石萌
- 作品数：7 被引量：16H指数：3
- 供职机构：南方医科大学南方医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- Fas通路通过激活ERK1/2通路在结肠癌细胞中诱导上皮-间质转化＊被引量：3
- 2013年
- 目的:探索Fas通路在结肠癌细胞中诱导上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的分子机制。方法:分别对结肠癌细胞SW480及DLD1予以低剂量FasL(12.5 ng/mL)处理。作用3d后分别提取实验组和对照组细胞的总蛋白、总RNA,并进行Western blot、RT-PCR检测,分析FasL作用下结肠癌细胞的上皮标记物、间质标记物以及EMT相关的转录因子的表达状况。在低剂量FasL作用3d后行免疫荧光检测,观察EMT相关转录因子在细胞内的分布情况。建立稳定敲除Snail及Twist的结肠癌细胞系,再予以低剂量FasL刺激,采用Western blot、RT-PCR检测是否发生EMT过程。对结肠癌细胞SW480予以低剂量FasL(12.5 ng/mL)处理后,通过Western blot检测实验组和对照组细胞ERK1/2通路及p38通路的激活状况。对SW480细胞进行信号通路抑制剂的预处理,再予以低剂量FasL刺激,采用Western blot、RT-PCR检测是否发生EMT过程,从而探索Fas通路诱导EMT的可能机制。结果:低剂量FasL可使结肠癌SW480和DLD1细胞的上皮标记物表达下调,间质标记物表达上调,EMT相关转录因子在细胞核周聚集,细胞发生梭形改变,提示发生EMT。而将结肠癌细胞的Snail或Twist基因敲除后,FasL的上述诱导作用明显减弱。低剂量FasL可激活结肠癌细胞的ERK1/2通路激活,而ERK抑制剂可减弱FasL诱导的EMT过程。结论:Fas通路可能通过激活ERK1/2通路诱导结肠癌细胞发生EMT。
- 李文静石萌王亚东郑浩轩
- 关键词：结肠癌上皮间质转化
- Fas信号通路通过诱导EMT促进胃癌细胞的侵袭转移
- 引言：Fas又称Apo-1或CD95分子,属于肿瘤坏死因子/神经生长因子受体家族成员.FasL是其天然配体,在体内主要以膜结合形式存在,Fas/FasL结合是激活体内Fas凋亡信号的有效途径.最近研究显示,Fas信号通路...
- 石萌李文静王亚东郑浩轩
- 关键词：EMTERK1/2信号通路
- Fas通路相关分子在结直肠癌中的表达及其临床意义被引量：3
- 2013年
- 目的研究在Fas通路中参与调控诱导EMT的相关分子在结直肠癌临床样本中的表达水平及其与肿瘤的临床病理指标、肿瘤预后之间的关系,并以此为基础探索结直肠癌中Fas诱导EMT的可能机制。方法采用免疫印迹、免疫组化技术检测结直肠癌患者组织标本中FasL、p-GSK3β、Snail和β-catenin的表达水平,并统计其表达水平与患者临床病理指标之间的关系。将临床标本根据这四种分子表达水平的高低分为EMT表型和非EMT表型,统计分析该分型与肿瘤分期及患者预后之间是否相关。分析p-GSK3β、Snail和β-catenin之间的两两相关性,以探索结直肠癌中Fas诱导EMT的可能机制。结果对人结直肠癌标本进行评分后发现,FasL、p-GSK3β、Snail和β-catenin的表达水平与肿瘤分期呈正相关。与非EMT表型相比,EMT表型的患者肿瘤分期较高且预后较差。相关性分析显示,p-GSK3β、Snail和β-catenin在结直肠癌组织中的表达水平两两相关。结论 p-GSK3β、Snail和β-catenin可能参与调控Fas诱导的EMT过程,从而促进结直肠癌转移。
- 李文静刘涛谢婷婷石萌郑浩轩
- 关键词：上皮间质转化结直肠癌
- Fas信号通路促进胃癌细胞的侵袭及转移被引量：1
- 2013年
- 目的探讨Fas通路的非凋亡信号在胃癌细胞株AGS中促进增殖转移的作用。方法流式细胞仪检测AGS细胞表面Fas及FasL表达情况;根据FasL不同作用浓度梯度,绘制细胞生长曲线;shRNA沉默AGS的Fas表达后,或NOK-1拮抗FasL后,利用transwell实验检测AGS的侵袭能力;免疫组化检测FasL表达与E-cadherin关系。结果低浓度的FasL(12.5ng/ml)刺激对细胞增殖无明显抑制作用,反而能提高肿瘤细胞的侵袭能力。在沉默Fas受体或经NOK-1拮抗FasL后,该效应减弱。FasL和E-cadherin在胃癌组织中的表达呈负性相关。结论低剂量的FasL不能诱导AGS产生凋亡效应,反而通过Fas信号通路促进其侵袭转移能力。
