王英超 作品数:39 被引量:58 H指数:5 供职机构: 山东出入境检验检疫局 更多>> 发文基金: 国家质检总局科技计划项目 国家自然科学基金 国家质检总局植物病原检测专项基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 自动化与计算机技术 更多>>
一种用于检测番茄斑萎病毒的NASBA方法 本发明的目的是提供一种用于检测番茄斑萎病毒的NASBA方法,所用于检测TSWV的NASBA引物,其引物序列分别为SEQ ID NO:1~2。发明根据TSWV的N基因高度保守区的设计了两个特异性内引物,该保守基因序列为具有... 吴兴海 陈长法 封立平 王简 尼秀媚 王英超 张云霞 余冬冬文献传递 大猿叶虫四地理种群的PCR-RFLP方法鉴别及遗传多样性分析 被引量:5 2010年 为了明确大猿叶虫Colaphellus bowringiBaly的遗传多样性水平及探索其种群快速鉴定的方法,利用7种限制性内切酶对其4个地理种群(江西龙南、江西修水、山东泰安、黑龙江哈尔滨)的线粒体COⅠ基因进行PCR-RFLP分析。结果表明:利用AseⅠ,MboⅠ,NlaⅢ和RsaⅠ在大猿叶虫4个地理种群中均没检测到多态性;利用AluⅠ和DraⅠ只检测到种群间的多态性;利用HaeⅢ既检测到了种群间的多态性,又在山东种群中检测到种群内多态性。根据酶切图谱,共发现4种单倍型,单倍型的特异性可以作为种群鉴别的标志。根据限制性片段共享度,利用POPGEN3.2计算4个种群的遗传距离,并利用MEGA3.1进行聚类分析,结果显示,大猿叶虫4个地理种群间的遗传距离大小与其相对地理距离的远近不相符,其遗传变异程度与其滞育的特征也不相符。据此认为线粒体COⅠ基因的PCR-RFLP分析可以用于大猿叶虫不同地理种群的识别。 魏晓棠 肖海军 白桦 张京萱 厉艳 王英超 薛芳森关键词:大猿叶虫 地理种群 线粒体DNA 旅邮检口岸截获杂草疫情分析及防控 被引量:1 2017年 目的研究旅邮检口岸截获杂草的疫情现状,探讨防控杂草疫情扩散传播的有效措施。方法统计2011~2015年旅邮检口岸截获杂草的种属类别、频次高低以及来源分布地区和年度截获量的数据信息,分析杂草疫情风险。结果部分体积小、重量轻、带附属结构的杂草种类较易扩散传播,这些入侵的外来杂草能够对生态环境及农业安全生产带来危害。杂草来源地区分布较广,但来源于周边国家和地区的频次较高,年度截获杂草总量呈现逐年递增的趋势。结论旅邮检口岸通过引入先进的智能检测设备并且提升查验人员的专业素质,可以有效减少外来入侵杂草通过口岸入境的数量;通过加强法制宣传结合行政处罚的方式能够有效控制人为因素造成的疫情传播。这些措施能够防止疫情通过旅邮检口岸扩散传播到国内。 李瑞 厉艳 齐振华 张京宣 王英超 邵秀玲 伏建国 于文涛关键词:截获 边缘假单胞菌的分离鉴定及其特性 被引量:6 2011年 边缘假单胞菌Pseudomonas marginalis是假单胞菌科假单胞菌属植物病原细菌,能引发百合软腐病[1]、草莓花疫病、番茄细菌性髓部坏死病[2]、马蹄莲块茎软腐病[3]等,还可引发洋葱、莴苣、中国白菜、大蒜、姜、花椰菜、水稻等软腐病[4]。边缘假单胞菌具有如此广泛的宿主致病性取决于其生理特点,尤其是在0℃生长良好、5℃能大量繁殖等特点[3]。 甘琴华 厉艳 邵秀玲 王英超关键词:假单胞菌属 PSEUDOMONAS 细菌性髓部坏死病 植物病原细菌 软腐病 生理特点 番茄斑萎病毒N基因克隆及其植物表达载体的构建 被引量:1 2014年 目的对从云南楚雄番茄染病材料上得到病毒分离物进行鉴定,建立病毒N基因植物表达载体,以便进行抗病育种研究。