李明远 作品数:210 被引量:592 H指数:11 供职机构: 四川大学华西基础医学与法医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 四川省应用基础研究计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 农业科学 更多>>
针对口腔医学专业的医学微生物学实验教学改革尝试 被引量:2 2013年 为了将华西医学基础实验教学中心提出的"以学生为中心、以质量为核心、以能力为导向"的实验教学理念更好融合到医学实践教学环节中,我们针对口腔医学的专业特点对医学微生物学实验课进行了大胆改革。在改革后的课程中设置了名为"认识你所不知道的自己"的全新教学单元,让学生在生动的自我探索过程中,全面了解口腔微生物的特点及其与口腔常见疾病的关系,掌握口腔微生物学研究的常用技术手段、科研思路,也培养了同学们良好的团队合作意识。医学微生物实验课个性化、专业化的巧妙课程设计,大大提高了学生们的学习兴趣,也收获了更加优秀的教学成效。 张菁 曾蔚 邝玉 马巨辉 李明远 李婉宜关键词:医学微生物学 实验教学改革 口腔医学专业 1990年国外独特型免疫网络研究概况 被引量:2 1992年 有关独特型免疫网络的研究,在国外越来越广泛和深入。本文根据医学光盘检索搜集到1990年国外有关独特型免疫网络研究的资料,包括自身免疫性疾病、肿瘤、微生物学与寄生虫学、生物受体与器官移植等五个方面。希望有助于同道们了解该年度这一领域研究的动向。 李明远 王道若关键词:免疫网络 独特型 全文增补中 流感病毒多表位核酸疫苗CTB-Eg的构建与细胞转染研究 被引量:1 2015年 目的设计并构建含分子内佐剂的流感病毒多表位核酸疫苗CTB-Eg,初步研究其在HEK293T细胞中的转染效率。方法通过生物信息学软件设计并合成了含分子内佐剂的流感病毒多表位基因CTB-Eg,将其插入真核载体pEGFP-C2中,获得了重组质粒pEGFP-C2/CTB-Eg;用脂质体法转染HEK293T细胞,通过荧光显微镜观察和PCR法检测其转染效率。结果成功构建了真核表达质粒pEGFP-C2/CTB-Eg,且该重组质粒能在HEK293T细胞中瞬时转染,转染效率在50%~70%之间。结论本研究成功设计、构建了CTB-Eg融合基因,其在HEK293T细胞中转染效率较高,为流感病毒多表位核酸疫苗CTB-Eg在小鼠体内的抗病毒作用研究奠定了坚实基础。 寇静远 潘兴 李婉宜 邝玉 周琳琳 杨靖 石新丽 陆顺顺 黄筱钧 邓昭敏 秦臻 王保宁 李明远关键词:流感病毒 多表位基因 霍乱毒素B亚单位 小鼠β防御素1与甲型流感病毒M2e融合基因表达及其免疫特性研究 2010年 目的构建mBD1与M2e融合基因的真核表达载体,并检测其在MDCK细胞中的表达情况,初步探讨其免疫特性。方法利用PCR方法分别扩增mBD1与M2e基因片段,再通过重叠延伸PCR技术(SOE-PCR)将mBD1与M2e通过一段多肽接头Gly4Ser连接为融合基因mBD1-M2e。将该融合基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+)获得重组质粒pcDNA3.1(+)/mBD1-M2e,经酶切、PCR及测序鉴定正确后,用脂质体转染MDCK细胞,通过免疫荧光、RT-PCR产物序列分析检测融合蛋白表达情况,最后采用MTT法检测mBD1-M2e融合蛋白刺激淋巴细胞增殖能力。结果经鉴定后证实构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)/mBD1-M2e正确,该重组质粒能在MDCK细胞中稳定表达,该细胞培养上清液能刺激淋巴细胞增殖。结论本研究成功构建mBD1-M2e融合基因的真核表达质粒,并证实其融合蛋白能在MDCK细胞中稳定表达,这一结果为进一步研究新型高效通用的流感病毒核酸疫苗奠定了坚实的基础。 张强 丰锋 左斌 巩天祥 李婉宜 王保宁 李明远关键词:甲型流感病毒 Β防御素 融合基因 重叠延伸PCR 免疫荧光 医学微生物学引导式教学模式的应用研究 为了提高教学质量,适应现代医学教育的需要,培养高素质的医学人才,我们在医学微生物学的教学实践中,采用引导式教学模式,启发培养学生的多向思维能力、创新能力和开拓精神,取得了良好的教学效果. 李婉宜 李明远 李虹 杨远关键词:医学微生物学 引导式教学 多向思维能力 教学质量 高等医学教育 文献传递 甲型流感病毒核蛋白的表达与鉴定及其B细胞表位的预测 2013年 目的构建甲型流感病毒核蛋白(nucleoprotein,NP)的原核表达载体,诱导NP融合蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定;预测人NP蛋白的B细胞抗原表位。