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两种基于RAJI细胞的抗CD20单抗新型定量方法的比较及在药物代谢动力学中的应用被引量：2: 2009年; 建立和比较基于RAJI细胞的流式细胞法(Flow cytometry assay,FCA)和细胞放射免疫法(Immuno-radiametric assay,IRA)测定重组抗CD20人源化单克隆抗体(r-anti-CD20zumAb)的浓度。两种方法均利用标记后抗体和被检测抗体竞争性结合RAJI细胞表面的CD20抗原,由标记后抗体的荧光或放射性变化而间接反应检测抗体的浓度。FCA和IRA定量范围分别为0.1～100mg/L和0.04～20mg/L,FCA的日内及日间精密度分别小于4.0%和3.0%,准确度为-1.7%～1.1%,IRA的日内及日间精密度值均小于7.0%,准确度为-8.9%～13.2%。方法学确证研究表明,两种方法均具有良好的特异性、灵敏度、精密度和准确度。血浆样品分析结果显示,两种方法具有良好的一致性,是检测猕猴血浆中人源化单克隆抗体浓度的理想方法。; 董增祥王清清陈立慧侯盛董立厚王诗鸿欧伦刘秀文宋海峰; 关键词：流式细胞法放射免疫法药物代谢

实时定量PCR技术研究DNA疫苗在小鼠体内的生物分布: 2009年; 目的：建立并确证实时定量PCR（RT-PCR）定量检测生物基质中质粒DNA的方法,并应用于治疗性核酸疫苗HIV-PV的体内生物分布研究。方法：建立SYBR Green荧光定量PCR绝对定量方法（Q-PCR）,考察方法的特异性、灵敏度、精密度、准确度以及生物基质对PCR的抑制效应。小鼠尾静脉注射裸质粒DNA、小鼠尾静脉注射和灌胃2种途径免疫HIV-PV DNA疫苗,考察建立的Q-PCR方法对于不同形式的质粒DNA疫苗以及不同免疫方式的适用性。结果：Q-PCR方法可特异检测目标DNA,定量检测范围为10-10^7拷贝/100 ng基因组DNA（gDNA）,定量下限（LLOQ）为10拷贝/100 ng gDNA。批内和批间精密度分别〈11%和8%;由高至低4种浓度（10^7,10^4,100,10拷贝/100 ng gDNA）QC样品准确度分别为（1.57±0.02）%,（1.60±0.01）%,（2.20±0.02）%和（2.28±0.02）%。用Q-PCR方法成功得到不同形式DNA疫苗和不同免疫途径（尾静脉注射和灌胃HIV-PV疫苗）下该质粒DNA的生物分布模式。结论：利用RT-PCR技术,建立了符合DNA疫苗生物分布研究要求的定量检测生物基质中质粒DNA的方法学,并成功应用于不同质粒DNA疫苗形式和不同免疫途径下的DNA疫苗的生物分布研究。; 付洁李丁夏绍友宋海峰董增祥陈方孙效欧伦汤仲明; 关键词：DNA疫苗实时定量PCR 生物分布

反义寡核苷酸毛细管电泳定量新方法的建立及其应用: 目的:建立毛细管电泳定量分析全硫代反义寡核苷酸KS0604的方法,用于药代动力学研究。方法:采用离子交换和反相分配的两步固相萃取(dual-SPE)血浆样品前处理方法,并结合NGCE定量分析方法检测猕猴血浆样品中KS06...; 季颖王清清王诗鸿董增祥欧伦向慎思王秀中苗小红李灵珍宋海峰; 关键词：反义寡核苷酸猕猴; 文献传递

重组抗CD20人源化单克隆抗体的非临床药代动力学与药效动力学研究: 目的:研究重组抗CD20人源化单克隆抗体(rh-anti-CD20zumAb)在猕猴体内的药代动力学/药效动力学(PK/PD)特征。方法:采用流式细胞法研究rh-anti-CD20zumAb在猕猴体内的药代动力学与药效...; 董增祥; 关键词：流式细胞法药代动力学药效动力学; 文献传递

实时定量PCR用于新HIV DNA疫苗的生物分布研究: 目的:一种新型的亲黏膜HIV-PV(乳头瘤病毒)疫苗得以成功构建,现采用一种快速、灵敏、可靠的定量方法进行该疫苗的生物分布和与生殖腺基因组整合研究。方法:建立利用SYBE Green荧光染料-绝对定量PCR 方法对样品中...; 付洁宋海峰董增祥孙效刘秀文汤仲明; 关键词：核酸疫苗 HIV 实时定量PCR 生物分布; 文献传递

Bcl-2反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸KS0604在猕猴和小鼠的药动学(英文)被引量：3: 2010年; 目的研究反义核苷酸KS0604的药动学。方法建立基于离子交换和反相分配原理的两步固相萃取法,并采用非胶筛分毛细管电泳技术分析猕猴和小鼠血浆中的KS0604。观察猕猴静脉滴注(5,15和45mg·kg-1)和小鼠静脉注射(10,30和90mg·kg-1)给药后的药动学。结果猕猴给药后,药时曲线符合二室或三室模型,cmax、AUC(0～inf)和AUC(0～t)随给药剂量的增加而增加,静脉注射和静脉滴注后的末端t1/2相似,均小于1h。小鼠给药后,药时曲线符合二室模型,KS0604在血浆中消除迅速,末端t1/2为17.17～34.63min,给药后4h血药浓度低于定量下限,cmax、AUC(0～inf)和AUC(0～t)随给药剂量的增加而增加。结论在研究剂量范围内,KS0604在猕猴中表现为线性药动学,而小鼠中表现为非线性药动学。猕猴静脉注射和静脉滴注给药后的药动学参数相似。; 王诗鸿王清清董增祥欧伦季颖王婧宋海峰刘秀文; 关键词：药动学恒河猴小鼠

治疗性单克隆抗体的研究进展及其免疫偶联物的抗肿瘤应用被引量：4: 2008年; 目前正在研究的生物技术药物有1/4是单克隆抗体类药物,治疗性抗体已成为生物制药业发展最快的领域之一,它们用于治疗如肿瘤、移植排斥、自身免疫病、心血管疾病、病毒感染等。在发展初期,鼠源单克隆抗体为人类疾病的研究起到了重大的推动作用,但其存在着严重的不足,单克隆抗体人源化已逐渐成为当前研究的热点。另外,将放射性物质、化疗药物以及生物毒素等与单克隆抗体偶联得到免疫偶联物,这些偶联物被单克隆抗体特异性地导向表达相应抗原细胞的表面,并发挥抗肿瘤效应,同时也降低了药物对正常组织的损伤。文中就有关单克隆抗体人源化的研究进展和抗肿瘤应用进行综述。; 董增祥王清清宋海峰; 关键词：单克隆抗体人源化抗体免疫偶联物肿瘤治疗

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董增祥