程璘令
- 作品数：22 被引量：111H指数：6
- 供职机构：广州医科大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
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- 联合利用嵌套缺失和酚筛选法构建和鉴定目的基因的缺失突变体
- 2006年
- 目的介绍一种快捷、无突变的目的基因缺失体构建和鉴定方法。方法用MluI和SacI酶将GCLC/pGL3在GCLC基因与pGL3连接处切开,形成以GCLC端为3’凹端而pGL3载体端为3’凸端的线型载体。利用外切核酸酶Ⅲ从GCLC基因端(3’凹端)单向逐一切除GCLC基因上的核苷酸,并在不同的时间终止其反应以获得一系列的GCLC基因缺失体。将GCLC基因缺失体与pGL3载体自身环化构建成GCLC基因序列缺失体的pGL3报道载体。最后用酚抽提和凝胶电泳法粗略挑选出不同长度的GCLC/pGL3缺失突变体。结果利用嵌套缺失法构建出各种长度的GCLC基因的缺失突变体,且不存在基因突变的现象。利用酚筛选法快速鉴定出29种不同长度的缺失突变体。结论联合利用嵌套缺失和酚筛选法可以高保真而快速地构建和鉴定目的基因的缺失突变体。
- 程璘令李冰涂洪斌刘启才冉丕鑫
- 关键词：缺失突变体
- 现代综合立体教学在呼吸内科临床见习中的应用被引量：3
- 2015年
- 目的：探索现代综合立体教学在呼吸内科教学中的应用及效果。方法将以问题为基础的学习（ problem-based learning ， PBL ）、基于标准化病人的练习（ stan-dardized patient experiences/exam，SPE/Xs）和迷你临床检查练习方法（mini clinical examination exercise，Mini-CEX）等有机结合应用于呼吸内科临床见习，并将其命名为“现代综合立体教学”。将60名学生随机分为现代综合立体教学组（30名）和传统教学组（30名），分别采用现代综合立体教学和以主题为基础的学习（subject based learning，SBL）进行呼吸内科见习带教。教学结束后，采用成绩测试和受试者问卷调查评价两组学生的教学效果。组间比较采用SPSS行t检验。结果现代综合立体教学组学生的测试成绩为（86.91±4.77）分，高于对照组的（79.00±7.51）分（t=12.4，P=0.0260）。其中主观题（如论述题和病例分析）成绩方面，现代综合立体教学组（47.63±2.14）分，明显优于传统组的（36.00±6.71）分（t=21.6，P=0.0019）。对两组学生进行调查问卷显示：相比传统教学，现代综合立体教学更能提高学生的主观能动性和对学习的积极性；提高学生综合分析问题的能力和促进临床思维的形成；有利于学生高效、全面掌握呼吸内科基本知识和基本技能（χ2=16.2，P=0.0160）。结论针对呼吸内科临床见习实施现代综合立体教学有助于提高教学效果。
- 程璘令李时悦
- 关键词：呼吸内科临床教学
- 糖皮质醇激素改善慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者肺功能的影响因素的分析被引量：13
- 2014年
- 目的 对影响糖皮质醇激素改善COPD急性加重期（AECOPD）患者肺功能的可能因素进行分析,鉴定出影响FEV1改善的相关因素.方法 实验分两组,实验组AECOPD患者接受甲基泼尼松1mg· kg-1·d-1静脉滴注及其他常规治疗,对照组接受除激素以外的其他常规治疗,连续治疗1周.治疗前后对所有AECOPD患者进行诱导痰炎性细胞、炎性介质（IL-6和IL-8）、呼出气一氧化氮（FeNO）检测和肺功能的检测.利用单因素和多因素线性回归筛选FEV1改善值的影响因素.结果 AECOPD患者经激素治疗后FEV1改善值为（0.32±0.21） L[FEV1％pred改善率为（19.3±10.6）％],而对照组FEV1改善值为（0.13±0.09） L[FEV1％pred改善率为（6.8±5.1）％],两者差异有统计学意义.我们对影响激素改善FEV1值的可能因素,包括气道炎症指标（诱导痰中性粒细胞、嗜酸粒细胞、IL-6、IL-8和治疗前FeNO水平）、年龄、基础肺功能等进行分析,结果显示嗜酸粒细胞百分比、治疗前FeNO、IL-8与FEV1改善值呈正相关,相关系数分别为0.816、0.62和0.54,进一步分析提示诱导痰的嗜酸粒细胞百分比、治疗前FeNO是影响FEV1改善值的主要因素,诱导痰嗜酸粒细胞百分比比治疗前FeNO对FEV1改善值的影响意义更大.结论 嗜酸粒细胞百分比、基础FeNO可作为激素改善COPD患者FEV1的预测因素.