方法利用RT-PCR技术克隆得到N基因,全长777 bp,将克隆得到的TSWV-N基因连接至质粒p BI121重组植物表达载体p BI121-TSWV-N。结果 TSWV-N基因与NCBI上已登记的番茄斑萎病毒中国云南分离物同源性达到97%~100%。结论所分离病毒确为番茄斑萎病毒,包含有TSWV-N基因的植物表达载体构建成功。 吴兴海 陈长法 余冬冬 王英超 封立平 王亚茹关键词:番茄斑萎病毒 N基因 植物表达载体 入境马蹄莲细菌性软腐病菌的分离鉴定 被引量:5 2014年 目的在参展青岛世界园艺博览会的荷兰进口马蹄莲植株上,发现叶片有明显褐色软腐症状,为明确引起马蹄莲软腐病的病原,对叶片进行病菌的分离鉴定。方法采用组织分离法,从荷兰入境马蹄莲植株的病变叶片中分离纯化到2株致病性细菌菌株(MTL1、MTL2),对该菌株进行鉴定和生物学特性研究。结果形态及培养特征、生理生化特性的研究结果表明该菌株在NA培养基上能形成白色圆形单菌落,薄而平滑、边缘整齐,光滑不透明,KB培养基上划线培养后可产生明显的绿色的荧光。显微镜下菌体呈杆状,具多根极生鞭毛,革兰氏阴性菌。结论经形态鉴定、培养特征、生理生化及16S r DNA序列分析和致病性测定实验,确认引起马蹄莲细菌性软腐病的病原为边缘假单胞菌(Pseudomonas marginalis)。 厉艳 魏晓棠 甘琴华 纪瑛 邵秀玲 王英超关键词:马蹄莲 细菌性软腐病 病原鉴定 玉米细菌性枯萎病菌EGase内切葡聚糖酶蛋白纯化研究初探 2016年 目的研究玉米细菌性枯萎病菌EGase内切葡聚糖酶蛋白纯化的方法。方法以玉米细菌性枯萎病菌(Pantoea stewartii subsp.stewartii)菌株为材料,分离纯化其内切葡聚糖酶Egase。制备EGase浓缩液,浓缩液经Sephradex^(TM)G-75凝胶过滤层析和DEAE-Sephorose Fast Flow阴离子交换柱层析等提纯步骤,获得了凝胶电泳均一的内切葡聚糖酶。结果经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测为一条电泳带,纯化后的EGase是单体蛋白,分子量约为72.3 k Da。Egase酶反应的最适温度是60℃,最适pH为5.0。结论本研究从玉米细菌性枯萎病菌中分离得到了一种新的内切葡聚合糖酶,对其部分性质进行了表述,为后续EGase基因的克隆及表达研究提供了研究基础。 厉艳 邵秀玲 张京宣 王英超 封立平 王简关键词:玉米细菌性枯萎病菌 内切葡聚糖酶 蛋白纯化 跨境农产品中重要有害生物防控技术及标准 张成标 吴兴海 魏晓棠 张京宣 尼秀媚 王英超 李建勇 林超 肖海 自中国加入世贸以来,农产品国际贸易日益活跃,有害生物跨境传播风险激增。在入境方面,中国已成为遭受外来生物入侵最严重的国家之一,每年经济损失超过2000亿元,在出口方面90%农产品企业受到动植物卫生安全技术壁垒影响,樱桃、...关键词:关键词:农产品 检测试剂盒 检测番茄斑萎病毒的RT-HDA引物、试剂盒及方法 本发明公开了一种检测番茄斑萎病毒的RT-HDA引物,试剂盒及方法,所述引物为序列表SEQ ID NO:1和SEQ ID No:2所示的寡核苷酸序列。所述的试剂盒包含如下组分:1)RT-HDA扩增反应液;2)无RNA酶的去... 吴兴海 陈长法 魏晓棠 纪瑛 林超 唐静 宋涛 王英超文献传递 玉米细菌性萎蔫病菌环介导恒温扩增(LAMP)快速检测试剂盒及其检测方法 本发明涉及一种用玉米细菌性萎蔫病菌环介导恒温扩增快速检测试剂盒及其检测方法。该试剂盒内有模板预处理反应液、恒温扩增反应液Ⅰ。检测玉米细菌性萎蔫病菌的方法包括细菌DNA的提取、模板预处理、LAMP恒温扩增、核酸检测。其优点... 封立平 尼秀媚 陈长法 倪新 厉艳 纪瑛 王英超 吴兴海 甘琴华