- 石萌李文静王亚东郑浩轩
- Fas通路的激活促进结肠癌细胞迁移侵袭被引量：2
- 2013年
- 目的探讨Fas通路激活对结肠癌细胞SW480和DLD1产生的非凋亡效应。方法流式细胞学检测结肠癌SW480及DLD1细胞系的Fas、FasL、抗凋亡蛋白c-FLIP、Bcl-2、Bcl-xl、XIAP等在细胞膜上的表达水平;对结肠癌SW480及DLD1细胞系予以梯度浓度(0ng/ml、12.5ng/ml、25ng/ml、50ng/ml)的FasL刺激,计数并比较各组细胞的增殖速率变化;对结肠癌SW480及DLD1细胞系予以低剂量FasL处理,分别对实验组和对照组进行细胞增殖速率及迁移侵袭能力测试,探讨低剂量FasL刺激对结肠癌细胞活力的影响;稳定敲除SW480和DLD1细胞的Fas基因表达,重复上述实验,以明确低剂量FasL刺激对结肠癌细胞活力的影响是否依赖于Fas通路的激活。结果 SW480及DLD1细胞系中均可检测到中等程度的Fas表达及抗凋亡蛋白FLIP、Bcl-2的表达,未检测到FasL表达,在SW480中可测到Bcl-xl表达;低剂量FasL不影响结肠癌SW480和DLD1细胞的增殖速率,但可促进两种细胞的迁移侵袭能力;稳定敲除Fas基因后,低剂量FasL对结肠癌细胞迁移侵袭能力的促进作用受到抑制。结论低剂量FasL可激活Fas通路的非凋亡途径从而增强结肠癌SW480和DLD1细胞的迁移侵袭能力。
- 郑浩轩李文静石萌王亚东姜泊
- 关键词：结肠癌增殖迁移
- Fas信号通路通过诱导EMT促进胃癌细胞的侵袭转移被引量：2
- 2014年
- 目的探讨Fas信号通路促进胃癌细胞侵袭转移的可能相关机制。方法以低浓度FasL处理胃癌细胞株AGS,免疫印迹及ELISA检测上皮间质转化(epithelial-mesenehymal transition,EMT)的分子生物学标记改变;稳定沉默Snail及Twist转录因子,transwell小室侵袭实验检测FasL处理后胃癌细胞的侵袭能力;免疫印迹检测信号通路激活状态及相应的抑制效应。结果 FasL可以诱导AGS细胞株出现EMT表型,并可促进胃癌细胞的侵袭转移能力。同时该过程中出现ERK1/2信号通路的激活,而抑制ERK1/2信号通路,可以抑制FasL诱导EMT及提高肿瘤侵袭能力的作用。胃癌组织中相应分子生物学标记的表达变化符合EMT的发生。结论 Fas信号通路能够激活ERK1/2通路诱导EMT的发生,并且能通过该机制增强胃癌细胞AGS的活动能力。
- 石萌南兴建李文静王亚东郑浩轩
- 关键词：EMTERK1
- GSK-3β通过调节Snail参与Fas诱导的EMT过程被引量：7
- 2013年
- 目的探讨ERK、GSK3β和Snail在Fas诱导的EMT中的作用。方法选用结肠癌SW480细胞及胃癌AGS细胞作为研究对象,使用U0126以阻断其ERK/MAPK通路的激活,稳定转染GSK3βS9A以抑制其GSK3βSer9位点的磷酸化及信号转导,稳定转染Snail shRNA以抑制其Snail活性,并对接受上述处理的细胞分别给予低剂量FasL刺激后,再利用侵袭试验、免疫荧光、免疫印迹、RT-PCR、qRTPCR、免疫共沉淀及荧光素酶报告基因等方式检测细胞的形态、功能变化。结果 Fas信号通路的激活可抑制E-cadherin的转录表达,且这一过程依赖于ERK/MAPK通路。通过转染稳定敲除Snail表达后,Fas对E-cadherin的转录抑制作用显著减弱。在细胞内过表达突变型GSK3βS9A可显著降低Fas通路激活后Snail的表达上调水平、E-cadherin的转录抑制水平及细胞的侵袭能力增加程度。免疫共沉淀提示,GSK3β与ERK、Snail在细胞核存在相互作用。结论在消化道肿瘤细胞中,Fas诱导EMT的调控机制包括ERK/MAPK通路的激活、ERK对GSK3β的磷酸化(Ser9位点)失活、GSK3β失活导致的Snail表达上调及核易位,以及Snail作用下的E-cadherin转录水平下调。
- 李文静刘涛谢婷婷石萌蔡毅东郑浩轩
- 关键词：GSK3Β上皮间质转化