- 程璘令刘雅雅苏柱泉刘君冉丕鑫
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病急性加重期肺功能
- 沙美特罗／氟替卡松改善慢性阻塞性肺疾病患者肺功能的预测因素的初探被引量：4
- 2014年
- 目的探讨影响吸入糖皮质醇激素（ICS）＋长效β受体激动剂（LABA）（沙美特罗/氟替卡松）改善COPD患者肺功能的预测指标。方法实验分两组，实验组COPD患者166例，对照组COPD患者73例，实验组所有COPD患者吸入50／500μg沙美特罗／氟替卡松（1吸，2次／d），对照组吸入安慰剂，两组均治疗6个月。所有患者在治疗前后均进行诱导痰嗜酸粒细胞、IL-8、呼出气一氧化氮检测（FeNO）和肺功能的检测。应用单因素和非条件Logistic多因素回归分析方法，分析影响FEV1改善的可能因素。结果实验组患者吸入50／500μg沙美特罗替卡松（1吸，2次／d）治疗后FEV1改善值为（86±11）ml，而对照组FEV1改善值为（19±16）ml（t=6．205，P〈0．05）。我们对影响ICS＋LABA改善FEV1值的可能因素，包括诱导痰中嗜酸粒细胞、炎性介质IL-8水平、反应气道炎症水平的FENO，基础肺功能FEV1等因素进行分析，结果显示诱导痰中炎性介质IL-8水平、FENO基础水平和基础肺功能与FEV1改善无相关；而嗜酸粒细胞〉2．5％（χ^2=3．181，P〉0．05）及治疗后FeNO下降〉10bbp（χ^2=17．237，P〉0．05）与FEV1改善相关。进一步多因素Logisitc分析显示诱导痰嗜酸粒细胞〉2．5％和治疗后FeNO降低〉10ppb是影响ICS＋LABA改善FEV1的重要因素。结论诱导痰嗜酸粒细胞、治疗后FENO下降的水平可成为ICS＋LABA改善COPD患者FEV1的预测因素。
- 程璘令刘雅雅苏柱泉刘君李时悦
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病急性加重期肺功能
- 大鼠γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位基因调控机制的分析及其新抑制元件E-box的鉴定
- 吸烟等氧化应激所导致的氧化抗氧化失衡是COPD发病的重要机制之一。GSH是肺内的最重要的抗氧化物质，作为合成GSH所必需的关键酶，γ-GCS表达水平与活性直接影响到GSH的量，因此，通过调节γ-GCS的表达可能会有效地调...
- 程璘令
- 关键词：谷胱甘肽基因功能分析
- 文献传递
- 非艾滋病非器官移植免疫抑制宿主巨细胞病毒肺炎临床特征分析
- 2020年
- 目的探讨和分析非艾滋病、非器官移植的免疫抑制宿主发生巨细胞病毒(CMV)肺炎的临床特征及预后不良的危险因素。方法回顾性分析2017年7月至2018年12月确诊的CMV肺炎患者临床资料,根据出院时的转归分为好转组、恶化/死亡组,对恶化/死亡的危险因素行Logistic回归分析。结果共28例患者满足入选标准,好转组23例,恶化/死亡组5例(1例死亡,4例恶化后自动出院)。首发症状均以咳嗽、发热、呼吸困难为最常见,胸部影像学以弥漫磨玻璃影、斑片实变影为最常见的表现。单因素Logistic回归分析显示LDH升高、机械通气、入院后糖皮质激素使用是CMV肺炎预后不良的危险因素。结论 LDH升高、需要机械通气、入院后糖皮质激素使用是CMV肺炎预后不良的危险因素。
- 占扬清曾沛荧程璘令潘枫渝陈荣昌叶枫
- 关键词：巨细胞病毒肺炎免疫抑制
- 谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚单位基因甲基化而非多态性与慢性阻塞性肺疾病相关被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚单位（GCLC）基因多态性和甲基化与慢性阻塞性肺疾病（COPD）易感的相关性.方法 收集166例COPD患者为COPD组,同期与上述COPD患者相似的非COPD人群166例为对照组.使用基因测序法检测两组人群GCLC基因启动子区域的单核苷酸多态性（SNP）,分析各SNP位点的单倍体型与COPD发病的关系.使用甲基化DNA免疫共沉淀芯片（MeDIP-chip）检测两组人群GCLC启动子区域甲基化水平,进行两组人群GCLC mRNA表达水平和血谷胱甘肽（GSH）浓度的比较.结果 通过直接测序法在GCLC启动子区域鉴定出12个SNP,其中4个SNP,即-2137MT、-129C/T、＋27591C/G和＋37764MG在COPD组和对照组人群中的发生率超过10％.-129C/T与-2137MT、＋27591C/G、＋37764MG均处于连锁不平衡.COPD组和对照组人群上述4个SNP的等位基因频率和基因型频率差异均无统计学意义（均P＞0.05）.MeDIP-chip检测显示COPD组GCLC启动子区域甲基化水平明显高于对照组（P＜0.001）.COPD组肺组织标本GCLC mRNA表达水平明显低于对照组（3.71±0.48比5.16±0.39,P＜0.05）,血谷胱甘肽（GSH）水平也低于对照组[109.72±32.38）mg/L比（179.87±46.23） mg/L,P＜0.05].结论 中国人群GCLC启动子区域甲基化而非GCLC基因多态性与COPD相关.