方法以pcDNA3.1(+)/NP为模板,利用PCR方法扩增目的片段NP,再将此片段插入原核表达载体pET-32a(+),并进行PCR鉴定、酶切鉴定和测序鉴定,将鉴定正确的质粒转入表达菌Rosetta-gami(2)中,用异丙基-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导融合蛋白的表达,用SDS-PAGE和Western Blot检测表达产物。按Chou-Fasman和Gamier-Robson方法预测其编码蛋白的二级结构,采用Karplns-Schulz方法预测蛋白骨架区的柔韧性;用Kyte-Doolittle方法预测其亲水性,Emini方法预测蛋白质表面可能性及Jameson-Wolf方法预测抗原性指数。结果成功构建了流感病毒核蛋白(NP)的原核表达载体,经SDS-PAGE检测NP蛋白得到了表达,Western Blot证明表达的重组蛋白具有免疫活性。在蛋白质第6~11、79~91、241~248和319~326区段附近很可能为B细胞表位优势区域。结论流感病毒核蛋白的表达及B细胞表位的预测为流感病毒的快速诊断试剂的研发工作提供了基础。 李莎 刘冯欢 李明远 李燕 张菁 杨靖 丁娜娜 李婉宜 王保宁关键词:流感病毒 核蛋白 B细胞表位 病毒感染与病毒受体 被引量:3 1989年 一、引言受体这一概念最早是由著名化疗学家Ehrlich在1909年提出的。他认为受体是一些特殊的化学基因,能与某些药物发生结合,并初步提出了“锁与钥匙,(Key and Lock)学说。继后,许多学者深入进行了这方面的研究,均认为受体是一些特殊结构,能与环境中相对应的物质(称配体)发生特异结合并产生一定生物效应。受体有膜上和膜内之分,它与配体的结合如同底物和酶,抗原和抗体的结合一样,具有高度特异性,高度亲和力,可逆性及饱和性。七十年代以来,由于同位素、荧光素标记及亚细胞成分的分离纯化等新技术的应用,使受体研究有了重大突破,不仅对受体可进行定位研究,还可进行定量分析,有的已深入到分子水平。随着受体研究的深入,新的受体不断被发现,其应用也不断扩大。如通过激素受体的检测,对阐明某些肿瘤的病因,预测肿瘤的预后,为治疗的选择提供了可靠依据。又如通过抗受体抗体的检测,对突眼性甲亢(Grave″s病),胰岛素抗性糖尿病。 李明远关键词:病毒感染 病毒受体 幽门螺杆菌尿素膜通道基因的克隆和表达 被引量:7 2007年 目的克隆幽门螺杆菌(Hp)尿素膜通道基因(ureI)和构建能表达UreI蛋白的原核表达工程菌,并初步研究产物的表达特性和免疫特性。方法用PCR方法从Hp基因组中克隆ureI基因,构建原核表达重组质粒pET32a/ureI,双酶切和测序鉴定正确后,重组质粒转染大肠杆菌BL21+(DE3),构建高效表达UreI的工程菌BL21+/UreI。不同温度条件下用1.0mmol/LIPTG诱导重组蛋白表达,用SDS-PAGE和Gel-ProAnalyzer4分析重组蛋白的表达,并用Westernblotting对其免疫原性进行分析。结果克隆到约650bp的基因片段,测序结果与GENBANK中对应菌株的ureI序列100%同源,与其他Hp的序列同源性不低于98.5%。工程菌BL21+/UreI含完整的ureI基因。在37℃、1.0mmol/LIPTG诱导14h后,重组蛋白表达量可达菌体总蛋白的20.2%。分析表明重组蛋白主要以包涵体形式表达,经免疫印迹证实该重组蛋白有一定的免疫反应性和特异性。结论成功构建了HpureI基因的原核表达载体,该载体可高表达有免疫特性的重组蛋白,为进一步研究Hp在胃的定植机制和抗Hp新药奠定了基础。 王保宁 施桥发 李虹 李明远 陈翠萍 郑庆文 蒋忠华 肖丽英关键词:幽门螺杆菌 克隆 基因表达 免疫特性 RNA干扰及其抗病毒作用 被引量:1 2004年 RNA干扰 (RNAi)是一种新发现的通过 ds RNA介导的特异同源靶基因沉默途径。 RNAi主要包括两个步骤 :RNase 样核酸酶切割 ds RNA而生成 2 1- 2 3nt的 si RNA和 si RNA引导 RNA诱导的沉默复合体 (RISC)降解同源性靶基因 m RNA。在某些生物体中 RNAi具有放大效应。通过将 - 2 1nt si RNA导入哺乳动物细胞的 RNAi技术不仅可避免非特异干扰素反应 ,更重要的是还可介导序列特异的基因沉默。最近将 RNAi应用于许多病毒性疾病的治疗研究均取得了显著的基因沉默效果 ,预示 RNAi有望成为一种预防、治疗病毒性疾病的新手段。 庄永华 李明远关键词:RNA干扰 小干扰RNA 基因沉默 抗病毒 重组鼠β-防御素3多肽及其制备方法与用途 本发明通过基因工程技术构建鼠β-防御素3基因(Mbd-3)的原核重组质粒,将原核重组质粒转入工程菌进行诱导高效表达鼠β-防御素3多肽(MBD-3)并进行表达产物的提取、纯化和凝血酶酶切释放出有活性的MBD-3成熟肽。本发... 李明远 江滟 李婉宜 王月玲 巩天祥 王保宁 杨远 王欢 蒋忠华文献传递