王银环
- 作品数：5 被引量：28H指数：3
- 供职机构：浙江中医药大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 钩端螺旋体groEL基因原核表达及其产物免疫保护作用被引量：4
- 2013年
- 目的:构建问号钩端螺旋体(简称钩体)黄疸出血群赖型赖株groEL基因原核重组表达系统,了解重组表达的GroEL蛋白(rGroEL)对金地鼠的免疫保护作用。方法:采用高保真PCR扩增问号钩体赖株groEL基因并测序,常规方法构建groEL基因原核表达系统。采用SDS-PAGE联合Bio-Rad凝胶图像分析系统检查rGroEL表达情况及其可溶性,Ni-NTA亲和层析法提纯rGroEL。观察rGroEL免疫金地鼠对问号钩体赖株感染的保护率。采用MAT法检测免疫动物血清与我国流行问号钩体血清群交叉凝集效价。结果:所克隆的groEL基因核苷酸和氨基酸序列与GenBank中相应基因完全相同。所构建的groEL基因原核表达系统能表达可溶性rGroEL。100和200μgrGroEL对金地鼠的免疫保护率分别为50.0%和75.0%。rGroEL免疫金地鼠血清可不同程度地凝集各问号钩体血清群。结论:GroEL蛋白是问号钩体属特异性保护性抗原,可用于制备通用性钩体基因工程疫苗。
- 李小余王银环严杰程东庆
- 关键词：问号钩端螺旋体原核表达免疫保护
- 泛耐药鲍曼不动杆菌质粒介导碳青霉烯酶的研究被引量：1
- 2012年
- 目的了解泛耐药鲍曼不动杆菌（pan—drugresistantA．baumannii，PDR—AB）的耐药性和产耐药酶的情况及其耐药机制。方法收集泛耐药鲍曼不动杆菌3株，用纸片扩散法进行药敏测定；通过质粒接合试验、质粒提取实验、琼脂糖凝胶电泳、质粒消除试验等方法，研究细菌对碳青霉烯类耐药的分子机制。结果3株泛耐药鲍曼不动杆菌对包括亚胺培南（IMP）在内的常用抗菌药物均高度耐药。所有菌株接合试验均成功，接合子质粒条带相同。且经SDS质粒消除试验发现其对碳青霉烯类的耐药性随质粒的消除而丢失。结论碳青霉烯酶的产生是泛耐药鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药的机制之一；其携带的耐药基因能通过质粒在细菌间传递。
- 周芳美夏雪飞叶青王银环程东庆
- 金银花水煎剂对D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗氧化作用被引量：14
- 2014年
- [目的]探讨金银花水煎剂对D-半乳糖致衰模型小鼠的抗氧化作用。[方法](1)取一月龄ICR小鼠50只,随机分为对照组、衰老组、金银花高、中、低剂量组。D-半乳糖构建衰老模型过程中,金银花高(10g·kg-1)、中(5g·kg-1)、低(2.5g·kg-1)剂量组每天按剂量分别灌胃。对照组和衰老组灌等量的生理盐水。连续6W后采集小鼠血清样品和各组织匀浆样品进行生化指标SOD、MDA、GSH-Px检测。[结果]42d后,衰老组小鼠出现不同程度的行动缓慢,皮毛光泽暗淡;体重低于正常组;血清、肝、肾、大脑组织中的SOD值、GSH-Px水平低于正常组;血清、肝、肾组织中的MDA含量均高于正常组(P<0.05或P<0.01);以上数据说明造模基本成功。与衰老组比较,金银花给药组各项指标明显改善,金银花给药组体重增加高于衰老组(P<0.01);血清、肝、肾SOD值及GSH-Px水平均高于衰老组(P<0.05或P<0.01),MDA含量低于衰老组(P<0.05或P<0.01)。[结论]金银花对D-半乳糖致衰老小鼠具有抗氧化作用,且中剂量组(5g·kg-1)效果显著。
- 张莹莹王银环史亚甘力程东庆
- 关键词：金银花D-半乳糖抗氧化
- 临床分离耐药阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶基因的检测与分型被引量：6
- 2014年
- 阴沟肠杆菌已成为医院感染的重要条件致病菌，且有较高的耐药性。由于头孢菌素、碳青霉烯类在临床上的广泛使用，阴沟肠杆菌耐药机制不断发展，其中的细菌产β内酰胺酶（ESBLs）是其耐药的重要机制［1］。目前，ESBLs种类已超过200多种，其中TEM、CTX-M、SHV、KPC型临床上较常见。作者前期的研究，对耐药阴沟肠杆菌，所产ESBLs 进行了检测和分型，22.73％的菌株单产AmpC酶、19.32％菌株单产ESBLs［2］。本文对ESBLs基因进行分型，旨在为进一步研究耐药基因的调控奠定基础。
- 王丽倩王银环史亚施晓峰程东庆
- 关键词：阴沟肠杆菌Β-内酰胺酶基因耐药性超广谱ESBLS
- β-内酰胺抗生素诱导大肠埃希菌ESBLs基因表达及其抑制机制被引量：3
- 2014年
- 目的了解大肠埃希菌临床菌株超广谱β内酰胺酶（ESBLs）基因及其携带模式、β-内酰胺类抗生素诱导以及组氨酸激酶抑制剂抑制细菌蛋白磷酸化和ESBLs基因表达的作用机制。方法采用PCR和测序法确定大肠埃希菌主要ESBLs基因（KPC、TEM、SHV、CTX-M）及其携带模式。采用E-test和微量试管稀释法分别测定最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。采用固定化金属螯合层析法、细菌蛋白磷酸化检测试剂盒及实时荧光定量RT-PCR分别检测1／4MIC青霉素和头孢噻肟诱导或组氨酸激酶抑制剂（氯氰碘柳胺、自行设计的溴化或碘化甲基咪唑）抑制大肠埃希菌耐药菌株蛋白磷酸化和ESBLs基因mRNA水平升高的作用。结果183株β-内酰胺类抗生素耐药大肠埃希菌临床菌株中，TEM和CTX-M基因检出率（83．1％和77．1％）高于其他基因且以两者同时携带模式为主（65．0％）（P〈0．05）。1／4MIC青霉素和头孢噻肟钠能诱导大肠埃希菌耐药菌株蛋白磷酸化及TEM、SHV、CTX—M基因mRNA水平显著升高（P〈0．05）。200μmol氯氰碘柳胺、2或10μmol溴化甲基咪唑、20或50μmol碘化甲基咪唑无抑制或杀灭大肠埃希菌的作用，但能抑制上述抗生素诱导的细菌蛋白磷酸化和ESBLs基因mRNA水平升高（P〈0．05），也能提高大肠埃希菌耐药菌株对青霉素和头孢噻肟的敏感性（P〈0．05）。结论TEM和CTX—M是本地区β-内酰胺类抗生素耐药大肠埃希菌临床菌株优势ESBLs基因，TEM＋CTX-M是ESBLs基因优势携带模式。亚致死量β内酰胺类抗生素可经TCSS上调大肠埃希菌ESBLs基因表达水平，但可被组氨酸激酶抑制剂所抑制。
- 王银环程东庆葛玉梅严杰孙爱华
- 关键词：大肠埃希菌Β-内酰胺类抗生素蛋白磷酸化组氨酸激酶