- 程璘令刘雅雅刘君李晓燕刘升明李冰冉丕鑫
- 关键词：疾病遗传易感性DNA甲基化
- 智能呼吸床对慢性阻塞性肺疾病急性加重并Ⅱ型呼吸衰竭患者的疗效观察被引量：2
- 2015年
- 智能呼吸床是一种运用俯卧位通气原理改善肺通气及呼吸肌功能的新的治疗手段,使患者在休息状态下能得到呼吸肌的锻炼。本研究通过患者在普通病床仰卧位呼吸与智能呼吸床上同步悬空俯卧位呼吸进行观察比较,探寻治疗呼吸肌疲劳的新方法。
- 李晓聪赵东琼何梦璋王欣妮程璘令刘晓青黎毅敏徐远达
- 关键词：慢性阻塞性肺疾病急性加重期俯卧位通气
- γ-GCS基因抑制元件E-box的实验研究被引量：4
- 2005年
- 目的 明确大鼠肺泡上皮细胞γ谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚单位编码基因(GCLC基因)负调控区域( -745^-705)上的功能元件E box作用。方法 利用迁移率变动试验(EMSA)和超级迁移率变动试验证实大鼠肺泡上皮细胞GCLC基因负调控区域的E- box元件能与转录因子USF1 /USF2特异性的结合;通过共转染USF1 /USF2表达质粒(pCMV -USF1 /pCMV- USF2)和GCLC -luc确认E- box元件在基因调控中的作用;最后通过构建USF1 /USF2的逆转录病毒载体,将表达USF1 /USF2的重组逆转录病毒感染肺泡上皮细胞, 用Western印迹检测细胞GCLC蛋白表达受影响的情况,进一步确定E box元件与USF作用在GCLC基因表达中的最终作用。结果 EMSA和超级迁移率变动试验证实GCLC基因负调控区域的功能元件是E- box,且该元件与USF特异结合参与GCLC基因的调控;共转染USF1 /USF2表达质粒的细胞GCLC基因表达明显下降;Western印迹证实感染重组USF1 /USF2逆转录病毒使肺泡上皮细胞的GCLC蛋白表达明显下降。结论 E -box元件通过与转录因子USF作用抑制GCLC基因表达,E box元件是γGCS基因的重要的抑制元件。
- 程璘令李冰涂洪斌刘启才冉丕鑫
- 关键词：共转染WESTERN印迹EMSA调控区功能元
- 慢性阻塞性肺疾病-哮喘重叠综合征慢性阻塞性肺疾病和支气管哮喘临床特征差异研究被引量：38
- 2015年
- 目的探讨慢性阻塞性肺疾病-哮喘重叠综合征(ACOS)、慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)和支气管哮喘(哮喘)临床特征的差异。方法收集2011年3月至2014年4月广州医科大学第一附属医院收治的47例ACOS、59例慢阻肺及53例哮喘患者的一般情况、肺功能检查结果、诱导痰细胞嗜酸粒细胞(EOS)百分比、呼出气一氧化氮(FENO)水平、圣乔治呼吸问卷(SGRQ)评定和2年内急性加重和住院次数。结果 ACOS组和慢阻肺组平均年龄分别为(68.0±12.3)岁和(62.0±9.7)岁,均大于哮喘组(43.0±6.2)岁(P<0.05)。ACOS组和慢阻肺组吸烟指数分别为(387±127)年支和(472±91)年支(P<0.05),均大于哮喘组[(72±16)年支](P<0.05)。ACOS和慢阻肺患者儿童时期下呼吸道感染频繁者(每年≥1次)比例分别为21.3%和15.3%,而哮喘患者为7.5%。ACOS组患者2年内第一秒用力呼气容积(FEV1)为(53.7±6.6)m L,下降较慢阻肺(42.8±10.4)m L和哮喘患者(24.2±7.9)m L明显。ACOS和慢阻肺患者一氧化氮肺泡弥散量占预计值(DLCO/VA%)分别为(58.4±9.2)%和(64.7±7.1)%,均低于哮喘患者(91.0±7.3)%(P<0.05)。ACOS和哮喘患者诱导痰EOS百分比分别为(11.3±3.9)%和(14.9±11.7)%,均高于慢阻肺组(1.4±0.8)%(P<0.05)。ACOS和哮喘患者FENO水平分别为(39.2±18.7)×10-9mol/L和(46.6±15.4)×10-9mol/L,均高于慢阻肺组(19.5±5.2)×10-9mol/L(P<0.05)。ACOS患者的SGRQ为69.5±9.2,高于慢阻肺组47.0±11.7和哮喘组(31.3±9.7)(P<0.05)。ACOS患者2年内急性加重次数为(3.1±1.2)次,多于慢阻肺组(1.4±0.6)次(P<0.05);ACOS患者因急性加重住院次数为(2.83±0.96)次,多于慢阻肺组(1.10±0.72)次(P<0.05)。结论 ACOS常见于有特应症特征基础上常年吸烟的老年患者。ACOS临床上肺功能下降更快,健康相关生活质量差,易于反复急性加重。
- 程璘令刘雅雅苏柱泉刘君陈荣昌
- 关键词：重叠综合征慢性阻塞性肺疾病支气管哮喘
