肖静
- 作品数:4 被引量:5H指数:2
- 供职机构:暨南大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 基于Red重组系统构建含Flag标签标记UL23基因的重组人巨细胞病毒
- 2012年
- 利用来源于λ噬菌体的Red系统,将Flag标签及两侧带有FRT位点的卡那霉素抗性基因片段插入原HCMV TowneBAC中UL23基因3'末端区域,通过卡那抗性筛选带有抗性标记的重组菌株,并通过表达重组酶FLP的质粒pCP20去除卡那霉素抗性基因,得到带有Flag标签标记UL23基因和单一FRT位点的突变BAC。重组后的BAC分子同质粒pcDNA3.1(+)-pUL82共转染HFF细胞后重建重组HCMV。Western blotting检测证实所构建重组病毒能够表达含Flag标签标记的pUL23蛋白。此含有Flag标签标记UL23基因的重组HCMV的成功构建为了进一步研究人巨细胞病毒UL23基因及其产物的功能提供依据。
- 胡嘉淼肖静刘明亮曾宝娟李婧惠李继东周天鸿冉艳红李弘剑
- 关键词:RED同源重组
- ACEI对创面愈合过程中表皮干细胞增殖、迁移影响的研究
- 研究目的: 本研究探讨在创面愈合过程中表皮干细胞增殖、迁移等生物学行为变化,并且观察ACE与表皮干细胞的表达定位情况,初步探讨ACE对表皮干细胞生物学行为的影响,为调控创面愈合过程提供新的思路。 研究方法: ...
- 肖静
- 关键词:血管紧张素转换酶创面愈合表皮干细胞
- 文献传递
- 人巨细胞病毒基因组表达文库的构建及其应用于病毒编码蛋白相互作用的研究
- 目的:为研究人巨细胞病毒(HCMV)基因编码蛋白的功能,拟构建融合于GAL4活性区域的HCMV Towne株全基因组随机表达文库。利用酵母双杂交技术从该文库中筛选与HCMV UL23基因编码的皮层蛋白pUL23相互作用的...
- 肖静
- 关键词:人巨细胞病毒基因组文库蛋白质相互作用
- 文献传递
- 利用酵母双杂交系统筛选与人巨细胞病毒皮层蛋白pUL23相互作用的病毒编码蛋白被引量:3
- 2011年
- 人巨细胞病毒(HCMV)UL23基因编码病毒皮层蛋白,该基因缺失时,病毒在人包皮成纤维细胞(HFF)中的繁殖速度加快.为进一步阐述HCMV UL23基因编码产物pUL23的功能及调控机制,采用鸟枪法构建了融合于GAL4活性区域的HCMV Towne株基因组随机表达文库.利用酵母双杂交技术,以pGBKT7-UL23为诱饵质粒,从构建的HCMV基因组表达文库中筛选到与pUL23相互作用的病毒编码蛋白pUL24.GST-pull down实验和免疫共沉淀实验进一步确认两种病毒蛋白之间的相互作用.结果表明,构建的HCMV基因组表达文库能够用于GAL4酵母双杂交系统筛选与诱饵蛋白相互作用的病毒自身编码蛋白.病毒蛋白pUL23和pUL24之间具有相互作用,这为进一步阐述pUL23在HCMV感染过程中的功能提供依据.该研究为揭示HCMV病毒感染机制奠定了基础.
- 肖静胡嘉淼肖小平员月明刘明亮曾宝娟李婧惠周天鸿冉艳红李弘剑
- 关键词:人巨细胞病毒BAC基因组文库蛋白质相互作用