美刘卓翀; 文献传递

牛MBP诱导BALB/c和C57BL/6小鼠实验性变态性脑脊髓炎样反应的研究被引量：4: 2005年; 为了进一步研究实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)动物模型,采用从新鲜牛脊髓中提取的MBP免疫诱导非敏感品系BALB/c小鼠和C57BL/6小鼠,通过对实验动物的症状、中枢神经系统的病理改变及细胞因子水平变化的检测,较成功地建立了C57BL/6、BALB/c小鼠的EAE模型,实验方法稳定可靠。; 贾怡陈文捷李虹张林李明远官鹏蒋中华吕梅励梁伟波周斌; 关键词：C57BL/6 BALB/C 髓鞘碱性蛋白 IFN-Γ

新城疫病毒诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究被引量：8: 2002年; 目的　研究新城疫病毒Lasota株 (NDV -L)杀伤肿瘤细胞及诱导肿瘤细胞凋亡的作用。方法　通过噬斑形成单位、HA效价、MTT法等方法检测NDV -L对细胞的杀伤作用 ;通过Giemsa’s染色法、倒置相差显微镜、透射电镜、DNA凝胶电泳、流式细胞仪检测NDV -L诱导肿瘤细胞凋亡的作用。结果　NDV对肿瘤细胞有选择性杀伤作用。经NDV -L诱导后 ,肿瘤细胞呈现典型的凋亡特征。结论　NDV除通过自身复制直接杀伤肿瘤细胞外 ,还具有诱导肿瘤细胞凋亡的作用。; 李婷李虹肖丽英蒋中华李明远; 关键词：新城疫病毒肿瘤细胞细胞凋亡

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蒋中华

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