程华玲
- 作品数：3 被引量：31H指数：2
- 供职机构：第四军医大学基础医学部神经科学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 嗅神经鞘细胞的培养纯化及体外生长特性被引量：26
- 2001年
- 采用原代培养的方法,从2.5月成年大鼠的嗅球分离培养嗅神经鞘细胞(OECs),培养6天后,用阿糖胞昔(Ara-C)抑制,差速贴壁,Forskolin和BPE营养物质处理。根据P75蛋白免疫细胞化学染色和形态学特征分析了所得细胞的纯度。同时对不同培养时期的OECs的形态进行观察和纯化后的活力测定。实验结果显示:(1)这种纯化方法简单,经济,快捷,所得的OECs纯度可达95％以上,并且随培养时间延长,细胞仍保持较高的纯度。(2)在培养早期2天到5天主要以巨噬细胞状、多极状、不规则状为主,培养中期7天到20天主要以扁平的双极、三极为主。晚期20天以后呈现双极、三极形态,其突起上有许多细小的棘突。(3)其中以培养早中期细胞的活力较好,培养20天以后,细胞活力较差。本研究为以OECs作为移植材料对促进神经再生的研究获得丰富的细胞来源奠定了基础。
- 杨浩王春婷程华玲鞠躬
- 关键词：嗅神经鞘细胞细胞培养神经再生体外生长纯化
- 嗅神经鞘细胞在体外培养时对GABA能神经元的作用被引量：2
- 2002年
- 目的 研究嗅神经鞘细胞 (OECs)在培养状态下对GABA能神经元的存活及突起生长的影响。 方法 用原代培养的方法 ,分别进行OECs和脊髓神经元的培养 ,培养 6d后 ,将OECs接种在Millipore细胞培养板的内嵌培养皿中 ,然后置入脊髓神经元的培养板中 ,使两者进行不接触的联合培养 ,培养进行至 6d ,分别作GABA免疫细胞化学染色 ,观察突起生长情况以及GABA阳性细胞计数。 结果 与OECs联合培养组 (实验组 )GABA能神经元存活为 39 7± 6 3,对照组为 2 7 6± 2 7(P <0 0 5 ) ,并且实验组GABA能神经元染色较对照组深 ,突起长度(6 30± 112 μm)较对照组长 (2 70± 97μm) (P <0 0 1)。 结论 在体外培养状态下 ,OECs对GABA能神经元有明显的促进作用。
- 杨浩梁喆王春婷程华玲鞠躬
- 关键词：体外培养嗅神经鞘细胞神经元Γ-氨基丁酸存活
- GDNF对羟基自由基损伤的体外培养新生大鼠背根节神经元的作用被引量：4
- 2000年
- 目的:通过运用体外培养·OH(羟基)自由基(Free radical FR)损伤的细胞模型,研究CDNF对损伤的背根节神经元的各种作用,并研究GDNF对神经元作用机理及检测方法。方法:采用原代培养的方法,用N_1无血清培养基分离培养DRG神经元,然后用100μM FeSO_4,50μM H_2O_2形成的·OH自由基作用20min,弃去培养液,再用无血清DF_(12)培养基洗2次,最后加上含有GDNF的无血清培养基,继续培养24hrs。然后用MTT法检测反映细胞的活性OD值,胎盘蓝染色记数。细胞总蛋白测定以及形态学观察突起地生长状况。结果:(1)GDNF浓度为20μg/ml,10/μg/ml对·OH自由基损伤的背根节神经元活性及存活有促进作用。(2)细胞的总蛋白及DRG突起长度:实验组与对照组不明显,GDNF组与空白对照组不明显。结论:在正常无血清体外培养情况下GDNF对DRG神经元作用不明显,在·OH自由基损伤后,对细胞的活性,存活有明显的保护作用,而对总蛋白合成及突起的生长则没有明显的促进作用。
- 王春婷杨浩程华玲鞠躬
- 关键词：GDNF体外培养新生大鼠背根节神经元神经元
